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如何缓解赛默飞色谱柱频繁损坏的问题 色谱柱选购指南

时间:2020-05-29    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
   如何缓解赛默飞色谱柱频繁损坏的问题
  赛默飞色谱柱具有数字通讯功能,软件与仪器的联控功能,直接鼠标点击,就可以完成各种检测。检测器传输采用三级齿轮减速结构,仪器抗震性能优越,防止运输及使用过程震动;采用高亮度OLED显示屏,优越的美观可视效果,超高的质量稳定性。内置氘灯和氘灯,内置器件无需更换即可实现波长从190-850nm转换;仪器使用原装氘灯,可手动关/开,更换氘灯时,不必调整光轴,维护简便,氘灯使用寿命长。光路系统采用优先的凹面光栅器件、结合精密定位结构和独特的散热技术,使波长精度高,偏移小和稳定时间短,的光学系统和数字过滤极大的提高了仪器的灵敏度和结果的准确性和重复性并保证了仪器的稳定可靠。人性化、便携化的软件界面,人机工程的操作平台与按键,操作便捷、快速;样品和参比能量显示便于故障的判断和排查;仪器内部安全报警与自动故障排查功能,维护方面快捷。具有波长自动校正功能,自动调零,多量程输出选择可满足各浓度分析需求。
  在赛默飞色谱柱的使用中,我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面:
  泵头密封圈的磨损;进样阀转子密封圈的磨损;析出的缓冲盐;样品中的复杂易吸附基质等等;其实,在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善,因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。
  预防措施:
  1、在液相系统中加入在线过滤器
  在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米,对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。所以,在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物,以防止柱头过滤筛板的堵塞。注意:但是对于非常低死体积的液相系统,在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言,色谱图不会有太大变化。
  2、在柱子前端使用保护柱
  保护柱有很多种,通用型、一体式、卡套式,但是它其实是一个和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因为它具有和分析柱相同的内部填料,所以保护柱不仅可以阻隔颗粒物,还可以阻隔易吸附的样品基质组分。注意:由于保护柱中可能有大量的强保留组分,在用强溶剂清洗系统时请取下保护柱,以防止这些强保留组分被洗脱进分析柱。保护柱如果出现吸附饱和也可能会对分离效果有影响。
  3、对样品进行净化处理
  有一些液相的分析方法没有明确标注样品的净化,但我希望大家在做分析时都能够考虑样品的净化,常用的方案是对样品进行过滤。在实际工作中,赛默飞色谱柱的储存也会影响柱子的使用寿命。那么对于色谱柱的储存,也有以下建议:
  4、使用时注意事项:
  .为避免管路中的有机溶剂和气泡进入色谱柱,先用水冲洗整个色谱系统,然后才能接入凝胶柱。
  .不要让有机溶剂进入柱中,否则会使填料脱水,导致柱床损坏,要小流速开启泵,不要快速加大流速,以防止压力迅猛升高而导致柱床损坏。15mm的柱子流速不要超过3ml/min。
  .每次使用后务必用蒸馏水冲洗干净将含盐的流动相置换干净,若较长时间不用请按保存方法保存。
  5、保存方法:
  .将凝胶柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存,或三氯丁醇苯基汞代盐将色谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。
  .再次使用时,用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。
  .如果次日还要使用也要从系统中取下,将赛默飞色谱柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。

一、热损坏
超过色谱柱的温度上限会造成色谱柱固定相和管表面的加速损坏, 这样会造成色谱柱的过量流失 ,活性组分形成拖尾, 柱效降低。 因此, 在色谱柱明显的损坏以前于温度极限以上运行需较长时间,当有氧存在时会大大加速热损坏, 在有泄漏或过加热加温色谱柱会加速损坏并YONGJIU性损坏色谱柱。

