气相色谱柱除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数,是一种对混合气体中各组成分进行分析检测的仪器。广泛应用于石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面。
选择气相色谱柱时要考虑到以下性能:
1、柱长
气相色谱柱柱长会影响到柱效、保留(分析时间)和载气压力。
如果不知道较佳长度,优先使用25-30米长的色谱柱;10-15米的色谱柱十分适用于分离含有很容易分离溶质的样品或含溶质较少的样品;50-60米长的色谱柱适合分离含有很多组分的复杂样品,但是长的色谱柱的分析时间较长、费用也较高。
2、内径
0.15和0.18mm内径的色谱柱十分适用于泵容量低的GC/MS系统。内径较小的色谱柱具有的柱容量最小,并需要最高的柱头压;
当需要较高的样品容量时,使用0.32mm内径的色谱柱。与0.25mm内径的色谱柱相比,它们对于不分流进样或大体积(>2?L)进样时早流出的溶质有更佳的分离度;
只有在仪器配备大口径直接进样器并需要较高的柱效时,才使用0.45mm内径的色谱柱。特别适用于高载气流速的情况,比如吹扫-捕集、顶空进样器和阀进样的应用。
3、膜厚
色谱柱液膜厚度影响保留、分离度、流失、惰性和柱容量。
0.18-0.32mm内径的色谱柱平均或标准膜厚为0.18-0.25?m,可用于大多数分析;
0.45-0.53mm内径的色谱柱平均或标准膜厚为0.8-1.5?m
薄液膜色谱柱用于降低高沸点、高分子量溶质的保留(如,类固醇、甘油三酯)。
厚液膜色谱柱惰性更好,柱容量更大,用于保留和分离挥发性溶质(如,轻质溶剂、气体)。
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色谱柱在使用中常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外,以下列举了部分常见原因及解决办法:
1、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染;
可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声10分钟,重新装入色谱柱。
2、色谱柱头的填料被样品污染;
如确定色谱柱头的填料被污染,将柱头螺丝卸下,挖出柱内前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔细修复后,重新安装上柱头螺丝。
3、色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出;解决方法:如确定定是盐结晶,用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。
市场上,国产和进口色谱柱种类繁多,如何挑选一根适合自己实验室分析的色谱柱? 我们在购买毛细色谱柱的时候,需要知道哪些基础的常识呢? 一、固定液使用
固定相: AT SE-30,AT OV-1
组成 100%甲基聚硅氧烷
极性 非极性
应用 碳氢化合物
同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1
使用温度 50-300
固定相: AT OV-101
组成 100%甲基聚硅氧烷(胶体)
极性 非极性
应用 氨基酸、基油
同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100
使用温度 0-350
固定相: AT SE-52AT SE-54
组成 5%苯基甲基聚硅氧烷,1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷
极性 非极性
应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇
同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5
使用温度 50-350
固定相: AT OV-1701
组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷
极性 非极性
应用 药物、醇、酯、硝基化合物
同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB
使用温度 0-280
固定相: AT XE-60
组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷
极性 中极性
应用 酯、硝基化合物
同类型号 DB (HP) -225、AC225
使用温度 0-280
固定相: AT OV-17
组成 50%苯基甲基聚硅氧烷
极性 中极性
应用 药物、农药
同类型号 DB(HP)-17、AC10
使用温度 0-250
固定相: AT FFAP
组成 聚乙二醇-TPA改性
极性 极 性
应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油
同类型号 DB (HP) -FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20
使用温度 50-250
固定相: AT PEG-20M
组成 聚乙二醇-20M
极性 极 性
应用
同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20
使用温度 50-200
固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号
组成
极性
应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药
同类型号 SPB-608、HP-608
使用温度 25-300
二、毛细管柱内径
0.53mm 具有近似填充柱的负荷量,总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时,0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术,适合于分析不太复杂的样品,是填充柱理想的替代柱。
0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱,负荷量大于常规柱的60%,用特制注射针可做柱上进样。
0.25mm zui常用的内径规格。有较高的柱效,负荷量较低,必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。
0.20mm 柱效高,负荷量低,流失较小,适合与质谱等灵敏检测器联用。
三、毛细管柱长度
5-12m 短柱:分离少于10个组份(不包含难分离物质对)的简单样品。
25-30m 中长柱:分离10-50个组份的样品。
50m 长柱:分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。
四、膜 厚
0. 1-0. 2um 薄液膜
低负荷量,高温下流失较小,适合于高沸点化合物的分析,适于配高灵敏检测器。
0.25-0.33um 标准液厚
一般商品柱的标准液膜。
0.5-5.0um 厚液膜
较高的样品负荷量,在高温下流失较大,适于分析低沸点样品。