高效液相色谱仪分析中待测样品的制备流程高效液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变，对分析结果的干扰因素很多，为达到分析目的，样品要进行有效的制备。高效液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。
一、预处理：
1、固体样品：含水较低，粉碎过筛。含水量较高，取使用部分烘干后，粉碎过筛。
2、液体样品：搅拌混合均匀。
3、特殊样品：根据实验要求进行特殊处理。
二、提取：
1、浸提法（固-液萃取法）：将样品浸泡在溶剂中，把固体样品中的某些组分浸出。
2、萃取法（液-液萃取法）：利用被提取组分在互不相溶的两种溶剂中分配系数的不同实现分离。
三、净化：
1、萃取法：适用于液体样品，少量多次。
2、化学法：通过使杂质或待测物发生化学反应而改变其溶解性，使其与原体系分离。
3、层析法：利用混合物中各组分理化性质的不同，使各组分在支持物上的移动速度不同，而将各组分分离。
四、浓缩：
1、常压浓缩：通过升高温度，将溶剂由液态转化成气态被抽走，从而达到浓缩目的。适用于挥发性和沸点相对较低的样品。
2、减压浓缩：通过抽真空，使容器内产生负压，在不改变样品化学性质的前提下降低样品的沸点，使一些高温下化学性质不稳定或沸点高的溶剂在低温下由液态转化成气态被抽走，从而达到浓缩目的。
3、冷冻干燥：冷冻的同时抽真空减压，使溶剂升华。适用于生物活性样品。
4、氮吹仪浓缩：采用氮气对加热样品进行吹扫，使样品迅速浓缩，达到快速分离纯化的效果。适用于农残检测和制药行业等样品的批量处理。
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高效液相色谱仪（HPLC）现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样，在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。
流动相脱气对于避免HPLC系统出问题，顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力，由于气体的压缩比与液体相比大的多，因而当气泡存在时，你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大，液相泵将不能输送任何溶剂，而且如果压力低于预先设定的压力低限，泵将停止工作。有些泵设计可以很好地排除气泡，而也有一些泵设计当气泡存在时将停止运转。
常用的脱气方法有如下几种：
1、吹氦脱气法。
利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性，在0.1MPa压力下，以约60 mL/min流速通入流动相储液容器中10～15min，可以很有效地从流动相中排除溶解的空气，能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置，一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好，但我们国内氦气价格较高，很少有实验室采用此方法。
2、加热回流法。
此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率，否则溶剂会丢失，混合流动相的比例会有变化。
3、抽真空脱气法。
此法可使用真空泵，降压至0.05～0.07MPa即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化，从而影响到实验的重现性，因此多用于单溶剂体系的简单分析。
4、超声波脱气法。
将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中，用超声波震荡10～20min。此法的脱气效果最差。
5、在线脱气法。
现在商品的HPLC仪器，均可配在线脱气机。在线脱气使用简单，低故障，有效。建议购买仪器时一定要购买，有的公司是作为选购件，所以与仪器公司谈配置时应与公司确认。
高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱，也可以拓展为制备系统，采用高压混合器连接两个高压恒流泵，利用RS232通讯，即可实现梯度分析；
便于用户自由选择与搭配，混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成，用途广泛；
可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
高效液相色谱仪分离原理：液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。
流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。
当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，高效液相色谱仪报价，服从于高效液相色谱计算公式；
6种定量计算方法：归一法、修正归一法、带比例因子的修正归一法、内标法、外标法，高效液相色谱仪适用范围，以及指数计算法。
高效液相色谱仪特点：
1、梯度洗脱内部软件可自控制，编辑、存贮60个梯度方法，运行复杂的梯度程序；
2、泵形式：串联双柱塞 浮动式密封圈；泵头自冲洗功能，泵无须手动排空即可输液“自吸式单向阀”技术，可延长密封圈使用寿命；
3、光路系统采用精密定位结构和独特的散热技术，高效的光学系统和数字过滤；
4、程序化的溶剂类和压缩因子，可自动补偿；完整的预清洗功能，更于快速溶剂更换；
5、波长调节功能：既可由键盘面板控制也可由程序软件设定，全封闭集成型光电检测元件，无需任何机械部分调整即可选择或改变波长；
6、光源运行时间在线监测并显示，方便用户确定光源寿命；
7、三条流量校正曲线以及特有的多点参数校正，保障了极高的流量准确性；
8、梯度：高压2-3元；梯度方式：高压，梯度洗脱内部软件可自控制，可通过PC机及泵控制；
9、实时显示样品池和参比池能量，方便判断光源和流通池状态；
10、紫外检测器具有自动波长定位调整，自动调零，多量程输出选择；
11、智能化高，可实现网络化平台监控，提高了你的QC效益；
12、自动化，让你从繁锁的分析操作中解放出更多的时间。
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