今天讲下二氧化碳培养箱的使用方法,主要是针对刚刚应用二氧化碳培养箱的新手,需要注意的事项。
首先、 做好使用前的准备工作
二氧化碳培养箱应由专人负责使用,操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后,不要随意扭动,以免影响箱内温度,二氧化碳浓度,湿度的波动,同时降低机器的灵敏度。箱子的放置要水平,避免阳光直射和灰尘等,要保证仪器周围的气流循环,后部及侧面应留出5 cm的空隙。加装稳压电源保证电源电压波动不超过220 V±10%。所加入的水必须是蒸馏水或无离子水,防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用,经常检查箱内水是否足够,水位应加至“水位指示灯”灭灯时为止。使用前箱内应用消毒酒精或碘溶液彻底擦洗,防止其他微生物污染,导致实验失败。在房间安装空调,使环境温度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必须是纯净的,否则降低二氧化碳传感器的灵敏度和污染二氧化碳过滤装置。
其次、正确充气延长二氧化碳传感器使用寿命
二氧化碳培养箱箱内气压由二氧化碳气体传感器控制。二氧化碳传感器正常反馈要求进气压为Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。当箱内气压降低时,二氧化碳传感器在低压刺激下有节奏地开闭,向箱内慢慢充气,当进气压达0.1 MPa时,自动停止调节。如充气方法不当,使进气压力增大,当超过0.1 MPa甚至0.2 MPa压力,会损伤二氧化碳传感器。开始这种损伤效应不明显,不易察觉,反复错误操作,二氧化碳传感器损伤累积最终致命损坏,使气压调节失灵。因此,二氧 化碳传感器寿命与二氧化碳进气压大小有关,只要做好进气压调节,就能保护二氧化碳传感器性能。二氧化碳传感器价格昂贵,更换不易,所以一定要做好进气压调节,延长二氧化碳传感器使用寿命。
第三、做培养时注意培养箱湿度
箱内湿度对于培养工作来说是一项非常重要然而又经常被忽略的因素。因为饱和湿度环境可以避免培养液中二氧化碳逃逸,培养液中pH值稳定,有利于细胞生长, 足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度(如在开关门后)才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。所以二氧化碳培养箱使用过程中,在箱内托盘中放一 定量的灭菌水(3/2至全盘),使箱内成为饱和湿度环境。如使用者忘记补加水,使培养细胞处于低湿度甚至干热环境中,培养液二氧化碳气体易挥发,液体pH 值升高,影响细胞生长,在工作中要力求避免此问题发生。样本多时,箱内分区存放,培养物用筐或瓷盘存放,这样存取快速,缩短开门时间,减少箱内气体和湿度 变化,节省气体,稳定了细胞生长环境。
通过以上3点注意事项,相信新手对二氧化碳培养箱的使用细节有了进一步了解,更好的延长二氧化碳传感器使用寿命。
二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境。
二氧化碳培养箱的三个工作原理:
一、湿度的控制
因培养物需工作室内保持一定的湿度时,二氧化碳培养箱配有水盘。用户可在培养时将水盘放入工作室内,水盘加上适量的蒸馏水让其在工作室内自然蒸发,一般相对湿度可达95%。
二、温度的控制
二氧化碳培养箱温度控制器由铂电阻作为传感器与数字控制电路、LED数字显示电路等组成,当传感器输出与温度成正比的电阻信号转换成电压信号经电路放大后,一路送至显示电路显示实测温度。另一路送至比较器与设定值比较。当二者产生偏差时,触发可控硅功率管输出功率使加热管产生热量。当偏差减小直至为零时,其加热管发出的热量亦随之减小,直至停止加热。控制线路中有超温及水位报警功能。当显示温度超过设定值2.0℃时,温度控制器发出声光报警信号,同时切断输出,停止加热,防止温度继续上升;当水箱内水位过高或过低时,水位控制器发出声光报警信号,同时切断加热输出。仅水套式CO2箱具有水位报警功能!
三、气路的控制
气路由高浓度的CO2钢瓶、气泵、稳压阀、针型阀,电磁阀、流量计及储气瓶等组成。(高浓度的CO2钢瓶由用户自备)。当输入一定压力的高浓度CO2气体,通过调节阀、针阀及电磁阀的流量、时间控制,保证一定量的CO2气体进入工作室,达到自动控制工作室内的CO2浓度值。该值同时通过显示电路显示,便于观察了解。为方便用户在使用中进行浓度的监视和采样,在CO2箱的后背面装有采样、监视口。因采用了快慢速双重充气法,使CO2箱在开、关门后,工作室内的CO2浓度能快速恢复且无过冲现象。在CO2箱工作过程中,由储气瓶对工作室内进行补气,以保持稳定的CO2浓度值。
二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
二氧化碳培养箱的清洁保养:
1、取出所有隔板,隔板支架,以及所有附件、空气管道。清空水盘并用干净的无绒布擦干。
2、取出培养箱中的培养物。如果清洗时间不长,可以将其保存在干净,无菌的容器中,保持其温度。关闭培养箱,包括关闭供气阀。
3、记得清洗培养箱外壁,以消除可能进入的污垢和微生物。如果培养箱的顶部非常脏,当打开培养箱门灰尘很可能进入,所以清洁顶部是很重要的。用无绒布蘸温和的肥皂水。然后用干净的布蘸清水擦拭干净。用干净的干布擦干外面。特别要注意每个人都接触的门把手。不要使用任何液体或喷雾清洁剂清洁触摸屏显示器。而需要使用干的超细纤维布来清洁这些。
4、用蒸馏水冲洗箱体内壁和部件,并用干净的无绒布再一次擦干。
5、用稀释的季铵盐消毒剂擦拭内壁和部件。用70%酒精擦拭以除去任何剩余的消毒剂痕迹。再次强调,一定要擦到所有的角落,并记得安好门封条,更换内部零件。
6、加热培养箱,让培养箱完全干燥。这应该只需要花一点时间,所以不要让门开着—那只会重新引入新的灰尘和污物!
7、如果选配的培养箱具备自动消毒功能,请立即运行。在周期完成之后,用无菌蒸馏水填充储水器,并打开气阀。
8、用温和的肥皂水清洁所有的内表面,管道,隔板,隔板支架,内门,风扇和门封条。使用温和的洗洁精擦拭,去除所有隐藏的角落和缝隙中污垢、灰尘。圆角设计的培养箱更利于清洁工作。
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