常见液相色谱法按其分离原理可以分为液-固吸附色谱法、正相液-液分配色谱法、反相液-液分配色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。每种液相色谱法的不同分离原理具体总结、归纳如下,可供参考!
1.液相色谱法:在液固吸附色谱法中,流动相为液体,并使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力不同进行分离的,其分离过程是一个吸附、解吸附的平衡过程。目前,液固吸附色谱法较常用于非离子型化合物,用于分离同分异构体。
2.液-液分配色谱法:在液液分配色谱法中,流动相与固定相都是液体,按照固定相和流动相之间互不相溶进行测试。同时,按照其极性不同分为正相液液色谱法以及反相液液色谱法。其中正相液液分配法的流动相极性小于固定相极性;反相液液分配色谱法中则是选用极性较大的流动相与极性较小的流动相。
3.离子交换色谱法:在离子交换色谱法中,固定相是离子交换剂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基或季氨基。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。目前,离子交换色谱法主要用于分析有机酸、氨基酸、多肽及核酸。
4.离子对色谱法:在离子对色谱法中,固定相与流动相都为液体,是液液色谱法的分支,是根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子对化合物后,在非极性固定相中溶解度增大,从而实现分离的色谱法。主要用于分析离子强度大的酸碱物质。
5.分子排阻色谱法:在分子排阻色谱法中,固定相是有孔径的多孔性填料,流动相是可以溶解样品的溶剂。小分子量的化合物可以进入孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,直接随流动相流出,分子排阻色谱法利用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完成分离。目前,分子排阻色谱法常用于分离高分子化合物。