由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器,款式和价格都是多样化的,因此如何选择一款合适的分光光度计就显得尤为重要了。尽管分光光度计种类繁多,但不外乎:简易型、中档型和高档型三大类。
一、简易型仪器及其特点:
结构:这种类型的仪器多为单光束型,即只有一束光照射到样品室内;光源一般仅有钨灯;样品支架一般为推拉式四联池架;波长选择多为手动查找,重复性差;狭缝为一个固定宽度模式;光学性能指标较低;检测器多为光敏二极管;显示器多为机械表头或数码管显示器,数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。
测量模式:多为定点(固定波长)吸光度或透过率测量方式,基本不能进行波长扫描测量。
适应范围:小型实验室及示范教学,分析样品相对简单,测试结果精度要求不高。
二、中档型仪器及其特点:
结构:此类仪器多为双光束型或准双光束型,但也有单光束仪器型;光源有钨灯和氘灯;样品池支架为两个固定式,分别是样品通道和参比通道;波长按照设定模式自动查找或扫描;狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的;检测器多数是硅光二极管,但也有少数用光电倍增管的;光学性能相对较高,其中光栅的技术指标尤为重要,较佳的光栅为凹面型,为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器;显示器为液晶式或连接电脑,数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。
测量模式:透过率、吸光度、浓度直读、单光束;单点及扫描均可。
适应范围:此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。
三、高档型仪器及特点:
除了中档仪器的特点外,主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了,比如使用了大尺寸的凹面光栅,并且光栅刻槽数大于1800条/mm;波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm,可达到2600nm;狭缝均为连续可调型,以适应高分辨率的需要,波长扫描速度的档位也增加了,检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器;数据处理目前基本是电脑来执行;衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件,如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。
测量模式:透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式,单点、扫描均可;
适应范围:科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品,也可测固态样品。
故障一:数显不稳
原因:①环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。应改善工作环境。
②预热时间不够。应延长预热时间至30分钟左右。
③光电管内的干燥剂失效,使微电流放大器受潮。应烘烤电路,并更换或烘烤干燥剂。
故障二:仪器不能调零
原因:①透过率“100%”旋到底了。应重新调整“100%”旋钮。
②仪器严重受潮。应打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥,并更换干燥剂。
故障三:仪器不能调“100%”
原因:①光能量不够。应增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)②光电转换部分老化。应更换部件。③比色皿架未落位。应调整比色皿架使其落位。
以上是分光光度计的常见故障及处理方法,希望能够对您有所帮助。
双光束紫外-可见分光光度计(以下简称仪器),系指从单色器发出的单色光经光束开关(斩光器)分成为样品和参比两条光束结构的仪器。
它能消除光源不稳和放大器增益变化的影响,并能自动记录和扫描物质的吸收光谱图。
仪器在开机后通常会做一些自检,但仍应按本规程进行检定。仪器的波长范围包括195~800nm,狭缝为0.1~5nm可调。
工作原理
紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子能级的跃迁,它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律(Lambet-Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时,溶液的吸光度是吸光物质的浓度c及吸收介质厚度(吸收光程)的函数。
其常用表达式如下(式中ε为系数):
A=ε·c·l
紫外见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。根据光路设计的不同,紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
制定依据
本规程主要参照国家计量检定规程《JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计》、《JJF1641-2017紫外可见分光光度计型式评价大纲》及《中国药典》2015年版四部指导通则“0401紫外-可见分光光度法”拟定。
项目及技术要求
波长准确度≤±1.0nm(紫外光区),≤±2.0nm(500nm附近);
波长重复性≤0.5nm。
基线平直度≤0.01吸光度。
0%线噪声≤0.1%,100%线噪声≤0.5%.
吸光度准确度应符合规定。
杂散光<0.8%。
光谱带宽≤标示带宽±20%。
吸收池配对误差≤0.5%。
检测结果处理
自检结果全部符合技术要求者,即为合格,可以使用。若检测结果不符合规定,应重新调试仪器再进行自检,符合规定后方可使用。
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