设定GC的ZUI高柱温在色谱柱高温jixian或稍高于这一极限是避免热损坏的方法,这样可避免色谱柱意外的过热,如果色谱柱受到热损失, 它仍然还会有一定的功能回 把色谱柱从检测器上卸下来, 在极限的恒温温度下加热8-16小时, 把色谱柱接到检测器的一端截去10-15cm, 按正常情况安装色谱柱并进行老化。 但是色谱柱不能恢复到原来的性能,可是常常仍具有一定的功能,在热损坏之后色谱柱的寿命会缩短。

二、氧损坏

在近于室温下不会对色谱柱有损害, 柱温升高时会严重损坏色谱柱。 通常对于极性固定相, 发
生严重损坏时的温度和氧浓度都很低。 长时间暴露在氧气中是有问题的。 短时间地暴露在氧气中如注射空气或拿掉隔垫螺帽时不会有什么问题。

在载气通道上有泄漏的地方〈如气路、 接头、 进样器〉往往是进入氧气的源头。 当色谱柱加热时, 就会很快损坏固定相,这就会过早地引起色谱柱的过度流失、 活性化合物有拖尾、 降低柱效。在不太严重的情况下色谱柱还会有 定的分离功能, 但是性能已经下降了。在严重的情况下这支色谱柱就完全不能使用了。

让系统避免和氧接触和避免泄漏是不受到氧损坏ZUI有效的方法, 对GC系统的良好维护包括定期
对管线和压力调节器进行检漏、定期更换隔垫, 使用高纯度载气、安装氧捕集以及不要等载气钢瓶 用空了再进行更换。

三、化学损坏

有相当少数化合物会使固定相遭到破坏, 不挥发性化合物(高分子量或高沸点〉进入色谱柱常常会降低色谱柱的性能, 但是不会破坏固定相。 这些沉积的残留物可以用溶剂忡洗色谱柱而除去以 恢复色谱柱的性能。
要避免进入色谱柱的主要化合物是无机或矿物碱和酸, 这类酸包括盐酸、 硫酸、 硝酸和磷酸。 碱包括氢氧化钢、 氢氧化纳、 氢氧化镑。这些酸和碱不挥发, 积累在色谱柱前端。如果使其停留在 那里就会破坏固定相, 使色谱柱过早地大量流失、 使活性化合物拖尾、柱效降低。 其征兆和热损失及氧损坏类似。

由于化学损失夺发生在色谱柱的前端,所以处理或把色谱柱前端切掉0,5-lm可消除任何色谱方面的故障, 在比较严重的情况下, 可以截去5m或更长的 段。 如果使用保护柱就会减小色谱柱被损
坏的长度, 但是需要处理保护柱, 酸或碱常常会破坏熔融石英管的去活表面, 因而会引起活性化合 物的峰型变坏。

四、色谱柱被污染
有两种基本类型的污染物z 不挥发性污染和半挥发性污染物, 不挥发性污染物或残留物不能
从色谱柱里洗脱出来, 而是累积在色谱柱里,这样它就成为涂溃了残留物的色谱柱, 因而影响溶质的分配, 即溶质榕入和蒸发出固定相的正常分配, 而且残留物还会和活性化合物相互作用, 引起峰的吸附问题(甚至造成拖尾或减少峰面积〉。 活性溶质是指那些含有控基或氨基和 些硫醇基及醛的物质, 半挥发性括染物或积累在色谱柱中的残留物,ZUI终会洗脱出去。 但需要几个小时或几天才完全洗脱出来, 和不挥发性残留物样, 它们也会引起峰形变坏和峰面积减小的问题, 此外, 常常引起很多基线的问题〈不稳定、 漂移、 噪音、 鬼峰等)。

