液相色谱仪系统是由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。工作原理是储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
液相色谱仪系统应用：
液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度, 使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展, 有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
HPLC成为解决生化分析问题zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
液相色谱- 质谱连用技术受到普遍重视, 如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等; 液相色谱- 红外光谱连用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类, 海水中的不挥发烃类, 使环境污染分析得到新的发展。
1、一般定性 用已知物和直接对照法定性，这是一种相对可靠的方法，主要可以分为以下四种： 1）保留时间和保留体积 2）相对保留值 3）已知物增加峰高法 4）双柱货双体系 实验表明，各类同系物在两根不同柱上的Vg值有如下关系：
式中：VgI表示在柱I上的比保留体积；VGII表示在柱II上的比保留体积；A1与C1为常数。 从上式可以看出，同系物在两个性质不同的色谱柱上，比保留体积Vg的对数有线性关系，下图就是根据某些化合物和领苯二甲酸二异葵酯柱上的比保留体积的对数制作出的。 经过领苯二甲酸二异葵酯柱分离后，在lgvgII为1.8的位置上有一个未知峰，由图可看出有两种可能性，即酮与伯醇；此时，将样品在柱上I上进行分离，得到lgVgII为1.62的色谱峰，从而可确定该峰是酮而不是醇。 在液相色谱中，可用双体系定性，通过改变流动相和固定相，从而改善分离的选择性，通常改用与原色谱体系有较大差别的其他色谱体系来实现分离。 2、保留值分随份子结构或性质变化的规律 1）GC中的碳数规律：同系物间，在一定温度下，保留值变化遵循如下规律：
2）GC中的沸点规律：同族具有相同碳原子数目的同分异构体间存在如下关系：
3)LC中的保留值规则：对于份子中存在不同数目的重复官能团的化合物，有如下的经验公式：
3、反向液谱的定性 在气谱中广泛使用的Kovats指数定性，在夜谱中，由于组分的保留行为不仅与固定相有关，还与流动相的种类及浓度有关，所以不能直接用同系物间，在一定温度下，保留值变化遵循如下规律指数定性。 4、计算机检索 计算机不仅都能贮存大量保留指数，而且还可以将库中标准数据转换为用户色谱条件下保留指数和tR值，靠检索功能定性。 5、色谱中的辅助技术 液相色谱，对于未知物结构的确定，也常常使用一些辅助技术，常用的有质谱，红外，核磁等。 使用非在线联用技术时，首先将色谱分离后的纯样品收集。
液相色谱应选择从以下几个方面考虑：
1．漂移
是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离，通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了分析效率。
2．系统的，整体开发
这里指的是仪器的整体开发，是一个完整的系统。目前市场上有这个现象，说我的泵是进口的，或者是检测器怎么好，用了什么很多的进口件组装等等。其实这是个误区。液相色谱是个复杂的系统，不是整体开发的，各项指标之间、软件和硬件、硬件和硬件等都不匹配，整体水平不会高到哪里去，而且在售后服务方面对用户也是不负责任的。
整体开发的主要优点有：各项技术指标统一、仪器各单元的通信协调、能够建立一个整体的数字化评价系统、体现了企业的科技及开发实力。
3．操作方便：
操作方便性无论是对新手还是成熟的用户都是很重要的。操作越简单，有利于提高分析效率，也为以后分析方法的拓展提供有力的帮助。上海伍丰科学仪器有限公司的WS-100工作站软件实现了真正的智能化操作。它摒弃了以往工作站软件只能起到数据处理的理念，率先在国内推出了集控制与后处理于一身的软件，在操作使用上给用户带来了极大的方便。
是反映仪器灵敏度的重要参数。CL=2×Nd×C/H（CL ：最小检测浓度 Nd:噪音 C：样品浓度最小检测浓度 H：样品峰高）由上式可见，最小检测浓度是和噪音成正比的，噪音越大，最小检测浓度就越大，灵敏度就越低。某些厂家回避了这个指标，说明他们不愿在最小检测浓度的基础上去比较噪音。
4．噪音
是指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好，否则噪音过大将会导致基线不稳，甚至影响分析结果。
5．定性定量重复性
主要是考核仪器稳定性的指标，这对于分析样品来说是非常重要的。好的仪器其稳定性应该是十分优秀的，这就要求多次进样保留时间及含量的一致性，这样做出来的结果才能使人信服。
有的朋友会认为这些指标好像都是检测器的。对的，但是就前面所说条件是要放在整个回路和系统里去看去比较。例如：泵的脉动会直接影响噪音指标，泵的流量准确度、精确度指标，以及密封性不好也会影响相关指标。所以要系统地看指标。例如：某些公司在公布的指标中，噪音和漂移指标写的条件是空池或有的干脆不写。这个指标只考核了UV检测器光学和电气的特性，与实际情况相差甚远，并没有考验泵的压力脉动，液流回路的阻尼和UV检测器流通池的性能。所以我们认为从以上的主要指标中可以反应出仪器的一些真实水平。
449717568