大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物。相关研究发现,大豆异黄酮对人体具有多种生理功能,可预防骨质疏松症,作为雌性激素替代品改善女性更年期综合症、降低绝经妇女的血脂水平,还具有抗菌、降低患乳腺癌的风险、预防前列腺癌等多种功能,是一种很有潜力的癌症化学预防剂。
大豆异黄酮含量的测定方法较多,如:纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法等。纸色谱法、薄层色谱法存在定量不准确,分离效果差等不足;气相色谱法操作较繁琐,容易受杂质干扰;HPLC法能较准确地检测几种主要类型的大豆异黄酮,但设备运行费用较高,检测时间较长,特别是在摸索提取工艺条件过程中需要多次及时地检测提取物只能大豆异黄酮的含量,不利于生产上大规模操作,因此寻找一种大豆异黄酮的快速测定方法显得尤为重要。
仪器准备
紫外可见分光光度计采用全新设计的比例监测双光束学系统,具有优良的光学性能,使用方便,是实验室分析必备的基本仪器之一。
样品液的制备:
新鲜豆渣在60℃条件下鼓风干燥48h至恒重,过20目筛,用石油醚脱脂24h,去除滤液,烘干滤渣。采用超声波法提取豆渣中大豆异黄酮,称取已处理豆渣粉5.0g(过20目筛),溶于40mL80%的乙醇溶液中,提取温度60℃,超声提取时间为30min,提取液过滤,置于50mL容量瓶中,95%乙醇定容至刻度。
测定结果:
紫外可见分光光度计应用于各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水、饮用水、加工过程用水、地表水、冷却水和锅炉补给水等。
豆渣是大豆加工中的副产物之一,产量丰富,目前主要是当作饲料用或肥料处理掉,利用率极低。研究表明,豆渣中同样含有异黄酮,作为黄酮醇类化合物,大豆异黄酮在紫外光区有较强吸收。现基于超声波辅助提取法对豆渣中的大豆异黄酮提取物中的大豆异黄酮含量,以期为豆渣资源的综合利用提供一定的参考。
紫外-可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。
紫外光区通常用氢灯或氘灯.见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。
日常维护
要懂得分析仪器的日常维护和对主要技术指标的简易测试方法,经常对仪器进行维护和测试,以保证仪器工作状态。
1.温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。
他们可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。
维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室,配置恒温设备,特别是地处南方地区的实验室。
2.环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性,也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁,保障环境和仪器室内卫生条件,防尘等。
3.仪器使用一定周期后,内部会积累一定量的尘埃,由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作;
同时将各发热元件的散热器重新紧固,对光学盒的密封窗口进行清洁,必要时对光路进行校准,对机械部分进行清洁和必要的润滑,恢复原状,再进行一些必要的检测、调校与记录。
紫外可见分光光度计主要由电光系统、光学系统、光电系统、电子系统和数据处理、输出打印系统等几个部分组成。
1、电光系统:
电光系统主要由氘灯、钨灯和相应的电源组成。电光系统对整机的稳定性有很大的影响,是仪器不稳定的主要原因之一。
2、光学系统:
光学系统包括外光路系统(转向平面镜、聚光镜)、单色器两个主要部分;其中,外光路和单色器各有很多类型。单色器是紫外可见分光光度计杂散光的主要来源,是整机使用时,主要分析误差的来源之一。
3、光电系统:
夕光电系统是将光信号变为电信号的关键部件,直接影响仪器的灵敏度和适用范围;一般有光电管、光电倍增管、硅光电池、二极管阵列等。
4、电子系统:
电子系统主要由放大器、A/D变换器等组成;其中的放大器,也是影响整机灵敏度、稳定性的主要部件。它又是仪器噪声的主要来源部件,直接影响紫外可见分光光度计的分析误差。
5、数据处理、输出打印系统:
数据处理、输出打印系统是决定整机的自动化程度的关键部件;特别是软件部分,直接影响紫外可见分光光度计的质量。