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色谱柱的相关知识简介 色谱柱常见问题解决方法

时间:2020-07-08    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  1.色谱柱的构成
  
  色谱柱是实现分离的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。
  
  色谱填料:经过制备处理后,用于填充色谱柱的物质颗粒,通常是5-10粒径的球形颗粒。
  
  色谱柱管:内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm,长250mm。
  
  色谱柱:也称固定相,是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的。
  
  2.色谱柱的填充
  
  干法填充:在硬台面上铺上软垫,将空柱管上端打开垂直放在软垫上,用漏斗每次灌入50-100mg填料,然后垂直台面墩10-20次。
  
  湿法填充:又称淤浆填充法,使用专门的填充装置。
  
  3.填料的结构
  
  色谱填料是由基质和功能层两部分构成。
  
  基质:又常称作载体或担体,通常制备成数微米至数十微米粒径的球形颗粒,它具有一定的刚性,能承受一定的压力,对分离不起明显的作用,只是作为功能基团的载体。常用来作基质的有硅胶和有机高分子聚合物微球。
  
  功能层:是通过化学或物理的方法固定在基质表面的、对样品分子的保留起实质作用的有机分子或
  
  功能团。硅胶基质的冠醚大分子固定相的结构示意图,功能层冠醚分子吸附或键合在硅胶基质的表面。
  
  填料的物理结构:分为微孔型(或凝胶型)、大孔型(全多孔型)、薄壳型和表面多孔型四种类型

固定相
等同产品
应用
使用温度
BP1AC1 100%二甲基聚硅氧烷OV-1,OV101,SE-30DB-1,HP-1,Rtx-1,Ultra-1SPB-1,CP-SiL5CB 常规使用,碳氢化合物,芳香化合物,农药,酚类,除草剂,胺脂肪酸甲酯,GC/MS应用 0.1μm-1.0μm-60℃-340℃/360℃>1.0μm,-60℃-280℃/300℃
BP5AC5 5%苯基95%二甲基聚硅氧烷SE-54,DB-5,Rtx-5,CP-Sil8CB,SPB-5,HP-5,Ultra-2,PTE-5 芳香化合物,农药,除草剂,滥用药物,碳氢化合物 0.1μm-1.0μm-60℃-340℃/360℃>1.0μm,-60℃-280℃/300℃
BP10AC10 14%氰丙苯基聚硅氧烷OV17,OV1701,DB-1701,Rtx-1701,SPB-1701,HP1701,CP-Sill9CB 农药,除草剂,药物,环境样品 0.25μm-1.0μm-20℃-280℃/300℃
BP20AC20 聚乙二醇DB-Wax,HP20M,StabilwaxSupelcowax-10,AT-WaxNakol,CP Wax52CB 醇类,游离酸,脂肪酸甲酯,芳香化合物,溶剂,香精油 0.25μm-1.0μm20℃-280℃/300℃>1.0μm,20℃-240℃/260℃
BP21 聚乙二醇(TPA处理)FFAP,DB-FFAP,HP-FFAP,Stabilax-DA,Cpwax-DA,Cpwax-58CB 挥发性游离酸,脂肪酸甲酯,醇,醛,丙烯酸酯,酮类 0.25μm-0.5μm20℃-240℃/260℃
BP225 50%氰丙苯基聚硅氧烷HP-225,DB-225,Rtx-225 脂肪酸甲酯,碳水化合物,中性固醇 0.25μm-0.5μm40℃-220℃/240℃
BPX608 DB-608,Rtx-35,SPB-608 有机氯农药/除草剂 0.4μm0℃-360℃/370℃
BP624 DB-624,Rtx-VolatilesVOCOL EPA方法624,饮用水中的挥发物卤代烃,溶剂 1.2μm-1.3μm30℃-260℃/280℃
CYDEX-B Cyclodex-B,Rt-BDEXm 天然产物的对映异构体 0.25μm-0.5μm0℃-230℃/240℃
HT5- 模拟蒸馏MXT-1,SimDist,DistCB HT-Sim模拟蒸馏 聚亚酰胺涂层柱0.5μm-20℃-380℃/400℃2.0μm,-20℃-370℃/380℃镀铝涂层柱0.75μm-0.15μm,-20℃-460℃/480℃
BP1-PONA PetrocolDH,DB-Petro1100 石油烃,汔油等组份,MTBE 0.5μm,-60℃-280℃/300℃
BP-Xylene 二甲苯异构体拆分 -20℃-240℃/260℃
OV1701-MTBE MTBE分析 -10℃-120℃/140℃
 

  通用型反相色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要留意: 液相色谱柱柱性能可能由于所使用的样品、活动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。


  样品的前处理:


  a、使用活动相溶解样品。


  b、使用予处理柱除往样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。


  c、使用0.45μm的过滤膜过滤除往微粒杂质。


  通用型反相色谱柱的保养


  通用型反相色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为评价柱性能变化的参考。


  但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。在对色谱柱使用前进行测试以后,要根据不同的情况对色谱柱进行保养:


  ①通用型反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。


  注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。


  ②长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度是室温。

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