X
你好,欢迎来到仪多多。请登录 免费注册
仪器交易网
0我的购物车 >
购物车中还没有商品,赶紧选购吧!

安捷伦液相色谱仪的标准操作程序 液相色谱操作规程

时间:2020-05-15    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  Agilent液相色谱仪标准操作程序
 
  1.目的:建立一个液相色谱的标准操作程序。
 
  2.范围:适用于Agilent液相的使用。
 
  3.责任:使用Agilent液相的化验员。
 
  4.程序
 
  4.1工作环境
 
  实验室温度为20~27℃,温度变化<3℃/hr,相对湿度<80%,液相色谱仪工作台,长2米、宽0.8米、承重大于80公斤,离墙距离0.3米以上。单相交流220V,(+5%~10%),50~60Hz,有单独的良好接地。配置稳压电源,功率大于2.5千瓦。
 
  4.2使用前的准备
 
  4.2.1二次蒸馏水,(建议用0.45微米水相滤膜过滤);甲醇或乙晴(色谱纯),(建议用0.45微米有机相滤膜过滤);其他样品所需流动相,(都需经过0.45微米滤膜过滤)。将上述溶剂放入超声波池,除去气泡,方可使用。
 
  4.2.2把流动相放入溶剂瓶中,打开purge阀,单击pump图标,出现参数设定菜单,单击setup选项,进入pump编辑画面,设flow:5ml/min,单击OK;单击pump图标,出现参数设定菜单,单击pump control选项,选中ON,单击OK,则系统开始purge,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续purge,直到所有要用通道无气泡为止;单击pump图标,出现参数设定菜单,单击setup选项,进入pump编辑画面,设flow:1.0ml/min,关闭purge valve。单击pump下的的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,也可输入阻止分析和关泵的体积,单击OK。
 
  4.2.3进行样品前处理(稀释或溶解至所需浓度)。
 
  4.3实验步骤
 
  4.3.1准备
 
  4.3.1.1开启Agilent 1100LC各模块电源。
 
  4.3.1.2打开计算机,双击online图标。
 
  4.3.1.3从"view"菜单中选择"method and run control"画面,单击"view"菜单中的"show top toolbar","show status toolbar","system diagram","sampling diagram"使其命令前有"√"标志。
 
  4.3.2数据采集方法编辑
 
  4.3.2.1从“method"菜单中选择"edit entire method"项,选中除"data analysis"外的三项,单击OK,进入下一画面。
 
  4.3.2.2在"method comments"中加入方法的信息(如This is for test!),单击OK进入下一画面。
 
  4.3.2.3泵参数设定
 
  在"flow"处输入流量1ml/min,在"solvent"处输入流动相中各溶剂所占的比例,也可"insert"一行"timetable",编辑梯度。在"pressure limits max"处输入柱子的zui大耐高压,以保护柱子,单击OK进入下一画面。
 
  4.3.2.4柱温箱参数设定
 
  在"temperature"下面的方框内输入所需的温度,并选中它点击"more>>"键,如图所示,选中"same as left"使柱温箱的温度左右一致,点击OK进入下一画面。
 
  4.3.2.5 VWD检测器参数设定
 
  在"wavelength"下方的空白处输入所需的检测波长,在"peak width(response time)"下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1min 。 在"timetable"中可以"insert"一行,可以输入随时间切换的波长。
 
  4.3.2.6在"run time checklist"中,选中"data acquisition",单击OK。
 
  4.3.2.7单击“method"菜单,选中"save method as",输入一方法名,单击OK。
 
  4.3.2.8从"run control"菜单中选择"sample info"选项,输入操作者姓名,在"data file"中选择"manual"或"prefix"。
 
  4.3.2.9从"instrument"菜单中,选择"system on"。
 
  4.3.2.10单击OK,等仪器ready,基线平稳,从"method"菜单中选择"run method",进样。
 
  4.3.2.11进样时,阀门位置处于"inject"位置,进样针取样量应为所规定体积的三倍,用滤纸拭净针头表面残留液,进样时要轻而快,进样完毕应快速将阀门搬至"load"位置,进样完毕,数分钟后将进样针拔下,阀门回复到"inject"位置。 4.3.3数据分析方法编辑
 
  4.3.3.1从"view"菜单中,单击"data analysis"进入数据分析画面。
 
  4.3.3.2从"file"菜单中选择"load signal"选项,选中您的数据文件,单击OK。
 
  4.3.3.3做谱图优化,从"graphics"菜单中选择"signal options"选项,从"ranges"中选择"auto scale"及合适的显示时间,单击OK,或选择"use ranges"调整。反复进行,直到图的比例合适为止。
 
  4.3.3.4积分
 
  4.3.3.4.1从"integration"中选择"auto integrate",如积分结果不理想,再从菜单中选择"integration events"选项,选择合适的"slope sensitivity","peak width","area reject","height reject"。
 
