高效气相色谱仪柱温选择的原则是在保证难分离物质有良好分离的前提下(分离度满足要求),尽可能采用较高柱温,以缩短分析时间,保证峰型对称。固定液用量选择时,一般而言,载体的表面积越大,固定液用量可以更高,这样允许的样品进样量越多。
一、样品沸点在100~200℃:
1、柱温:样品平均沸点的三分之二
2、固定液含量:10%~15%
二、样品沸点在200~300℃:
1、柱温:低于样品沸点100℃
2、固定液含量:5%~10%
三、样品沸点>300℃:
1、柱温:低于样品沸点100~200℃
2、固定液含量:1%~3%
四、气体:
1、柱温:室温
2、固定液含量:固体吸附剂
高效气相色谱仪的不分流进样并不是绝对不分流,而是分流与不分流相结合。不分流进样的操作参数有进样口温度、载气流速、进样量、进样速度、溶剂和柱温等。
一、进样口温度:
进样口温度可以比分流进样时稍低些,因为不分流进样时样品在气化室的滞留时间长,气化速度稍慢些不会影响分离结果。进样口温度的底限是能保证待测组分在瞬间不分流时完全气化,否则过低的进样口温度会造成高沸点组分的损失,影响分析灵敏度和重现性。当然,过高的进样口温度会造成样品分解。因此要根据样品的具体情况优化进样口温度。当改变进样口温度后,必须重新优化设置瞬间不分流时间。
二、载气流速:
从减小初始谱带宽度的角度考虑,不分流进样的载气流速应高些,其上限应以保证分离度为准。分流出口的流量(开启分流阀后)一般为30~60mL/min。只要开启分流阀的时间设置正确,分流出口的流量在此范围内变化对分析结果的影响很小。
三、进样量和进样速度:
进样量一般不超过2μL。进样量大时应选用容积大的衬管。
进样速度应快些,可以用自动进样器进样。若采用手动进样,进样速度的重现性会影响分析结果。
四、溶剂:
不分流进样对溶剂的要求比较严格。
1、进样口温度、初始柱温、瞬间不分流时间和进样体积都与溶剂沸点有关。一般来说,使用高沸点溶剂比低沸点溶剂有利,因为溶剂沸点高时容易实现溶剂聚焦,且可使用较高的初始柱温,还可降低进样器针尖歧视和气化室压力的突变。
2、溶剂极性一定要与样品极性相匹配,保证溶剂在所有被测样品组分之前出峰,否则早流出的组分峰会被溶剂的大峰掩盖。同时溶剂要与固定相匹配,才能实现有效的溶剂聚焦。
五、柱温:
初始柱温尽可能低些,可以低于溶剂沸点10~20℃。
高效气相色谱仪色谱柱与色谱系统的连接处是靠密封垫密封。理想的柱密封垫应能提供无泄漏的密封效果,适合各种外径的色谱柱、不用过分拧紧、与色谱柱或接头不粘连和耐温度变化。
一、柱密封垫类型:
1、100%石墨垫:
质软易成形,密封性优良。
通常用于毛细管柱,适用于FID和NPD,但不能适用于GC-MS。
2、100%Vespel密封垫:
由耐高温的聚亚酰胺制成,质硬,氧渗透性最低,与金属或玻璃连接气密性可以,可重复使用。但温度反复升降后易泄漏。
3、Vespel-石墨垫:
由石墨与Vespel混合材料制成,氧扩散率低。但不能重复使用。
适用于FID、NPD、对氧敏感的检测器(如ECD)和GC-MS。
二、柱密封垫损坏的后果:
1、氧渗入系统,使本底噪音增大。
2、氧的催化作用造成柱流失。
3、使样品降解。
4、使样品流失。
5、保留时间重复性差。
三、柱密封垫安装要点:
1、不要拧太紧,先用手指拧柱帽,再用扳手拧紧。
2、保持清洁。
3、用前先将密封垫烘干。
4、避免各种污染。
5、更换进样口和检测器部件时,要更换密封垫。