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显微镜是人类最伟大的发明之一。在它发明出来之前,人类关于周围世界的观念局限在用肉眼,或者靠手持透镜帮助肉眼所看到的东西。显微镜把一个全新的世界展现在人类的视野里,人们第一次看到了数以百计的“新的”微小动物和植物,以及从人体到植物纤维等各种东西的内方便就看见部构造。显微镜还有助于科学家发现新物种,有助于医生治疗疾病。
日前,安徽省计量院申请的“生物显微镜校准装置”计量标准在计量标准器及配套设备、计量标准的主要计量特性、环境条件及设施、校准人员的资质能力、文件资料等符合计量标准考核规范要求,专家组给予一次性通过。此次该标准的建设填补了该项目的安徽省内空白,将为本省及周边地区的相应量值溯源提供有效保障。
生物显微镜是一种用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等也可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体的精密光学仪器。生物显微镜用来供医疗卫生单位、高等院校、研究院所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。
在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。其光学技术参数包括:数值孔径、分辨率、放大率、焦深、视场宽度、覆盖差、工作距离等。这些参数并不都是越高越好,它们之间既相互联系又相互制约的,实际应用中应当在保证分辨率的基础上根据镜检的目的和实际情况来协调参数间的关系。
电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像。由于电子束的波长远远小于可见光的波长,所以即使电子束的锥角仅为光学显微镜的1%,电子显微镜的分辨本领仍远远优于光学显微镜。光学显微镜的最大放大倍率约为2000倍,而现代电子显微镜最大放大倍率已经超过了300万倍。
生物显微镜的分类
1、按照定位级别分类。可以分为学生级、实验级、研究级生物显微镜。
2、按照目镜的个数分类。可以分为单目型、双目型、三目型生物显微镜。
3、按目镜和移动台的相对位置分类。可以分为正置生物显微镜和倒置生物显微镜。正置(常规)生物显微镜的物镜在移动台的上方,倒置生物显微镜的物镜在移动台的下方。
4、按成像原理分类。可以分为光学生物显微镜和电子生物显微镜。
光学显微镜主要由目镜、物镜、载物台和反光镜(集光镜)组成。目镜和物镜都是凸透镜,焦距不同。物镜的凸透镜焦距小于目镜的凸透镜的焦距。物镜相当于投影仪的镜头,物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜,该实像又通过目镜成正立、放大的虚像。经显微镜到人眼的物体都成倒立放大的虚像。
生物显微镜校准规范
生物显微镜校准环境条件:环境温度:(20±10)℃;相对湿度:45%~85%。
生物显微镜校准方法
1、外观方面
生物显微镜应标有名称、型号、编号、制造厂等信息。光学系统在整个视场内成像应清晰,视场内不应有影响观察的阴影或反射光斑等,成像的清晰区域应与视场同心。
生物显微镜各部分运动应灵活平稳,无卡滞和跳动现象,视场内照明均匀。双目显微镜左右两系统的光谱色应基本一致,无明显的明暗差异。
2、微调手轮刻线间隔量
微调手轮应灵活平稳,松紧适中。微调手轮刻线间隔量应测量手轮的起始、中间、末端三个位置。测量前,将指示表用专用夹具固定在生物显微镜上,保证指示表与显微镜紧固、牢靠,固定指示表时应保证测量头与载物台垂直接触。调节生物显微镜调焦手轮将指示表读数置零。旋转调焦手轮10个刻度,读取示值,以指示值的1/10作为测量结果。将在起始、中间、末端三个位置上的测量平均值作为校准结果。
3、生物显微镜物镜放大倍数误差
调节光源至适度位置,将带刻度分划尺的目镜安装在生物显微镜其中一个套筒上,将标准玻璃刻度尺置于载物台上,调节目镜与标准玻璃尺使分划尺刻线与标准玻璃尺刻线平行,避免出现测量误差。调节载物台使玻璃尺零位与分划尺一端对齐,然后直接读数。
4、双目显微镜左右两系统放大倍数差
依据生物显微镜物镜放大倍数误差的操作步骤,用带刻度分划尺的目镜替换对显微镜左右两个目镜并分别进行测量,得到两观察系统放大倍数,其差值即为校准结果。
5、双目显微镜左右视场中心偏差
将十字分划板置于载物台上,将带刻度分划尺的目镜安装在生物显微镜左筒,调节十字分划板与目镜,使十字分划与目镜内的十字中心完全重合,然后将目镜从左筒放人右筒读出其与分划板中心偏离值即为测量值。
6、目镜标尺的刻线间隔误差
在对生物显微镜物镜放大倍数误差进行校准后,该项目可以不进行计量校准。具体校准方法为在载物台上放置分度值为0.01mm的标准玻璃刻度尺,安装10倍显微目镜,调焦至目镜视场清晰。调节显微目镜与标准玻璃刻度尺使二者端线对齐,并保证二者线纹刻度方向平行。
此时在目镜视场中直接读取二者之差△L,即为目镜标尺相应刻线的间隔误差。若显微镜目镜带有十字刻线,校准方法与上述方法相同,测量结果应取两方向Zda值为间隔误差。目镜标尺的刻线间隔误差的测量需在目镜标尺全长范围内均匀分布的5点进行。
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