超微量分光光度计如何使用，有哪些注意事项?
一：超微量分光光度计是精密光学仪器，出厂前经过精细的装配和调试，如果能对仪器进行恰当的维护和保养，不仅能保证仪器的可靠性和稳定性，也可以延长仪器使用寿命。
二：超微量分光光度计常用于定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。
三：超微量分光光度计的工作原理是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器，常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域 ,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门 ,紫外可见分光光度计督有广泛而重要的应用。
四：超微量分光光度计是精密光学仪器，正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。下面分享一些超微量分光光度计不可不知的保养常识。
(1)仪器工作环境的要求
分光光度计对工作环境的要求如下。
①仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5～35℃.相对湿度不超过85%。
②仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的振动或持续的振动。
③室内照明不宜太强，且应避免直射日光的照射。
④电扇不宜直接向仪器吹风，以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用。
⑤尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。
⑥供给仪器的电源电压为AC 220V±22V，频率为50Hz±1Hz，并必须装有良好的接地线。推荐使用功率为1000w以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。
⑦避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用。
(2)仪器的日常维护和保养
①光源。光源的寿命有限，为了延长光源使用寿命，在不使用仪器时不要开光源灯，应尽量减少开关次数。在短时问的工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不能立即重新开启。仪器连续使用时间不应超过3h。若需长时间使用，间歇30min。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置，不要用手直接接触窗口或灯泡，避免油污沾附。若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。
②单色器。单色器是仪器的核心部分，装在密封盒内，不能拆开。选择波长应平衡地转动，不可用力过猛。为防止色散元件受潮生霉，必须定期更换单色器盒干燥剂(硅胶)。若发现干燥剂变色，应立即更换。
③吸收池。必须正确使用吸收池，应特别注意保护吸收池的两个光学面。
④检测器。光电转换元件不能长时间曝光，且应避免强光照射或受潮积尘。
⑤当仪器停止工作时，必须切断电源。
⑥为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作时，应盖上防尘罩。
⑦仪器若暂时不用要定期通电，每次不少于20～30min，以保持整机呈干燥状态，并且维持电子元器件的性能。
分光光度计作为一种精密仪器，在运行工作过程中由于工作环境，操作方法等种种原因，其技术状况必然会发生某些变化， 可能影响设备的性能，甚至诱发设备故障及事故。因此，分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和使用说明，并能及时发现和排除这些隐患，对已产生的故障及 时维修才能保证仪器设备的正常运行。
1)若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。
2)指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。
3)比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。
4)操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。
5)1900型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光 电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在 预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。
6)放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。
7)比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法 如下;分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装蒸馏水， 将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围 应考虑其对测试结果的影响。
分光光度计分操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法：
1)仪器不能调零。可能原因：
a)光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。
b)透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。
c)仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂。
d)电路故障。解决方法：送修理部门，检修电路。
2)分光光度计不能调“100%”。可能原因：
a)光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯(尽管灯还亮)。
b)比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。
c)光电转换部分老化。解决方法：更换部件。
d)电路故障。解决方法：调修电路。
3) 分光光度计测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因：
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。
b)电路故障(电压、光电接收、放大电路)。解决方法：送修。
4)分光光度计数显不稳。可能原因：
a)预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳)。
b)光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。
c)环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。
d)光电管、电路等其它原因。解决方法：送修。
五、提高分光光度计透射比检定及使用精度的几种方法
在分光光度计的使用或检定中,透射比(吸光度)的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标,它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。所以提高此项指标的使用及检定准确度显得尤为重要。
分光光度计日常维护
分析仪器工作者要懂得仪器的日常维护和对主要技术指标的简易测试方法，自己经常对仪器进行维护和测试，以保证仪器工作在zui佳状态。
一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降；造成光学部件如光 栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器 室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体亦可以影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘。
三、分光光度计使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重 新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，zui后，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录。
分光光度计注意事项
1．该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2．使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。
3．在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
摘要：目前，国际上通常按紫外可见分光光度计的仪器结构将其分为单光束、双光束和双波长三类。
（一）单光束分光光度计
常用的单光束可见分光光度计有721型、722型、723型、724型、727型等。常用的紫外可见分光光度计有751G型、752型、753型、754型、756M型等。国外的Du70型、Pu8700型也是单光束分光光度计* 单光束是指从光源今发出的光，经过单色器等—系列光学元件，通过吸收池，zui后照在检测器上时，始终为一束光。它只官一束单色光（光束只能交替通过参比溶液、样品溶液），一只比色皿，一只光电转换器。工作时，一条光路，先通过多比溶液，再通过试样溶液进行光强度的测旦。
单光束分光光度计的特点是结构简单、价格低，主要适用于做定量分析，测量结果受电源的波动影响较大，容易给测量结果带来较大的误差。所以，它们在位灼上受到限制。一般来讲，要求较高的制药行业、质量检验行加等不适宜使用单光束紫外可见分光光度讣。
（二）双光束分光光度计
常见的双光束紫外可见分光光度汁主要有710型、730型、7MMc型、760cRT型、 TYt880型、TY8500型、TU—1901型、TU—l咖型、UVL2t0型、UV/见—1型、UY21叨型、t乃L763型、t正/—2450型、t八/—3101型、U—3400型、Lambda9血型、Lilnbda9型、CaV5型、CgY6咖型、Cav500型等。
双光束分光光度汁就是有两束单色光的紫外可见分光光度计。其光路设计基本上与单光束分光光度计相似。区别是在单色器与吸收弛之间加了一个切光器，其作用是以一定的频率把一个光束交替分为强度相等的两柬光，使一路通过参比溶液，另一路通过样品溶液。然后由检测器交替接收参比信号和样品信号。接收的光信号转变成电信号后，由前置放大器放大，并进一步解调、放大、补偿等，zui后由显示系统显示。其光路系统.
（三）双波长分光光度计
双波长分光光度计采用两个单色器，可以同时得到两柬波长不同的单色光，其光路. 光源发出的光被两个单色器分别分离出波长为4：和4z的单色光，通过切光器，将两束光以一定的时间间隔交替照射到装有样品试液的同一个吸收池，由检测器显示出试液在波长4?和42的透射比或吸光度。双波长分光光度计不仅能测量高浓度试样、多组分混合试样，而义测定混浊样品时比单波长测定更灵敏、更有选择性。双波长测定时，两个波长的光通过同一吸收池，pJ以消除因吸收他的参数不同、位置不同、污垢以及制备参比溶液等带来的误差，从而可以显著地提高测定的准确度。
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