色谱柱是装填有固定相用以分离样品组分的柱管,多为金属或玻璃制作而成;
主要用于气相色谱仪、液相色谱仪检测分析试验中。
以下简单介绍气相色谱仪试验中常用的金属色谱柱和玻璃色谱柱的安装方法及步骤。
安装前的准备:
请按照气相色谱柱上面的标示确定色谱柱安装方向,务请注意!
金属柱安装方法:
拧紧柱上的螺母,将柱子装进进样器,假定密封垫圈(石墨垫或者四氟乙烯垫)已经定位在柱子上;
若是3mm的柱,只需要用手拧紧再加1/4圈就足够了;
若是6mm的柱子,用手拧紧后,再拧3/4圈就足够了。
用两把板子对起来,一把拧柱子上的螺母,另一把拧衬套,以防止拧柱上螺母时,衬套转动。
玻璃柱安装方法:(购买前请确定安装位置及间距尺寸)
玻璃柱是刚性的,所以必须同时装进进样器和检测器里。
其安装程序在柱两端是相同的。
玻璃柱可选用密封垫圈,也可选用O型圈来密封:
石墨衬套适合于大多数用途,O型圈仅适用低温操作。
安装位置确定:
进样器末端必须留出足够的空间,以防插入的针头接触玻璃毛堵头或柱填料(至少留出50-55mm)。
在气相色谱仪检测器的末端,至少必须留出40mm空间,以防喷嘴的下端碰着填料或玻璃毛堵头。
安装注意事项
1. 把螺母和密封圈(或O型圈)放在柱子上。
如果需要的话,在螺母的前面可以外加一只O型圈。
这样可以保护柱子,防止螺母掉进柱子的盘管部分。
2. 把柱插进气相色谱仪进样器和检测器,尽可能插到底。
把柱箱底清扫干净,可以从柱子的比较长的那一端开始,以较小的角度开始,将柱插入。
3. 把柱子拉出大约1~2mm,用手拧紧柱上的两个螺母,螺母要拧多少;
这取决于所用的密封圈的类型。若是O型圈,用手指拧紧就足够了。
色谱柱日常维护 二、去除样品和流动相汇总的固体颗粒 三、使用保护柱或在线过滤器 四、正确使用缓冲盐 建议使用前要过滤,使用后要冲洗。具体方法如下: 五、柱清洗方法:
每天用足够的时间来维护色谱柱,您将节省更多有利于处理色谱柱故障的时间,调试您的色谱柱的寿命也会变得更长,色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关,zui主要的是与日常维护密切相关。色谱柱的使用寿命主要根据柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱的柱效太低或者太高,通常被认为该色谱柱的使用寿命已尽结束。因此,延长色谱柱的使用寿命关键是,清除引起柱效下降和柱压升高的因素,通过以下几点帮战您完成色谱柱的日常维护工作。
一、流动相的pH应在使用范围内
以硅胶为基质的反相色谱柱的pH范围为2~9,流动相超过其pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,寿命变短。
样品和流动相中含有固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,不仅会引起柱压的升高,而且也会引起柱效下降。因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,在分析前对样品进行针筒过滤,流动相过0.45um滤膜。
保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱筛板孔径相同,因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大比例,因此除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
缓冲盐使用不当会使其在流动相(含有机溶剂)中析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻碍了基质上的键合的碳链自由舒展,使用色谱柱的保留能力下降,柱效降低。
1、等度条件:使用缓冲盐前和使用后需要过滤流动相1.0ml/min流速冲洗60min.
2、梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相组成相同的过滤流动相似1.0ml/min流速冲洗60min;分析完成后,再用该过滤流动以1.0ml/min冲洗色谱柱120min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓,以避免梯度过程中缓冲盐析出。
1、未使用缓冲盐:每天分析完成后,用纯甲醇或纯乙腈反向冲洗色谱柱60min。
2、使用过缓冲盐:分析完成后,先后用上述方法除去缓冲盐,然后再用纯甲醇或乙腈反向冲洗色谱柱60min。
色谱作为一种分离技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已
经成为分析化学学科中的一个重要的分支。随着科技的发展,生产生活的需要,使
得色谱技术也得到进一步的发展。未来不断有新的联用的技术得到应用。色谱柱的
维护与保养的重要性概括为9点:
1.柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;
2.当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路一定要清洗干净;
3.要注意流动相的脱气;
4.避免使用高粘度的溶剂作为流动相;
5. 进样样品要提纯;
6.严格控制进样量;
7.每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;
8.每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱;
9.若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭。