二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,如稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。 二氧化碳培养箱有气套式加热和水套式加热两种加热方式,两种加热系统都是精确和可靠的,同时它们都有着各自的优点和缺点。 1.气套式加热: 气套式加热是通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的,又叫六面直接加热。套式与水套式相比,具有加热快,温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点,特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关取放样的培养。此外,对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化,水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗,并要经常监控水箱运作的情况,还有潜在的污染隐患。 2.水套式加热: 水套式加热是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的,其优点:水是一种很好的绝热物质,当遇到断电的时候,水套式系统就可以比较长时间的保持培养箱内的温度准确性和稳定性,有利于实验环境不太稳定的用户选用。
二氧化碳培养箱内通常采用两种方式控制箱体内湿度。一是采用被动控湿法,即通常的二氧化碳培养箱内均放置一个3L的水盘,内盛3L无菌纯水,37度的温度,水自然蒸发,使箱体内湿度达到95%。二是一些高级的二氧化碳培养箱,采用主动加湿系统(蒸汽发生器,加热水盘,喷雾器等),可以 控制箱体内的湿度,如低温培养时(低温二氧化碳培养箱)就需要主动加湿的方法。 水盘污染控制问题:这种高湿度条件下,放置在箱体内部的水盘中的纯净水,很容易造成微生物的滋生,产生污染,导致细胞培养完全失败。 目前,控制水盘内污染的方法有如下几种: 1、定期(至少每两周一次),更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。 2、在水盘内添加适量硫酸铜,配制方法:20g无水硫酸铜+5ml浓硫酸+1L灭菌纯水。 3、夏季气温高时,水盘里加0.02%的叠氮钠可以有效的预防真菌污染。 4、水盘内添加适量抗生素。 5、定期为培养箱(含水盘)进行一次高温灭菌。 6、使用专用的水盘污染控制试剂,如市面上有些CO2培养箱厂家提供水盘污染控制专用的银离子消毒盒,说明书上描述能有效杀灭600中微生物,能持续使用6个月,但此类专用污染控制试剂较常规方法,存在价格较昂贵缺点。采用主动加湿的方式就不存在污染问题。