1、建议检测前样品和流动相进行过滤；
2、建议每天做完样品后及时进行清洗；
3、常规检测
测试完后，直接把色谱柱反向连接采用90%有机相冲洗45min，后保存在纯甲醇或纯乙腈中；
4、使用缓冲盐条件：
1）等度条件：使用缓冲盐之前和之后都用过渡流动相以1ml/min流速冲洗45min；
2）梯度条件：使用缓冲盐之前与初始流动相组成相同的过渡流动相以1ml/min流速冲洗45min；
注意：过渡流动相是指有机相和水相比例与分析流动相相同比例，只是不含有缓冲盐；
3）缓冲盐冲洗干净后，采用90%有机相反向冲洗60min，后保存在纯有机溶剂中；
注意：如果使用缓冲液不能存留色谱柱中过夜；
色谱柱的保存
1. 短时间内色谱柱的保存
如果使用时间间隔不超过四天，则色谱柱无需特别的维护，只需根据后一次测试使用的流动相或样品的性质，在使用后用纯甲醇、纯水或甲醇与水的混合溶液进行淋洗，直至基线走平约半小时即可。
2. 长时间色谱柱的保存
如色谱柱长时间不用，则将其从HPLC仪中取下保存，取下前用合适的溶剂淋洗，洗去不适与保存色谱柱的洗脱液，如C18反相柱可以用纯甲醇或乙腈作为保存的介质，然后用塑料塞头将其塞紧，以免色谱柱内完全干燥。
色谱柱的平衡和使用
反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙睛)/水中的。请一定确保您所使用的流动相和甲醇（或乙睛）/水互溶。由于色谱柱在运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10-20倍的体积的甲醇或乙睛平衡色谱柱：如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用含水量很高（约95%）的流动相过渡，样品分析完后，冲洗柱子是亦然。过去传统的方法使用纯水冲洗，对于非极性柱，如C8或C18，由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链，造成柱效下降。另外，分析样品时，由于纯水在填料表面不能浸润形成水膜，出现样品不保留而分不开，重现性差，所以对一般的C18和C8，有机溶剂不能低于5%。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水或甲醇或乙睛的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。
平衡过程中，将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂浓度如果较低，则需要较长的时间平衡）
色谱柱的再生
建议用来冲洗的溶剂体积
| 色谱柱规格 | 柱体积 | 溶剂体积 |
| 150*4.6 | 2.50ml | 50ml |
| 250*4.6 | 5.0ml | 100ml |
| 250*10 | 20ml | 400ml |
请根据下表选择您的再生方法：
极性固定相（如Si,NH2,Diol色谱填料）的再生：正庚烷-氯仿-乙酸乙酯-丙酮-乙醇-水
非极性固定相（如反向填料C18,C8等）的再生：水-乙睛-氯仿（或异丙醇）-乙睛-水
0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱
色谱柱的维护：
1、使用保护柱
2、大多数柱的PH稳定范围是2-7.5，尽可能在此范围内使用
3、避免流动相组成及极性有剧烈变化
4、流动相使用前必须经脱气和过滤处理
5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，要在实验完毕将柱子冲洗干净
6、压力升高时更换保护柱
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词：
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
色谱柱都有一定的寿命，它与所分析的样品状况和维护情况有直接关系。柱寿命完结的主要标志是固定液流失太多而失去了分离能力，柱管堵塞或断裂也是导致柱失效的原因。有时只是因为一些高沸点的极性化合物的吸附而使色谱柱丧失分离能力，这时可对其进行清洗和修理。
1、在高温下老化柱子，用载气将污染物冲洗出来；若柱性能仍不能恢复，就从仪器上卸下柱子，将柱头截去10cm或更长(柱头是最容易被污染的)，再安装上测试。这是常用的柱性能恢复措施。
2、如果还不起作用，可再反复注射溶剂进行清洗，常用的溶剂依次为丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷。每次可进样5-10μl，这一办法常常能奏效。
3、如果色谱柱性能还不好，就只有卸下柱子，用二氯甲烷或氯仿冲洗。可用抽真空的办法将溶剂从另一端吸入，也可用对溶剂瓶加压的方法将溶剂压入。溶剂用量依柱子的污染程度而定，一般20ml左右。如果这一方法仍不起作用，说明色谱柱应该报废了。需要说明，只有固定液交联的色谱柱才可用此法清洗，否则会将固定液全部洗掉。
下一篇：恒温水浴的操作使用及注意事项
449717568