依据Beer定律，物质在一定波优点的吸光度与浓度成正比，这是定量计算的根据。但是很多溶剂自身在紫外区有吸收峰或末端吸收，选用溶剂时应思索溶剂自身吸收的干扰。选择溶剂时，被测组分的丈量波长必需大于溶剂的截止波长。
常用的定量剖析办法有规范曲线法、规范对照法、吸光系数法及差示分光法等，以下引见前三种办法。
1）规范曲线法
规范曲线法又称工作曲线法或校正曲线法。规范曲线法较简单，在仪器剖析中应用普遍，对仪器的精度请求不高，合适剖析大批量的同类试样，但不合适剖析组成复杂的样品。关于同一台仪器，在肯定的工作状态和测定条件下，吸光度A与溶液浓度c之间呈线性关系。
①测定办法
首先配制一系列不同浓度的对照品溶液(或称规范溶液)，在相同条件下分别测定吸光度。以浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制规范曲线(如上图)，或依据二者的数值树立回归方程得A=bc+a。在相同的条件下测定试液的吸光度，从规范曲线或回归方程中求出被测组分的浓度。
②采用规范曲线法应留意的问题
(1)制备一条规范曲线至少需求5~7个点，并不得随意延长
(2)待测溶液浓度应在规范曲线线性范围内。
(3)待测溶液和对照品溶液必需在相同条件下停止测定。
依据Beer定律，理想的规范曲线应该是一条经过原点的直线。实践上，常有规范曲线不
经过原点的现象。其缘由主要有几方面，如空白溶液的选择不当，显色反响的灵活度不够，吸收池的光学性能不分歧等，应采取恰当措施加以改善。
2）规范对照法
假如绘制的规范曲线是经过原点的，测定试样时也可采用一种简化的办法，即规范对照法。
在相同条件下配制规范溶液（s）和样品溶液（x），在选定波优点，分别测其吸光度，依据Beer定律A=Ecl,因规范溶液和样品溶液是同种物质、同台仪器及同一波善于厚度相同的吸收池中测定，故l和E均相等，因而Cx=Ax Cs/As。
应用规范对照法的前提是绘制规范曲线需过原点，且普通请求规范溶液与样品溶液的浓度尽量接近，否则会惹起较大的误差。
3）吸收系数法
依据Beer定律，若已知厚度l和吸光系数或百分吸收系数，即可依据供试品溶液测得的A值求出被测组分的浓度。C=A/El
许多化合物的吸收系数或百分吸收系数能够从有关手册或文献中查到。也能够将供试品溶液的吸光度换算成样品的百分吸收系数或摩尔吸收系数，然后与纯品的吸收系数相比计算出样品中被测组分含量。
假如查不到被测物质的吸收系数，或测定条件与手册、文献中不尽相同，则不能采用吸收系数法停止测定。
二、三种办法的比拟
1）规范曲线法请求：
①A与c是一条直线或近似一条直线关系
②丈量过程中，请求仪器的工作状态及丈量条件坚持分歧。
③样品浓度cx应落在线性范围内
④规范溶液与试样组成类似
2）规范对照法请求：
①A与c是一条过原点或近似过原点的直线关系:A=a+bc 请求a=0
②丈量过程中，请求仪器的工作状态及丈量条件坚持分歧。
③样品浓度cx应落在线性范围内,c样与c标尽量接近
④规范溶液与试样组成类似。
3）吸光系数法请求：
①A与C是一条过原点或近似过原点的直线关系
②要丈量或能查到百分吸收系数或吸收系数
③请求单色光，对仪器请求高
我们要经常对仪器进行维护和测试，以保证仪器工作在较佳状态，以下是关于萨斯派克分光光度计的日常维护，望都能给大家参考：
一、温度和湿度是影响萨斯派克分光光度计性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正，萨斯派克分光光度计应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘等。
三、萨斯派克分光光度计使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，可以由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对萨斯派克分光光度计内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，最后，恢复原状，萨斯派克分光光度计再进行一些必要的检测、调校与记录。
萨斯派克分光光度计分析法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射选择性吸收而建立的分析方法。萨斯派克分光光度计采用微处理机控制技术，在可见光谱区域内对物质作定性、定量分析，是常规实验室必备的多用途分析仪器，应用于临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制及大专院校教学实验室等部门。
萨斯派克分光光度计具有背光式LCD显示屏，读数清晰明暸，采用先进的全息闪耀光栅C-T式单色器，具有波长精度高，单色性好，杂散光低等优点，采用微机测量系统，转换精度高，并有自动调整0%（T）和调整100%（T），浓度直读、浓度因子设定，并可选择串行数据打印机进行数据打印功能。萨斯派克分光光度计测量读数准确性高，重现性和稳定性佳。
紫外分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。 紫外可见分光光度计详细操作流程及校准方法: 一、紫外可见分光光度计光度测量 在模式选择屏幕中选择<1.Photometric光度>选项，将显示参数配置屏幕; 用GOTOWL键设定测量波长; 按F2键设定进样控制; 按START/STOP键时，测量开始，显示测量屏幕; 如需做空白校正，应在测量前先设置空白样品，然后，按AUTO-ZERO键，将测量值置为OABS(100%); 二、紫外可见分光光度计校正 开机预热10分钟足矣; 放入黑块和标样(没有的自己配)，关闭盖子; 校0; 把灯光对着黑块，把透光度调0; 把灯光对标样，将吸光度调到100%; 三、参比溶液介绍 参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中，虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。 四、紫外可见分光光度计使用注意事项 1.开机前应先预热15分钟，然后开机自检; 2.湿度要控制在75%左右，温度在5～30度之间; 3.仪器要稳压电源，接地要好。并且避免阳光直接照射; 5.常见故障及处理方法： 光门不能完全关闭：修复光门部件，使其完全关闭; 透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮; 仪器严重受潮：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂;以上为紫外可见分光光度计的具体操作方法及使用注意事项，希望能给予您帮助。 下一篇：恒温水浴的操作使用及注意事项
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