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糖检测色谱柱使用时注意事项和保存方法 色谱柱维修保养

时间:2020-05-19    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
糖检测色谱柱特点:
1.柱寿命更长:杂化键和相技术使得这款糖柱兼有硅胶柱的耐压性与聚合物柱的酸碱耐受性。
2.基线更稳定:与常规的用于分析糖的硅胶氨基柱比较,即使使用梯度洗脱也没有基线漂移问题。
3.可兼容使用在梯度洗脱条件下的ELSD检测。
 
糖检测色谱柱使用时注意事项:
1.为避免管路中的有机溶剂和气泡进入糖检测色谱柱,先用水冲洗整个色谱系统,然后才能接入糖检测色谱柱。
2.不要让有机溶剂进入柱中,否则会使填料脱水,导致柱床损坏,要小流速开启泵,不要快速加大流速,以防止压力迅猛升高而导致柱床损坏。15mm的柱子流速不要超过3ml/min。
3.每次使用后务必用蒸馏水冲洗干净将含盐的流动相置换干净,若较长时间不用请按保存方法保存。
 
糖检测色谱柱保存方法:
1.将糖检测色谱柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存,或三氯丁醇(0.015%)苯基汞代盐(0.001-0.01%)将糖检测色谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。
2.再次使用时,用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。
3.如果第二天还要使用也要从系统中取下,将柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。

色谱柱再生问题分析

  当色谱柱使用一段时间以后,柱内由于各种原因,滞留了一些高沸点组分或氧化物等,除柱效有所下降外,还可能出现基线波动或“鬼峰”。为了去除污染物,使柱效和基线恢复到原来的状态,称为色谱柱的再生。色谱柱的再生和柱老化有一定区别和不同,它是柱在使用一段时间柱性能下降,经处理后尽量恢复到原来性能的过程。  A、色谱柱在以下几种情况必须再生处理  a.使一段时间,柱效明显下降;  b.柱被污染,特别是在程序升温时,基线漂移和噪声超过容忍程度或出现“鬼峰”;  c.柱头塌陷,柱床短路或断位(在玻璃柱中容易发现),而出现尖峰或双重峰;  d.峰形展宽,保留时间明显变化;  e.待分离组分和固定相表面非特异性相互作用,引起保留时间较短的峰拖尾或出现双峰;  B、毛细管柱再生的几种方法  a.用载气将色谱柱污染物冲洗出来;  b.将柱头截去100mm 或更长一些;  c.若使用交联的色谱柱,可在仪器上反复注射溶剂进行冲洗。常用的溶剂依次为丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷,每次可进样5~10μL;  d.交联柱在仪器上冲洗无效时,可把柱拆下来用二氯甲烷或氯仿冲洗,溶剂用量视柱的污染程度而定,一般20mL 左右。  C、色谱柱再生前应注意的问题  当分析出现问题时,不能只考虑是柱问题,而马上进行再生。除上述情况外,还应考虑样品处理、进样技术、操作有无失误、数据处理参数有无改变等可能带来的问题。  a.衬管、预柱和检测器被污染也会引起基线不稳定、出现“鬼峰”或裂解峰;  b.新的注射垫也会引起基线漂移和出现“鬼峰”;  c.衬管密封欠佳、柱安装死体积或检测器固有特性也会引起较早出现峰的拖尾;  d.分析系统发生变化(如漏气严重)也可能使保留时间突变;  e.峰变宽,除柱效下降外也可能由柱外效应引起;  f.进样量太大也会引起峰变宽、拖尾或保留时间变短;  g.色谱柱长时间样品过载,保留时间也会变小等。  D、色谱柱再生时应注意的几个问题  1.如前所述和色谱柱老化一样,不是温度越高越好,时间越长越好;建议不要使用长时间烘烤的方法,来处理受到污染的色谱柱,因为烘烤时,温度会把污染的残留物变成不能溶解的物质,再用溶剂清洗也无济于事;  2.仪器在高灵敏度操作时,如:量程在1×10-11A/mV以下,痕量分析程序升温过程中,温度升到大于180℃后,基线明显漂移是不可避免的;  3.不同类型柱子,再生方法不同;  4.样品种类、组分、进样量不同或操作时间长短不同,再生方法也不同;  5.仪器本身条件如:气源种类、纯度、净化条件、进样口结构和操作检测器不同,再生柱方法也有区别;  6.高分子量组分污染色谱柱后,高温再生时间长会导致固定相的老化;使用交联或键合柱可以用溶剂漂洗再生,漂洗溶剂流动方向一定要从柱出口注入。应该注意,毛细管柱交联键合率通常不到90%,因此会漂洗掉未化学结合的液相部分,所以保留时间和分离状态会有所变化;  7.对于难挥发物,碳化物是不能通过再生除去,对于填充柱可以使用带衬管气化室进样器,对于毛细管可通过把柱入口切去30~50cm的方法除去污物段。有条件的可以使用预柱,把不挥发的有机物、无机物和颗粒材料阻留在预柱中,需要时更换预柱;  8.在某些情况下,色谱柱要在温度极限附近使用,这时基线漂移和大噪声已不可避免,柱的再生要求只能视情况而定;  9.不是所有色谱柱通过再生均能恢复原来性能。

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反相液相色谱柱的使用

    反相液相色谱柱具有无与伦比的性能。即使对于非常难分离的碱性化合物,也可获得出色的峰形,从而改善了这些类型的样品的柱效和分离度。

 

    反相液相色谱柱使用中的注意事项

    1、新C18柱在使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗,作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使反相液相色谱柱的性能达到更好状态。

    具体操作是,将配制好65%的乙腈/水冲洗后,把色谱柱进口端连接在色谱仪上,出口端放空(不可连上检测器,以免污染了检测器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将色谱柱中的清稀溶液吹干,过20分钟后再接上检测器,以1.0ml/min的流速,继续冲洗2~8小时;

    2、液相色谱仪检测分析样品完毕后,须冲洗色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时,需将色谱柱中的酸或盐冲洗干净,通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积;

    3、若反相液相色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗3-4小时以上,保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液中;

    4、由于C18柱的固定相疏水性较强,在使用过程中尽量不要使用高水相条件,若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的负面影响;由于碳载量高,表现尤为明显,建议使用过程中水相比例不超过90%;

    5、压力升高、柱性能下降:通常为色谱柱被污染,对色谱柱进行再生处理可恢复部分柱效;

    6、压力骤升:通常由盐析出或筛板堵塞引起,若是盐析出,用10%甲醇水低流速冲洗至压力恢复即可;若判断并非盐析出,以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱(将色谱柱反接,不接检测器),若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效,需寻找其他原因。

    在硅胶制造和键合技术方面进行了改进,因此能够获得这样优异的性能,并且这些技术完全由控制。

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