X
你好,欢迎来到仪多多。请登录 免费注册
仪器交易网
0我的购物车 >
购物车中还没有商品,赶紧选购吧!

如何挑选合适的液相色谱柱 液相色谱解决方案

时间:2020-05-17    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  现代液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。
 
  硅胶基质填料:
 
  1、正相色谱
 
  正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
 
  由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份zui先被冲洗出色谱柱。
 
  正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform)二氯甲烷(Methylence Chloride)等。
 
  2、反相色谱
 
  反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对教弱的官能团的键合相。
 
  反相色谱所使用的流动相极性教强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
 
  样品流出色谱柱的顺序是极性教强组合zui先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
 
  常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C6H5(Phenyl)等。
 
  聚合物填料:
 
  聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等,其主要优点是在PG值为1-14均可使用。
 
  相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的淑水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
 
  现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效教低。
 
  其他无机填料
 
  其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化诰填料也可用于 HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化诰微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达到1000C。由于氧化诰填料几年才开始研究,加之前的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。
 
  怎样选择填料粒度
 
  目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3,5和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是*的因素。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很用有的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5UM填料的柱效提高近30%;然而;3um的色相谱的背压却是5um的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱,以缩短分析时间,另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。
 
  如何保证良好的柱性能与柱寿命
 
  认证阅读色谱柱使用说明书
 
  使用填充良好的色谱柱
 
  尽量减少压力波动,避免机械及热冲击
 
  使用保护柱及在线过滤器
 
  经常以强溶剂冲洗色谱柱
 
  充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与保强留分成
 
  用稳定的固定相(C18zui稳定)
 
  在中等PH纸操作(6~8),用有机年成液溶
 
  色谱柱使用温度小于400C
 
  硅胶基质的的色谱柱,应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0
 
  在水流动相与缓冲浓液中加200ppm的叠氮钠
 
  流动相中含有缓冲溶液,应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%
 
  过夜或储存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存(乙晴)

液相色谱速率理论方程式

  在范第姆特方程模型基础上,根据液相色谱的特点作了某些修正,得到如下几种液相色谱速率理论方程式。  1、高效液相色谱速率理论方程式:

 

  其中涡流扩散项:

  分子扩散项:

  传质阻力项:

  其中包括:称为流动的流动相中传质阻力系数,称为滞留的流动相中的传质阻力系数,称为固定相中的传质阻力系数。  高效液相色谱速率理论方程详细表达式:

 

  式中,  dp——色谱柱填料平均粒径;  df——固定相有效液膜厚度;  U——流动相平均流速;  Dm——组分分子在流动相中的扩散系数;  Ds——组分分子在固定相中的扩散系数;  wm——由色谱柱和填充的性质所决定的系数;  ws——与容量因子k有关的系数;  wsm——与颗粒微孔中被流动相所占据部分的分数以及容量因子k有关的系数。其余符号含义同前面。  从上式中可以看出,液相色谱和气象色谱的速率方程式基本一致,主要区别在于液相色谱中影响柱效的主要因素是传质阻力项,而份子扩散项对柱效的影响不像气相色谱那样明显。

  2.吉丁斯修正速率理论方程式:  吉丁斯认为流动相流速对涡流扩散项影响较大,对范第姆特方程修正如下:

  式中为涡流扩散项,相当于上式的含义。

标签: 液相色谱
液相色谱 液相色谱速率理论方程式_液相色谱

液相色谱柱的结构说明

  液相色谱柱的结构:

  1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。

  柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。

  在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。

  2、柱填料:

  液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。

  正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10?m的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。

  反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。

  常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10?m之间。

  

标签: 液相色谱柱
液相色谱柱 液相色谱柱的结构说明_液相色谱柱

上一篇:气相色谱仪篇-课后答疑 气相色...

下一篇:2021全站仪快速架设技巧,详...

  • 手机多多
  • 官方微信订阅号
商品已成功加入购物车!