紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱，来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
紫外分光光度计用途:
1.检定物质
根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长λ-max和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中，已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中，为药物分析提供了很好的手段。
2.与标准物及标准图谱对照
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。
3.比较最大吸收波长吸收系数的一致性
4.纯度检验
5.推测化合物的分子结构
6.氢键强度的测定
实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
7.络合物组成及稳定常数的测定：
8.反应动力学研究
9.在有机分析中的应用
有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学，它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。
紫外分光光度计主要应用于对有机物、无机物、蛋白、细菌生长浓度进行定量，被广泛的应用于科研、化工、制药、环保、卫生、防疫等多个行业当中。我们在选择紫外分光光度计的时候对于它的选购方法是必须要掌握的，今天小编就来为大家具体介绍一下紫外分光光度计的选择方法吧。
1、仪器的光度准确度
光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的关键要求，需要优先考虑。
2、仪器的杂散光
它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源，一般这个值越小越好。
3、仪器的光谱带宽
是指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。体现仪器的光谱分辨率。按照比耳定律，一般情况下光谱带宽应该是越小越好，但如果仪器的光源能量弱，光学传感器的灵敏度低时，光谱带宽小了，也得不到理想的测量结果的。所以，选择和使用仪器时一定注意多方面考虑。
4、仪器的稳定性
稳定性是用户较为关注的核心指标了，性能稳定可靠是基本的要求。
5、仪器的噪声
噪声也是仪器的重要参数指标，它体现了仪器的做稀溶液的能力。噪音指标无疑越小越好。
6、仪器波长的准确度及重复性
仪器的每个值都是在一定的波长下测得的，如果所示的波长和实际波长偏差过大，那么测出的值和真值的同样相差很大，就谈不上准确了，所以说准确度这个指标非常重要。
紫外可见光谱仪涉及的波长范围在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。
在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。
基本工作原理：
紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。
一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。
分光光度计的使用方法:
(1)接通电源;(2)使用前预热15min;(3)选择波长;(4)选择检测器;(5)如果可能的话,选择正确的缝宽;
(6)插入适当的空白对照;(7)调解到0%的透过率;(8)将吸光值调到零;(9)分析样品;(10)每测量10个样品后,用空白对照校验零刻度;(11)检测仪器的可重复性。
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