紫外分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
紫外分光光度计的操作要点：
启动仪器之前，一定要把样品室内存放的防潮剂拿出，仪器进行正常运转检查的时候，千万不能开启样品室盖；要求比色皿当中的液体占总体积的66%-80%较好，千万不能让液体太多，以致于液体外泄腐蚀仪器；正常检测的时候，需要保证比色皿干净，内壁上液滴需要使用专业的纸进行擦拭，千万不能使用手进行直接的擦拭，容易对使用人员的手造成伤害，相信没有人希望这样的事情发生。
在正常运转的时候，严禁把液体溶剂放置于仪器的表层上，如果出现液体外泄的情况，一定要保证进行及时的清洁处理。当检测完毕之后，需要及时将比色皿内的液体处理掉，使用蒸馏水将其清理干净，同时倒置进行晾干处理。最后需要将仪器的电源关闭，把防潮剂放入到样品室内，做好防尘处理，等到管理人员同意方可离去。
紫外分光光度计的日常维护：
一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体亦可以影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘。
三、仪器使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，建议由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，最后，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录。
紫外可见光谱仪涉及的波长范围在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。
在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。
基本工作原理：
紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。
一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。
分光光度计的使用方法:
(1)接通电源;(2)使用前预热15min;(3)选择波长;(4)选择检测器;(5)如果可能的话,选择正确的缝宽;
(6)插入适当的空白对照;(7)调解到0%的透过率;(8)将吸光值调到零;(9)分析样品;(10)每测量10个样品后,用空白对照校验零刻度;(11)检测仪器的可重复性。
紫外分光光度计应用范围包括市政和工业废水，饮用水，加工过程用水，地表水，冷却水和锅炉补给水等。
是实验室普及率较高的一种光谱仪器了，由于灵敏度高、选择性好、准确度高、适用浓度范围广，比较重要是分析成本低、操作简便、快速得到广泛的应用，长期在分析领域扮演很重要的角色。但是常常会听某些同学为啥时候更换光源而烦恼，每次数据有差别，都觉得是光源惹得祸。
紫外分光光度计信号部分：
（1）紫外分光光度计样品信号重现性不良；
原因：排除仪器本身的原因外，最大的可能是样品溶液不均匀所致；在简易的单光束仪器中，样品池架一般为推拉式的，有时重复推拉不在同一个位置上；
检查：更换一种稳定的试样判定；
解决办法：采取正确的试样配置手段；修理推拉式样品架的定位碰珠；
（2）紫外分光光度计做基线扫描或样品扫描时，基线或信号有一个大的负脉冲；
原因：扫描速度设置得过快，信号在读取时，误将滤光片或光源镜的切换当做信号读取了；
检查：改变扫描速度；
（3）紫外分光光度计做基线扫描或样品扫描时，基线或信号有一个长时间段的负值或满屏大噪声；
原因：滤光片饲服电机“失步”，造成档位错位，国产电机尤甚；
检查：重新开机有可能回复，或打开单色器对照波长与滤光片的相对位置来检查（注意：打开单色器时要保护检测器不被强光刺激）；
解决办法：更换饲服电机；
（4）紫外分光光度计样品出峰位置不对；
原因：波长传动机构产生位移；
检查：通过氘灯的656.1nm的特征谱线来判断波长是否准确；
解决办法：对于高档仪器而言处理手段相对简单，使用仪器固有的自动校正功能即可；而对于相对简单的仪器，这种调整则需要专业人员来进行了；
（5）紫外分光光度计信号的分辨率不够，具体表现是：本应叠加在某一大峰上的小峰无法观察到；
原因：狭缝设置过窄而扫描速度过快，造成检测器响应速度跟不上，从而失去应测到的信号；按常理，一定的狭缝宽度要对应一定范围的扫描速度；或者狭缝设置得过宽，使仪器的分辨率下降，将小峰融合在大峰里了。
检查：放慢扫描速度看一看或将狭缝设窄；
解决办法：将扫描速度、狭缝宽窄、时间常数三者拟合成一个优化的条件；
（6）当紫外分光光度计波长固定在某个波长下时，吸光值信号上下摆动，特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器；
原因：开关触点因长期氧化所致造成接触不良；
检查：用手加重力量按琴键时，吸光值随之变化；
解决办法：用金属活化剂清洗按键触点即可；
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