  4.3.3.4.2从"integration"菜单中选择"integrate"选项,则数据被积分。
 
  4.3.3.4.3如积分结果不理想,则重复上两步动作,直到满意为止。
 
  4.3.3.4.4单击左边"√"图标,将积分参数存入方法。
 
  4.3.3.5打印报告
 
  4.3.3.5.1从"report"菜单中选择"specify report"选项,进入。
 
  4.3.3.5.2单击"quantitative results"框中"calculate"右侧的黑三角,选择所需的报告形式,其他选项不变,单击OK。
 
  4.3.3.5.3从"report"菜单中选择"print report",则报告结果将打印到屏幕上,如想输出到打印机上,则单击"report"底部的"print"钮。
 
  4.3.4关机
 
  4.3.4.1关机前,先用水和有机溶剂对系统进行梯度冲洗,然后再用有机溶剂冲洗系统,然后关泵(适用于反相色谱柱)。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
 
  4.3.4.2退出化学工作站,及其他窗口。
 
  4.3.4.3关掉Agilent1100电源开关,计算机(用shut down关)。
 
  4.4.1色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂,两端封死。
 
  4.4.2对于手动进样器,当使用缓冲液时,要用水冲洗进样口,同时搬动进样阀数次。
 
  4.4.3流动相使用前必须过滤、超声,不能使用多日存放的纯化水(易长菌),应每天更换纯化水。

液相色谱仪对周围的环境的要求

  液相色谱仪和大多数分析仪器一样,对仪器周围的环境有一定的要求,但没有太特殊的的要求,满足一般分析仪器室的基本条件,就能保证仪器的稳定运行和安全操作。

  (1)照明:

  室内照明要光线适中,避免阳光直射。为避开直射光线对仪器操作、观测的影响,仪器(显示屏)应侧向光线。实验室窗户要挂窗帘,以便随时调节光照强度。

  (2)通风:

  使用液相色谱仪分析过程中,由于流动相中含有挥发性有机溶剂(甲醇、乙睛等)会产生有害气体,对仪器中的光学元件带来腐蚀,应注意仪器室的通风,以排除室内有害气体、保持空气清新。

  通风主要有两种方式:一种自然通风,定时打开门窗,让内外空气对流;另一种是强制通风,如用通风柜、排风扇等,及时将有害气体排出室外。

  (3)环境温度和湿度:

  适宜的温度和湿度是保障HPLC仪正常运行、性能稳定的必要条件。

  HPLC仪一般要求室温在20一30℃之间,日温度变化2一3℃,不要波动太大,否则,在开机分析时会影响色谱分离;

  夏季一定要控制室温不要超过30℃,温度太高会使流路系统产生气泡,影响检测器的正常工作(如荧光检测器)。室内相对湿度应控制在60%以下。

  (4)供电:

  液相色谱室应设有照明电源和动力电源,动力电可供仪器运行使用。为减少噪音的干扰,仪器应远离瞬时供电的大功率电器设备,如:大型电动设备(超低温冰箱、电烤箱等)、电梯、空调系统等。为保证HPLC输液泵的精度,必须要保证稳定的输人电压,为此,建议色谱室应设有和仪器负荷相当的稳压电源。室内墙上应安装有接地电阻符合要求的地线,用于仪器设备保护性接地的公用地线接地电阻≤4Ω。

  (5)洁净度:

  悬浮于空气中的颗粒物质会对色谱仪器分析带来干扰,使本底和噪声升高,成为分析测试的污染源,直接影响高纯物质的纯度与痕量杂质的分析。

标签: 液相色谱仪
液相色谱仪 液相色谱仪对周围的环境的要求_液相色谱仪

液相色谱仪的维修保养

  液相色谱仪作为实验室常见的一款产品,日常维护与保养中有哪些需要注意的地方,我们来介绍一下:

  1、流动相的抽作要求:

  高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;

  流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)

  2、吸滤头:

  特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。

  3、单向阀

  如遇到泵压不稳或流动相不能抽取,则可能是单向阀出现问题,卸下用异丙醇超声波清洗,清洗时须按其安装的方向放置在小烧杯中,切记不可与安装方向倒置超洗!

  4、泵头:

  泵头漏液或出现其它故障一般要申请维修(如漏液,或更换柱塞杆及其密封垫等)

  5、过滤器:

  当色谱峰出现异常情况时,有可能是此部件被污染, 拆下用异丙醇超洗或更换过滤垫片。

  6、排液阀:

  此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损,可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。

  7、手动进样器:

  平时应注意用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗;如出现漏液现象,原因极可能为转子密封垫磨损或污染,一般须申请维修或更换配件。

  8、流通池:

  在色谱峰不正常时会可能是此部件补污染。可拆卸后取出其中的垫片用异丙醇超洗(可根据说明书进行操作或申请维修)。

  9、工作站

  出现死机可重起计算机;不正常运行时,首先可更换电脑测试其硬件故障;或在本机上重新插拔接口、重新安装软件。

标签: 液相色谱仪
液相色谱仪 液相色谱仪的维修保养_液相色谱仪

上一篇:YT020型土工布透水性测定仪...

下一篇:恒温水浴的操作使用及注意事项

  • 手机多多
  • 官方微信订阅号
商品已成功加入购物车!