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浅析酶标仪的四个详细分类酶标仪如何操作

时间：2020-08-07 来源：仪多多仪器网作者：仪多多商城

酶标仪的详细分类：
1.光吸收酶标仪：是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测，特定波长的光通过微孔板中的样品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系，由此可以用来定性和定量的检测，光吸收的检测技术成熟，成本低，操作简单，但是动态范围窄，灵敏度比较低，特异性不强，一般可见光和紫外光分别采用钨灯及氘灯作为光源，而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换，适应不同测量波长的需求。
  2.荧光酶标仪：是用来进行荧光的检测，通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光，通过发射光栅后到达检测器，荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例，荧光检测灵敏度高，可实时检测，使用方便，检测模式多样，但是容易受外界干扰，激发光与发射光容易互相影响，干扰检测。
  3.化学发光酶标仪：是来自生物化学反应中的自发光，可分为辉光型和闪光型两种类型，辉光型发光持久，稳定，能持续一段时间；闪光型发光时间短,变化快，稳定性不强，需要应用自动加样器才可以进行，化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系，化学发光酶标仪灵敏度非常高,动力学范围广，
  4.多功能酶标仪：是以上三种酶标仪的集合，它集成了两种或者三种酶标仪于一体，可以同时进行光吸收，荧光和化学发光的检测，功能强大，使用范围广，可作为研究平台，避免了重复购买，是实验室的理想选择，另外根据通道的个数，可以将酶标仪分为单通道和多通道两种类型，单通道又有自动和手动两种之分。

　　【仪器网采购指南】接下来小编为大家分享下如何来选购酶标仪

　　酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。

　　酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。

　　国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的OD值×2.5，通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。

　　国内多家机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如：肝炎、艾滋病、优生优育等)，判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。另外，住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。

光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光， 400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
　　检测单位：
　　光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
　　检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。
　　OD值由下述公式计算：
　　E＝OD=C×D×E
　　C为检测物的浓度
　　D为检测物的厚度
　　E为摩尔因子
　　在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收较多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波
长。
　　但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
　　Anthos 酶标仪检测值计算
　　仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值
的计算如下：
　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
　　其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0％的情况下检测的二进位数值， Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下：
　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
　　Anthos 酶标仪的中心定位
　　仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
　　光源的参照通道
　　参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
　　酶标仪的用途和其它提示
　　用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。
　　质量控制
　　质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
　　空白校正
　　有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的　　说明书要求进行。
　　检测结果的解释
　　由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会造成OD值的不同，因此，　　只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。

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