紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同；
因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据Lambert-Beer定律说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比;如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc，(A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度)就可以对溶液进行定量分析。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。
若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。
实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
应用：
在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相(溶液本身)、固相(悬浮物、底质)、生物相(水生生物)。
在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。
在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等；
在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；
在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱，来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同；
因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
一般地，紫外可见分光光度计主要由光源系统、单色器系统、样品室、检测系统组成。
光源发出的复合光通过单色器被分解成单色光，当单色光通过样品室时，一部分被样品吸收，其余未被吸收的光到达检测器，被转变为电信号，经电子电路的放大和数据处理后，通过显示系统给出测量结果。
光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度，稳定。
可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm)紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)；氙灯：紫外、可见光区均可用作光源。
单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。
棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同。
光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm)。
利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。
吸收池：用于盛待测及参比溶液。
可见光区：光学玻璃池；紫外区：石英池。
检测器：利用光电效应，将光能转换成电流讯号。光电池，光电管，光电倍增管。
检流计（指示器）：刻度显示或数字显示、自动扫描记录。
另外一种说法，紫外可见分光光度计还主要由电光系统、光学系统、光电系统、电子系统和数据处理、输出打印系统等几个部分组成。
紫外可见分光光度计属于精密光学仪器，出厂前经过精细的装配和调试；
如果能对仪器进行恰当的维修与保养，不仅能保证仪器的可靠性和稳定性，也可以延长仪器的使用寿命。
1、工作环境检查：
1）放置要求：
仪器应平稳的摆放在水平固定的桌面上。
(因为分光光度计为精密光学仪器,在运行的过程中如果桌面不稳；
会影响其工作状态,且仪器处在工作状态时，灯丝处于高温状态,此时如果有剧烈的震动会导致灯丝折断。)
2）温度要求：工作环境的温度在5-35度之间。
(仪器在工作状态时内部较热需要用仪器自身的散热风扇与外界空气进行热交换散热；
如果外界温度过高,会导致仪器内部温度过高,从而加速仪器电器件与灯的老化速度,从而影响仪器的使用寿命。)
3）湿度要求：
工作环境的相对湿度不超过85%。
（仪器内部有很多电器元件与光学件，在湿度太高的情况下，电器件容易老化或烧坏， 光学件表面的镀铝膜也容易发霉。）
4）空气状况：
空气中不应有足以引起腐蚀的有害气体和过多的尘土存在。
2、样品室检查：
1）在开机之前，先要检查样品室中是否有比色皿或其他物品；
因为仪器在开机后要进行一系列的功能自检，如果有物品放在样品室中会导致自检出错。
2）每次使用后应检查样品室是否积存有溢出溶液，须经常擦拭样品室，以防止废液对部件或光路系统的腐蚀。
3）在测试完成后，请及时将样品从样品室中取出，否则，液体挥发会导致镜片发霉。
对易挥发和腐蚀性的液体，尤其要注意！
如果样品室中有漏液，请及时擦拭干净，否则会引起样品室内的部件腐蚀和螺钉生锈。
3、仪器的表面清洁：
仪器外壳表面经过喷漆工艺处理过，如果不小心将溶液漏洒在外壳上，请立即用湿毛巾擦拭干净，杜绝使用有机溶液擦拭。如果长时间不用时，请注意及时清理仪器表面的灰尘。
4、比色皿清洗：
在每次测量结束或溶液更换时，您需要对比色皿进行及时清洗；
然后放在低浓度酸性溶液里浸泡，浸泡后用蒸馏水冲洗比色皿的内外壁，否则比色皿壁上的残留溶液会引起测量误差。
5、电源检查：
1）插电源插座时，请检查当前电压是否与仪器标识的电压一致。
2）因为各个地区电网的质量差异很大，所以为了使仪器运行得更稳定和更可靠，建议给仪器外配一个稳压器。
3）仪器不用时请关机，并拔掉电源插头，以防止实验室的电源地线不好，而导致在雷雨天气时损坏仪器。
6、提示：
为缩短自检时间，仪器在开机时所进行的自检只是对一些常规的项目进行检查。
而仪器在运输、搬运与使用一段时间后（一般一个月）会导致结构件累计误差的产生；
所以我们建议用户在出现上述情况或感觉仪器测试数据与经验值相差较大时，应对仪器进行一次波长校正和暗电流校正。（具体操作方法见本手册中的“系统应用”一节）
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