污染物的来源有许多, 其中进样是ZUI主要的来源。 萃取自ZUI差基体的样品, 生物液体和组织、 土壤、废水等类似的含有大量半挥发和不挥发物质的基体, 甚至使用仔细及彻底的萃取方法,样品也会含有少许 这些物质并带到注射样品中。 几次到几百次进样会造成残留物的积累故障,进样技术如柱上进样、 不分流进样和大口径柱直接进大量样品到色谱柱中, 这些进样方法常常会造成色谱柱的污染。
ZUI大限度地减少半挥发性和不挥发性样品残留物是减少污染问题的ZUI好方法, 然而污染物的存在 常常是不知道的。严格和彻底的净化样品是防止污染问题的办法, 使用保护柱可以减轻或推迟色谱 柱受到污染的损害。 如果色谱柱被污染了, ZUI好的办法是用溶剂进行清洗除去污染物。建议不要使用长时间加热的方法来处理受到污染的色谱柱。

山东瑞德化工仪器气相色谱仪厂家建议:

请在不做分析时ZUI好将柱温降到100度 下, 可延长色谱柱使用寿命

  检测色谱柱安装和系统检漏工作完成后,就可以对色谱柱进行老化了。
  
  1.老化的方法:
  
  老化的方法通常是将色谱柱升至一恒定温度,通常为其温度上限。特殊情况下,可加热至zui高使用温度之上约10~20℃左右,但是一定不能超过色谱柱的温度上限,那样极易损坏色谱柱。
  
  当到达老化温度后,记录并观察基线。初始阶段基线应持续上升,在到达老化温度后5~10分钟开始下降,并且会持续30~90分钟。当到达一个固定的值后就会稳定下来。如果在2~3小时后基线仍无法稳定或在15~20分钟后仍无明显的下降趋势,那么有可能系统有泄漏或者污染。遇到这样的情况,应立即将柱温降到40℃以下,尽快的检查系统并解决相关的问题。如果还是继续的老化,不仅对色谱柱有损坏而且始终得不到正常稳定的基线。
  
  另外,老化的时间也不宜过长,不然会降低色谱柱的使用寿命。一般来说,涂有极性固定相和较厚涂层的色谱柱老化时间长,而弱极性固定相和较薄涂层的色谱柱所需时间较短。
  
  2.设置确认载气流速
  
  对于毛细管色谱柱,载气的种类高纯度氮气或氢气。载气的纯度大于99.995%,而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是毛细管色谱柱,那么依照载气的平均线速度(cm/sec),而不是利用载气流量(mL/min)来对载气做出评价。因为柱效的计算采用的是载气的平均线速度。推荐平均线速度值:氮气:10~12cm/sec;氢气:20~25cm/sec。
  
  在载气的管线中加入气体过滤装置不仅可以延长色谱柱寿命,而且很大程度的降低了背景噪音。建议安装一个高容量脱氧管和一个载气净化器。使用ECD系统时,能在其辅助气路中也安装一个脱氧管。
  
  3.柱流失检测
  
  在色谱柱老化过程结束后,利用程序升温作一次空白试验(不进样)。一般是以10℃/min从50℃升至zui高使用温度,达到zui高使用温度后保持10min。这样我们就会得到一张流失图。这些数值可能对今后作对比试验和实验问题的解决有帮助。
  
  在空白试验的色谱图中,不应该有色谱峰出现。如果出现了色谱峰,通常可能是从进样口带来的污染物。如果在正常的使用状态下,色谱柱的性能开始下降,基线的信号值会增高。另外,如果在很低的温度下,基线信号值明显的大于初始值,那么有可能是色谱柱和GC系统有污染。
  
  色谱柱的保存色谱柱用进样垫将色谱柱的两端封住,并放回原包装。在安装时要将色谱柱的两端截去一部分,以确保没有进样垫的碎屑残留于柱中。
  
  色谱柱的重新安装色谱柱重新安装时,密封要注意:
  
  a.安装位置(尺寸)要重现,否则引起峰灵敏度变化;
  
  b.安装时防止碎渣进入色谱柱引起峰形拖尾;
  
  c.不需要拧得太紧;
  
  e.使用清洁的密封垫,避免用手接触密封垫,以防手上的油脂污染;
  
  f.密封垫安装前,要仔细检查有无损伤,以防安装后,有问题时不易拆除;
  
  g.对那些不宜重复使用,如石墨密封垫,重新安装柱时要注意及时更换。
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