紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱,来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
分光光度计应用范围
1、紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值。
2、动力学检测:用于酶活力和生长曲线等动力学实验的测定。
3、全波长扫描:185-910nm全波长扫描,显示吸收曲线。
4、探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品。
5、核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值。
6、蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值,BCA、Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析。
7、菌液/悬浮细胞浓度检测:可检测菌液OD600值及监测悬浮细胞生长情况。
8、用户自定义检测:可自定义设置检测的参数,如最大吸收峰,计算公式等。
分光光度计特点
1.仅需微量体积样品,减少所需的样品消耗,并且无需稀释,0.5ul至2ul的样品即可完成测量。
2.检测波长范围:200-850nm
3.极快的检测速度,无需预约,可随时检测。每个样品的测量在很短的时间测试完成
4.更长的光学寿命,智能识别用户使用情况,5分钟内无操作,将自动关闭光源,以延长使用寿命。
5.待用户按下检测按钮时候,自动开启,整个过程无需用户干预,设备自动识别
6.图形软件操作界面更直观,结果可直接以EXCEL表格导出,便于数据查看和分析
分光光度计常见故障:
1、不使用氘灯时如何关闭氘灯?
当连接仪器时,选择仪器>配置>保养标签,然后点击氘灯边上的灯状态框,除去复选标记。只要扫描范围和固定波长测定不在氘灯的范围之内时,氘灯将处于关闭状态。
2、如果发生通讯故障,应该检查哪些项目?
①检查在仪器配置屏幕(选择仪器>配置)中是否选择了合适的通讯口;
②检查电缆是否正确,牢固地连接
③检查仪器的电源是否已经打开
3、紫外区读数漂移的原因
确认氘灯是否点亮。氘灯的使用时间是否超过了预期的500h寿命,一旦超过,光强减弱,也许需要更新。此外可检查夹缝宽度的设置是否太小。
4、为什么基线校正不能正常起作用?
是否样品室中放了样品?基线校正时有三种选择,可确保基线校正的正常。
①样品室池架内空置(空气对空气)。此时校正仪器的基线,特别适合精细的基线校正
②样品池中放入溶剂,参比侧空置
③样品和参比池中都放入溶剂
需要确认样品室的门已经关好。杂散光会影响基线的质量。此外,在指定的波长范围内溶剂和样品池的材料匹配。
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