影响紫外分光光度计读数不稳定的根本原因应该有两类:一类是能量降低,信噪比下降,这个可能性比较大;另一类是信号接收和处理故障。具体如下:
一、能量降低
1、比色皿
如果是在400nm以下波长测量,需使用石英比色皿,假如使用普通玻璃比色皿会吸收大部分的紫外能量。还有比色皿一般有光面和毛面之分,毛面是手捏的,光面是对正光路的。
2、样品架
检查样品架是否在正确的槽位上,光是否全部照在比色皿上。方法是把波长设定到550nm左右,这时是比较明亮的黄绿色光,在样品室内用个小纸片挡下就能看到光斑。这个方法也能检测可见区的光源是否正常,滤光盘及波长驱动是否正常。
3、空白样品
样品室不放任何东西对空气调零,看是否稳定。如果稳定的话,应该是空白样品本身吸光度太高了。方法是先对空气调零,然后把空白样品放入光路中看读数。如果读数很大,例如接近3A,则不可用。
4、光源
先确认分析波长值,一般紫外可见有2个光源,紫外区用氘灯,可见区用钨灯,切换点一般在340nm。钨灯光较为明亮刺眼,氘灯光偏青紫色。如果仪器后面有透光窗口可以直接看,如果没有的话,需要打开外壳,打开灯室罩。光源都是用寿命的,能量变弱或干脆不亮了,要换灯。也有比较小的可能是光源供电电路故障,例如电源老化后可能导致无法正常点亮氘灯。
5、光路
看光路是否偏了,可以把波长设定到550nm左右,观察样品室内有无黄绿色光线,光斑能否正确照在接收器窗口上。确认灯室内光源光斑是否正确照在单色器入狭缝上,确认光路中有无杂物挡住。确认单色器内反射镜、透镜、光栅、滤光片等是否发霉或积满灰尘,这个需要厂家才能处理。
6、驱动电路故障
例如滤光盘驱动异常,导致滤光片用错或者干脆光路被遮挡。一般厂家或专业人员处理。
二、信号接收和处理故障
接收器(例如光电池或者光电倍增管)、放大电路、AD转换电路等都有可能。这类问题一般由厂家或专业人员处理,这里不详细说明了。