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影响色谱柱使用寿命的五大因素及技术交流

时间:2020-04-17    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

影响色谱柱使用寿命的五大因素

  在气相色谱仪分析工作中,色谱柱是一个很昂贵的耗材,价格几千或是上万。一根气相色谱柱使用的次数越多,时间越久,其摊分到单词检测上的成本就越低,因此了解影响色谱柱寿命的因素,采取措施延长色谱柱的使用寿命具有重要的意义。那么影响色谱柱寿命的主要因素有哪些?

  影响色谱柱使用寿命的主要因素如下:

  1、色谱柱破损

  石英毛细管柱的聚酰亚胺层,如有少许破损就很嫩再保护脆弱的石英毛细管。当柱箱连续加热和冷却、柱箱风扇的振动和柱架等都会对毛细管造成应力,最终在色谱柱有弱点处破裂。

  2、热损伤

  超过色谱柱温度上限,会造成色谱柱固定相和管表面加速损坏,色谱柱的过量流失会使活性组分拖尾,降低柱效。一般热损坏是一个很慢的过程,但有氧存在时,会大大加速热损坏。

  3、氧损伤

  氧是毛细管柱的大敌,在接近室温下,不会对色谱柱有太大损害,柱温升高时会严重损坏色谱柱。

  4、化学损伤

  有少数化合物会使固定相遭到破坏,不挥发性化合物进入色谱柱常常会降低色谱柱的性能,但是不会破坏固定相,有条件时这些沉积的残留物可以用溶剂冲洗,能恢复色谱柱的性能。

  5、污染

  气相色谱中,毛细管柱被污染是很普遍的问题,不幸的是,它和各种各样常见的故障想死,常常被错误地判断为其它的故障,虽然被污染了的色谱柱并没有损坏,但是已经失去了效能。

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色谱柱 影响色谱柱使用寿命的五大因素_色谱柱

色谱柱的再生

  高效液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生。

  1、反相柱

  分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。

  2、正相柱

  分别用正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶剂做流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大,可降低流速,避免压力过高)。注意使用溶剂的次序不要颠倒,用甲醇冲洗完后,再以相反的次序冲洗至正己烷。所有的流动相必须严格脱水。

  3、离子交换柱

  长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降,。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

  用户还可以选择能溶解柱内污染物的溶剂为流动相做正方向和反方向冲洗。但再生后的色谱柱柱效是不可能恢复到新柱的水平的。

  如果柱子装反了,可以调回来,但可能会造成柱内担体塌陷。在不得已的情况下尽量不要反装色谱柱。

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色谱柱 色谱柱的再生_色谱柱

聚合物基质色谱柱的规格选择

    聚合物基质色谱柱具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格。该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。


    与硅胶基质的反相填料相比,PolyRP固定相的一个显著优点是可以在极端pH(1-14)条件下使用,尽管分离效率略有降低。它具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格。

 

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    该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。与硅胶基质的反相填料相比,PolyRP固定相的一个显著优点是可以在极端pH(1-14)条件下使用,尽管分离效率略有降低。


    聚合物基质色谱柱的安装:


    a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。


    b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。


    c、按柱管上标示的流动相流向,将聚合物基质色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。


    在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,切记不要用力过大。如聚合物基质色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。


    聚合物基质色谱柱主要基质的特点:


    a.硅胶


    硅胶是陶瓷性质的无机物基质,刚性大,不易变形。


    化学性质较稳定,但对于水溶液尤其碱性水溶液仍然是不稳定的,即使表面经过良好的化学键合,覆盖了固定液,还是要注意水、碱性溶液、酸性溶液对硅胶的溶解作用,基质或者说是柱床(packedbed)溶解对色谱柱的影响是致命的。


    以聚合物基质色谱柱的填料构成了目前绝大多数的色谱柱填料。纯硅胶填料适宜分离溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,硅胶也可以做凝胶色谱但柱效较低。


    聚合物基质色谱柱键合固定相的高压液相填料,有其他填料无法比拟的高分离效能。


    b.二氧化铝


    二氧化铝和硅胶相似,但对水溶液、酸性碱性水溶液溶液更加不稳定。所以,极少用作键合固定相的基质,也是适宜分离溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,尤其是分离芳香族碳氢化合物。酸性易离解的化合物容易在二氧化铝上形成死吸附。另外,氧化铝分离几何异构体能力优于硅胶。


    c.聚合物填料


    聚合物基质色谱柱受压会变形,压力限度低但pH使用范围宽。苯乙烯-二乙烯苯基质疏水性强,使用任何流动相,在整个pH范围内稳定,可以用强酸、强碱来清洗色谱柱。甲基丙烯酸酯基质比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更强,但可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。


    由于不耐压、有溶胀性,所以聚合物填料适宜用于大分子像蛋白质或合成的高聚物,另外还可以制成分子排阻、离子交换柱。大孔树脂实际上主体就是苯乙烯-二乙烯苯聚合物或类似的合成高聚物。


    聚合物基质色谱柱广泛用于各种不同基质中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的分离。可以用来分析有机酸及利巴韦林等物质,可以用来分离树胶醛糖、阿糖醇等糖类。

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