偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。例如:在植物学方面,如鉴别纤维、染色体、纺锤丝、淀粉粒、细胞壁以及细胞质与组织中是否含有晶体等。医学上的应用则是用偏光显微镜检查关节液中的结晶,检验淀粉我们都知道可以用碘液染色来确定,但使用偏光显微镜,不用染色就可以确定是不是淀粉了。这是马铃薯的淀粉粒,只要切一小片马铃薯,然后在载玻片上涂抹,滴一滴水制成水埋玻片就可以观察了。在低倍下,没有染色只是一般的颗粒。
一般淀粉呈白色或类白色,不溶于、乙醇、丙酮等有机溶剂,也不溶于冷水。淀粉是以颗粒状态存在于胚乳细胞中,不同来源的淀粉其形状、大小各不相同,应用显微镜观察可以区别不同的淀粉或确定未知试样的种类。淀粉颗粒的形状大致可分为圆形、椭圆形和多角形3种。一般水分高,蛋白质含量少的植物淀粉颗粒较大,多呈圆形或椭圆形,如马铃薯淀粉;反之颗粒较小,呈多角形,如米淀粉。在400~600倍显微镜下观察,可以看到有些淀粉表面有轮纹,与树木的年轮相似,马铃薯淀粉轮纹极明显。
不过只要旋转偏光片,世界就不一样了,淀粉粒上会出现十字,这个十字有特殊的名字,称为马耳他十字(MalteseCross),十字的交点就在淀粉粒的脐。这个马耳他十字可是有历史的。再放大一点,可以看见淀粉粒上的环纹,中心点就是脐的位置。
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在实际操作中,偏正显微镜的上下偏振镜的振动方向要互相正交,或东西和南北方向,各自与目镜十字丝的横、纵向一致。有时只用一个下偏振镜来观测,必须确定下偏振镜的振动方向,因此操作时必须对偏振镜进行校正。
(1) 目镜十字丝的检测
一般要检查目镜十字丝是否正交,以及是否与上下偏振镜振动方向一致,同时选一块解理极完全的黑云母,移至目镜十字丝的中心,将解理缝平行于十字丝的一根丝,记下载物台的刻度数,再转动物台使解理缝平行于另一十字丝,记下载物台的刻度数,两个刻度数之差为90°,说明十字丝正交。
(2) 下偏振镜振动方向的确定和校正
一般用黑云母来检查下偏振镜的振动方向,这是因为黑云母是一种分布广泛的透明矿物,在单偏光下很有特征。首先找一块解理和清晰的黑云母,移至目镜十字丝中心,推出上偏光镜,转动载物台一周,观察黑云母颜色的变化,因为黑云母对解理方向的振动光吸收较强,所以使黑云母颜色达到最深时,解理缝的方向就是下偏光镜的振动方向。
(3) 上下偏振镜正交的校正
下偏振镜的方向校正好之后,取下薄片,推人上偏振镜,观察视域是否全黑即是否处于消光状态。如果全黑,则表明上下偏光的振动方向互相正交。否则,上偏振镜须进行校正,即转动上偏振镜,使视域达到最暗为止。转动时必须先松开上偏振镜的止动螺丝,校正好后再拧紧。
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