紫外光栅分光光度计使用注意事项与保养
1、安放紫仪器的房间,应远离电磁场。并且干净、通风、防尘。
2、安放仪器的桌子要注意防震,可以采用水泥制作,比较稳定,而且不容易受周围震动源的影响。同时仪器不能被太阳光直接照射。
3、紫外可见分光光度计的每个部分都不允许受嘲。否则将会使有关的元器件损坏或性能变坏。特别是在我国的南方春夏之交时,在潮湿阴雨的气候条件下,更应该注意防止仪器受潮。
如果仪器较长时间不用,应每隔7d开机1—2h,以去除潮湿,避免光学元件和电子元件受潮。仪器的周围应干燥,每次使用完毕后,比色皿暗箱内应放置防潮硅胶袋。并用塑料套于罩严,同时在套子内也放置数袋防潮硅胶。经常注意防潮硅胶是否受潮,并及时调换或烘干。
仪器底部配有2只干燥剂筒,用以保持仪器的干燥,要注意经常检查其是否受潮,如果受潮,要及时更换里面的干燥剂。
4、经常检验仪器的技术指标。为保证仪器测试结果的准确可靠,新购进、使用中和维修后的分光光度计都府定期进行检验。国家技术监督局批准颁布了各类紫外、可见分光光度计的检定规程。检定规程规定,枪定周期为半年,两次检定合格的仪器捡定周期可延长至一年。通过检验一旦发现哪项技术指标有问题,使朋者自己不要轻易调整,应该马上联系制造厂的维修工程师来维修。经常检验的技术指标一般有比色皿的配套性、波长准确性、透光度准确性等,这些检验的具体方法在本章的实训中将会操作。
5、保持仪器机械运动部件活动自如。紫外可见分光光度计有许多转动部件,如光栅的扫描机构、狭缝的传动机构、光源转换机构等。使用考对这些活动部件应经常加一些钟表油,以保证其活动的口。特别应注意,有些使用考不易触及的部件,千万不要乱动,可以请制造厂的维修工程师或有经验的工作人员帮助完成。
6、仪器的连续使用时间不能超过2h。使用后必须间歇0.5h以后,才能再用。
7、比色皿在使用前、后必须彻底清洗。在位用和清洗过程中,不能用硬质纤维和手指擦拭或触损透光面,只能拿其不道光的两个毛玻璃面。更不能用毛刷洗比色皿,必须保持比色皿透光面的完好无损和清洁。
比色皿使用后应立即清洗,可浸泡在肥皂水中,然后再用自来水和蒸馏水冲洗干净。被有色物珐污昧可以用3mol/L盐酸和等体积乙醇的混合液浸泡洗涤。倒置晾干备用,绝对不能烘烤。
一旦比色皿被戳附力很强的试样严重站污时,很难清洗干净,即使是浸在“王水”中也很难洗净,这时,可用超声波清洗。
比色皿外边沾有水珠或持测溶液时,可先用滤纸吸干,再用镜头纸拭净。
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1.紫外可见分光光度计噪音较大
原因:
处理方法:
2.在使用过程中,出现数字显示不能归零,同时伴有图线记录基线位置偏高
①光电倍增等老化,性能降低
②信号处理板可能发生故障
③前置放大版出现故障,引起反馈量增大
处理方法:
①开机通电,先做记录故障曲线,再与原始记录的标准曲线对照,找出异同点,并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管,再开机实验,结果记录出来的图线并没有什么变化,由此证明光电倍增管没有老化变质。
②进一步检查信号处理板,未发现信号处理板各元器件损坏,对影响灵敏度有关的电位器检测,结果测得数据正常,这说明信号处理板没有故障。
3.自检时提示波长自检出错
原因:
自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子
处理方法:
关上仪器样品室盖子,重新自检
4.仪器自检时提示通讯错误
原因:
仪器与电脑之间的数据线没有连接好
处理方法:
连接好数据线,重新打开仪器和软件,重新自检
5.测试过程中提示能量太低
原因:
①光源灯泡使用时间超过寿命期
②样池中有不透光的东西挡住了光
处理方法:
更换光源灯泡;拿走挡光的物品
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。 荧光分光光度计的原理: 由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态,这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光。 不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。 在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。