奥林巴斯荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。多用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。
在操作荧光显微镜时,很多人都会感觉到很不顺,由于现在大家所用的荧光显微镜分为不同的品牌,而且同一品牌的也有不同的档次,各有不同的使用技巧。那么,在对荧光显微镜进行操作时,我们到底应该注意那些呢?
首先,汞灯一定要调好,因为大部分荧光信号较弱,所以调好照明非常重要;一般的汞灯分为50w和100w,一定要注意区别;一般调好的汞灯既要明亮又要均匀。这里有一些土办法来测试:用大家的证件可以作为测试的样品(上面有荧光,而且比较均匀)。
其次,选好合适的激发滤片组合。请大家注意滤片分类。有BP带通,LP长通,一般的带通比长通的要昂贵,效果也会好一些。
最后,选择合适的物镜;一般来说在观察荧光信号时物镜的档次越高越好,因为档次越高数值孔径越大收集光线的能力越强;但有时大数值孔径的物镜的工作距离较短,尤其是高倍物镜,所以如果用厚底的器皿就只能选择长工作距离的物镜。
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1、生物显微镜的安放应选择干燥清洁的房间,以避免光学部件发霉、金属部分生锈以及粘满灰尘。显微镜使用完毕后,即放回箱(柜)内,或用玻璃罩、塑料套罩住,并放入干操剂。
2、不要自行拆卸各部件;镜筒要插上接目镜或益上镣苗盖,避免灰尘从镜筒上部进入;透镜表面不要用手指碰触或拭擦,如有灰尘,先用柔软毛笔轻轻拂去,再用柔软的清洁细布拭撩,也可用擦镜纸蘸少许二甲苯或石油迷试擦,但注意不要在透镜表面划出条纹。如镜片有轻度长霉,用擦绕纸擦不去时,可用棉签蘸少许70%乙醇与30%乙迷混合液轻轻拭撩。
3、生物显微镜不可与腐蚀性酸类、减类或挥发性强的化学药品放在一起,以免被腐蚀,缩短使用年限。原则上,当观察含液体的标本时,一般都要盖上盖玻片;若液体中含有酸、碱等腐蚀性化学物质时,应把盖玻片的四周用石蜡或凡士林封住,然后观察。但由于进行中药显微鉴定时,经常要用这一类试剂,不可能都封固,因此要特别小心,防止液体流到载物台上,吏不要沾到物镜上。
4、生物显微镜不应在直射阳光下暴晒,也不要放在靠近炉子或暖气的地方,以避免过剧的冷热变化引起透镜和机件的脱胶、变形或损坏。
5、清洁接物镜只限于外表面。接物面被药品污染后即用撩镜纸蘸少许擦镜液拭擦(不要用乙醇);若背面须清洁时,可用柔软毛笔拂拭,或用皮吸头吸去灰尘。
6、转动粗细调比铝调焦时,动作要缓慢,不要压碎盖被片,以防接物镜和集光器受控击而损坏。
7、使用油镜后,须将镜头上的香柏油拭探干净(可用擦镜纸蘸少许二甲苯拭擦,但注怠二甲苯不能渗入镜头内部,否则二甲苯溶解透镜之间的粘合剂,可使镜片脱落)。
8、反光镜镜面要保护清洁,不要使水、二甲苯或香柏油透入,以免反光镜的水银脱落。
9、加机械部分不灵活,可用细绸布蘸二甲苯少钧:拭去锈和油腻(不得用乙醇,因为这些溶剂会侵蚀油漆),再用少许液体石服润滑;旋扭过紧不要强行扭动,以免损坏。
10、有时在生物显微镜的视野中发现有污点或异物,可先转动目镜,如果这些污点跟着旋转,则可确定污点是在目镜上;否则,可移动标本片,如污点跟着移动,则污点是在标本片上。如果两者都不是,则污点是在物镜上,可先捡食物镜的前镜头,然后检查后镜头。根据不问情况进行清洁处理。
有时视野的一部分不清晰,这可能是物镜或目镜的前透镜表面有指印或灰尘,也可能是标本片做得不好或显微镜用法不当,如照明系统末调好等原因,应查明情况,分别解决。
11、生物显微镜用毕后,应将各部分擦拭干净,格接物镜转成八字形,然后将镜筒和集光器下降固定,再将反光镜的镜面置垂直的位置。
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