新色谱柱开启和安装的推荐步骤：
1. 开启色谱柱的包装盒，查看色谱的测试报告；
2. 根据色谱柱身上箭头标明的流向先将色谱柱入口端连入系统，柱出口端先不要连接；
3. 0.1 mL/min 流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱，然后在2 min内将流速升至0.5 mL/min;
4. 当溶剂均匀的从柱出口端流出，停流速，将色谱柱出口端接到系统检测器上；
5. 重启流速，然后在0.1 mL/min 流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱30 min，在10 min内将流速升至1.0 mL/min冲洗30 min。
6. 参考柱效测试报告中的方法，30 min内将流动相梯度转换到柱效测试的流动相条件，然后使用5-10倍柱体积的流动相平衡色谱柱，直至压力与基线稳定。
7. 测试柱效。如果柱效与出厂报告偏移过大，或峰形拖尾就需要进行故障排查或联系上海易创分析仪器有限公司。
反相色谱柱的清洗与再生：
1. 发现柱压升高，色谱峰出现严重拖尾、肩峰甚至峰分岔，或分离度降低，有可能是样品溶解度、色谱柱温度、碱性化合物干扰，也很有可能是色谱柱受污染，可以采取以下措施：
2. 如系统有连接在线过滤器或保护柱，首先排查在线过滤器与保护柱，可能需要更新。
3. 使用纯有机相低流速冲洗过夜。（如有使用缓冲盐，应使用不含缓冲液的流动相冲洗1h，然后再梯度过渡到纯有机相低流速冲洗过夜。）
4. 如有机相清洗不能解决问题，可采用如下方法进行色谱柱的清洗和再生。根据样品的性质以及你了解的污染物性质选择清洗方法，用20-30倍柱体积（4.6*250 mm分析色谱柱大约80-120 mL溶剂清洗，流动相温度升至30-50 oC，然后再重复步骤3的方法。
5. 氨基柱
反相色谱柱的保存：
1. 反相色谱柱应保存于纯有机相中（如乙腈或甲醇）。色谱柱使用于高温或极端pH条件下，或停用超过48小时，应当进行简单的清洗过程；
2. 清洗首先用不含缓冲盐的流动相冲洗20-30倍柱体积, 然后30 min内梯度过渡到纯有机相，再用纯有机相冲洗20-30倍柱体积；
3. 后使用原配的柱堵头拧紧，确保堵头溶剂不会挥发。若是氨基柱则应该在步骤2中添加0.1%的氨水，有利于延长氨基柱的寿命；
糖检测色谱柱特点：
1.柱寿命更长：杂化键和相技术使得这款糖柱兼有硅胶柱的耐压性与聚合物柱的酸碱耐受性。
2.基线更稳定：与常规的用于分析糖的硅胶氨基柱比较，即使使用梯度洗脱也没有基线漂移问题。
3.可兼容使用在梯度洗脱条件下的ELSD检测。
糖检测色谱柱使用时注意事项：
1.为避免管路中的有机溶剂和气泡进入糖检测色谱柱，先用水冲洗整个色谱系统,然后才能接入糖检测色谱柱。
2.不要让有机溶剂进入柱中，否则会使填料脱水，导致柱床损坏，要小流速开启泵，不要快速加大流速，以防止压力迅猛升高而导致柱床损坏。15mm的柱子流速不要超过3ml/min。
3.每次使用后务必用蒸馏水冲洗干净将含盐的流动相置换干净，若较长时间不用请按保存方法保存。
糖检测色谱柱保存方法：
1.将糖检测色谱柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存,或三氯丁醇(0.015%)苯基汞代盐(0.001-0.01%)将糖检测色谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。
2.再次使用时,用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。
3.如果第二天还要使用也要从系统中取下，将柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。
一、去除样品和流动相中的固体颗粒
样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板，筛板被堵住不仅会引起柱压的升高，而且也会引起柱效下降，因为筛板的堵塞会引起液流不均，导致色谱峰型拖尾、变宽，从而使柱效下降。
二、流动相的pH应在使用的范围内
由于填料中存在Si-C和Si-O键，流动相超过其pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂，使柱效下降，使用寿命变短。由于流动相的pH控制不当而对色谱柱造成的损害，通常很难使色谱柱恢复，因此必须认真对待，严格控制流动相的pH值。
三、使用保护柱或在线过滤器
样品和流动相经过滤后并不能完全消除固体颗粒物质，因为泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质，这些固体颗粒被流动相带入色谱柱，堵塞筛板，导致柱压升高、柱效下降。保护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱孔径相同，因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大比例，因此，除对样品和流动相进行过滤外，建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
如果确认色谱柱柱压升高是由于进样端筛板被堵引起的，可选择以下方式进行补救：
1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min。
2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器，然后反向使用。
四、正确使用缓冲盐
缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此缓冲盐使用不当会使其析出，堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙，使填料板结，柱压上升;同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展，使色谱柱的保留能力下降，柱效降低。缓冲盐析出后，去除非常困难，因此，正确的使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。
正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话：使用前要过滤，使用后要冲洗。具体方法如下：
1、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min;使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。
2、梯度条件：用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前，用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min，再用该过渡流动相以1.0ml/min冲洗色谱柱120min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓，以避免梯度过程中缓冲盐析出。
注意：过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同，区别只是过渡流动相不含缓冲盐。
3、缓冲盐析出的补救方法：
1)方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35摄氏度条件下反向冲洗色谱柱120min
2)方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。
五、防止强保留物质在色谱柱上存留
强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积，对样品中的化合物产生额外的保留行为，不仅引起峰型变宽、拖尾，使柱效下降，同时也会引起保留时间的变化，累积到一定程度时还会导致柱压升高。由于强保留物质和大分子化合物对色谱分离的影响是一个累积效应，需要一定的时间才会体现出来，但对许多药品特别是复杂样品而言，很难判断其是否是含有强保留物质，因此要防止强保留物质的累积，需要在每天的日常维护清洗色谱柱。
清洗方法：
1、未使用缓冲盐：每天分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐。
2、使用过缓冲盐：分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐。
449717568