菌落计数器由计数器、探笔、计数池等部分组成,计数器采用CMOS集成电路精心设计,LED数码管显示,字高13mm,清晰明亮,配合专用探笔,计数灵敏准确,菌落对比清楚。便于观察。可广泛用于食品、饮料、药品、生物制品、化妆品、卫生用品、饮用水、生活污水、工业废水、临床标本中细菌数的检验。那么菌落计数器都是怎样进行计数的呢?上海巴玖来为您详细讲解菌落计数器的计数方法。
1.计数器测定法
即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。本法简便易行,可立即得出结果(本法不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数)。
2.电子计数器计数法
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。
3.活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法,是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液,作一系列的倍比稀释,然后将定量的稀释液进行平板,根据培养出的菌落数,可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的方法,也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意:①一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是常用的活菌计数法。
4.比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定。
5.测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重;干重法系单位体积培养物经离心后,以清水洗净放人干燥器加热烘干,使之失去水分然后称重。此法适于菌体浓度较高的样品,是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
6.测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分,含量较稳定,测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。
7、颜色改变单位法(colour change unit,简称CCU)
这种方法通常用于很小,用一般的比浊法无法计数的微生物,比如支原体等,因为支原体的液体培养物是完全透明的,呈现为清亮透明红色,因此无法用比浊法来计数,由于支原体固体培养很困难,用cfu法也不容易计数,因此需要用特殊的计数方法,即CCU法。它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标,来计数微生物的相对含量的。
全自动菌落计数器因其计数准确、自动化程度高、可留存样品信息、使用方便,一般可在数秒内统计出样品菌落数、性价比高等优点,而受到众多企业、医院、科研院所的喜爱,但是由于全自动菌落计数器的科技含量较高,如果选型出现问题,对日后的检验、科研工作会带来很大不便,所以可以的办法就是在挑选时一定要挑选一台满足使用需求的菌落计数器,那如何选购一款优质的菌落计数器呢?
一、根据实际使用需求来确定CCD传感器的档次
很多用户偏向于选择像素高的菌落计数器,却没考虑到检验和科研的实际应用需求,所以用户在选购前就要确定好自己要买多少像素的CCD传感器。
二、看图像采集通道功能,指标越多越好
所谓"图像采集通道",就是菌落计数器对于样品信息的获取能力,也就是标志着菌落计数器开始计数统计前的初始信息是否真实可靠。如果图像采集通道功能过于单一,那当后期计数时时会很容易出现误判,所以"图像采集通道"指标越多越好。指标响应时间越小,则标志着该菌落计数器获取样品信息的能力越强。
三、看最小菌落分辨率为多少
一般入门级菌落计数器最小菌落分辨率多半有0.1mm左右的效果,中等机型有0.05mm的水准,若实际比较入门、高阶机型的图档显示能力,拥有高分辨率的计数器,在菌落较小时效果会更明显。
四、看有没有数据及报表管理功能
在选购菌落计数器时一定要选有具有数据及报表管理功能的设备,于由微生物的不可复检性,对于以往检验数据的管理和回溯极为重要,不然在实际开展工作时繁杂的统计数据和报表管理会耗尽科研人员的精力。
五、不要指标高的,就要效果好的
现在有些菌落计数器在给用户介绍时,会宣传他们的产品有多少多少功能,多高多高的指标,实际上等真正买回家,根本用不到这么多功能,重要的还是要统计菌落的实际效果好不好,不能为了过多的功能而买一个效果不是很好的设备。而统计效果的好坏关键在于算法是否合理。
六、看使用是否方便
全自动菌落计数器的一个主要优点在于它降低了人工统计菌落的工作量,减轻了工作人员的工作强度,但由于菌落形态和样品状态的不确定性,市面上大多数菌落计数器都较为强调通过人工干预来提高准确度。用户在选购设备时应注意操作是否简便、是否符合工作人员的操作习惯和操作思路。一般来说,需要的人工干预越小,使用越简便。
菌落计数器可减轻实验人员的劳动强度,提高工效和工作质量。产品广泛用于食品、饮料、药品、生物制品、卫生用品、饮用水、工业废水、临床标本中细菌数的检验。
菌落计数器注意事项:
1、仪器应放置在平整牢固的实验台上使用。
2、点数菌落时,探笔不要过于倾斜。轻轻点下至有弹跳感时,数字即被输入。
3、仪器应防潮、防强烈震动、防直接日光曝晒、防酸碱侵蚀。用后应加防尘罩。
4、注意防止细菌污染计数池。
5、仪器及探笔均不能随意拆卸,发现故障,应请有经验的专业人员检修。
菌落计数器是各级卫生防疫站、环境监测站、食品卫生监督检验所、医院、生物制品所、药检所、食品厂、日化厂及大专院校、科研单位实验室的必备仪器。
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