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荧光分光光度计的基本原理 光度计工作原理

时间:2020-05-24    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计,配有寿命和相分辨测定的荧光分光光度计等。
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
荧光分光光度计的基本原理
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。
物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光.
在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

需要关注的双光束紫外可见分光光度计特点

    双光束紫外分光光度计开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等,广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。

    双光束紫外分光光度计仪器特点:

    1、使用32位微控制器ARM11,其主频可达到533MHz,采用美国BB公司专为光电数据采集处理的20位高性能AD,性能稳定,可通过USB接口存储转移数据。

    2、功能强大,主机可独立完成光度测量、定量测量、光谱扫描、动力学、DNA/蛋白质测试,多波长测试及数据打印等功能。

    3、仪器采用7英寸LCD彩屏显示器,直接显示扫描图谱,屏幕界面简单,方便使用。

    4、设计独特的光学系统,高性能1200条/mm光栅和进口接收器确保仪器有优良的性能指标。

    5、插座式氛灯和钨灯设计,换灯后免光学调试。

    6、 24位高速、高精度A/D转换,仪器精度高,反应速度快。

    7、宽大的样品室,可容纳5-100mm各种规格的比色皿

    8、可直接连接打印机,打印图谱和实验数据。

    9、仪器采用悬架式光学系统设计和长光程光路设计,从而大大提高了仪器的稳定性和可靠性以及仪器的光学分辨率

    10、WINDOWS图形化界面,方便选择,快捷操作。

    11、全新改良的丝杆传动机构,使仪器波长精度重复性好,波长精度高。

    其它附属功能:

    A:波长校准

    B:光度精度复核

    C:波长精度复核

    D:能量最大点寻找(用于微量测试)

    E:可直接连接HP和Epson打印机打印实验数据和图谱。

    准双光束扫描型紫外可见分光光度计主要特点:

    1.具有高分辨率、良好的稳定性、重复性。外观新颖操作方便。

    2.断电保持:断电时可保持内存的测量数据不丢失。

    3.LCD大屏幕显示、菜单式操作界面,轻触式按键,外观新颖操作方便。

    4.仪器内部采用插键式组装方法,更换零件无须专用工具,维修方便。

    5.所有设置参数和试验结果均能存储,自动记录灯的点亮时间。

    紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。当前已成为全世界使用较多、覆盖应用面广泛的分析仪器。它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面,用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。因为仪器涉及到光学、电学和结构等,所以它需要在一定的环境中应用。

标签: 光度计
光度计 需要关注的双光束紫外可见分光光度计特点_光度计

荧光分光光度计的优缺点

  荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。

  荧光分光光度计的基本原理:

  由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子 吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光。

  不同物质由于分子 结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

  荧光分光光度计的优缺点:

  优点:灵敏度高,可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱,不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。

  缺点:

  1、荧光的光强并不高,所以呈线性情况有时不很理想;

  2、某些反应荧光持续的时间较短;

  3、荧光的发散方向不集中,不像透射光那样集中,强度高;

  4、受某些离子的干扰影响,荧光会湮灭,试验速度必须要快。

标签: 荧光分光光度计
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