三聚氰胺即蜜胺，又称氰尿酰胺，是一种白色晶体，含氮量高达66.7%，在食品和饲料中添加三聚氰胺，可以提高含氮量，冒充成高蛋白食品，从而大幅度降低成本。目前，测定粗蛋白的含量常用凯氏定氮法，而凯氏定氮法只能测出含氮量而无法测出氮的来源。从而造成如2007年美国宠物食品污染事件和2008年中国毒奶粉事件等严重的食物安全事故。调查显示，不法商贩在渔用饲料原料鱼粉中添加三聚氰胺，以次充好谋求利润，一旦用此类原料制造出来的饲料，必然可以检出三聚氰胺，但含量均不高。
农业部已命令禁止在饲料中人为添加三聚氰胺。2009年6月8日起农业部发布第1218号公告，将饲料原料和饲料产品中三聚氰胺限量值定为2.5mg/kg。目前饲料中三聚氰胺残留的检测方法主要是气相色谱法、液相色谱法和质谱法。国内标准NY/T 1372-2007《饲料中三聚氰胺的测定》中采用液相色谱法和气质联用法检测饲料中的三聚氰胺含量，检测限分别达到2和0.05mg/kg。考虑到由于质谱法检测设备昂贵，色谱法更具普及性。由于渔用饲料中三聚氰胺的含量不公开，且饲料中的杂质成分复杂，所以要求检测方法有更高的灵敏度和更好的稳定性。根据国家对于饲料中三聚氰胺的限量要求，研究采用离子交换分离柱-液相色谱法测定渔用饲料中的三聚氰胺的方法，该方法简便，重现性好，结果准确可靠。
仪器准备
仪器简介
LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
应用领域
化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析
色谱条件：
色谱柱 | 阳离子交换柱（SCX）， 250mm×4.6mm （内径），粒度5μm |
流动相 | 磷酸二氢钾（50mmol/LpH=4.6）+乙腈=70:30 |
流速 | 1mL/min |
检测波长 | 240nm |
柱温 | 35℃ |
进样量 | 20μL |
谱图分析：
1.进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
2.输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47～4.4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。
3.分离系统
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm(需要两根连用时，可在二者之间加一连接管)，内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔径可达1000?)和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样)，或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。
另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。
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