荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。
荧光分光光度计的基本原理:
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子 吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光。
不同物质由于分子 结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。
荧光分光光度计的优缺点:
优点:灵敏度高,可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱,不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。
缺点:
1、荧光的光强并不高,所以呈线性情况有时不很理想;
2、某些反应荧光持续的时间较短;
3、荧光的发散方向不集中,不像透射光那样集中,强度高;
4、受某些离子的干扰影响,荧光会湮灭,试验速度必须要快。
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
荧光分光光度计使用说明:
开机时,请先开氙灯电源,再开主机电源。每次开机后请先确认一下一起两边排热风扇工作正常,以确保仪器正常工作,发现风扇有故障,应停机检查。
主机工作时顶部排热器温度很高,切勿触摸,以免受伤.氙灯点亮后需一定时间稳定,故进行精密测试应在30分钟以上。当氙灯未能触发,并连续发生“吱吱”高频声或“叭叭”打火声时,请立即关掉氙灯电源,稍后数秒重新触发。请尽量减少不必要的氙灯触发次数,避免氙灯在高压下反复触发。
封闭氙灯电源后,若要重新使用,请等待60秒以后重新触发。运行未知浓度的样品测试时,灵敏度设置请从低位向高围(0-7)逐步设置,当灵敏度较高时(>3),为了保护光电倍增管,请拥护勿将强光置进样品室内。当(仅当)操纵者错误操纵或其他干扰引起微机错误时,应该立即关断主机电源,重新启动,但无须关断氙灯电源。单色器内用螺丝紧固处不得松动,光学器件和仪器运行环境需保护清洁。清洁仪器外表时,请勿使用乙醇乙MI等有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩.比色皿保持清洁。
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。
荧光分光光度计的基本原理:
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态,这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光。
不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。
荧光分光光度计的特点:
灵敏度高,可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。
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