紫外分光光度计是一种常用的分析仪,可以根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用,具有性能稳定、使用灵活、维护简便等优点。
1、检定物质
根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。
2、与标准物及标准图谱对照
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标、准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
3、比较最大吸收波长吸收系数的一致性
4、纯度检验
5、推测化合物的分子结构
6、氢键强度的测定
实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不、同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂、。
7、络合物组成及稳定常数的测定
8、反应动力学研究
9、在有机分析中的应用
有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学,它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。
紫外分光光度计应用范围包括市政和工业废水,饮用水,加工过程用水,地表水,冷却水和锅炉补给水等。
是实验室普及率最高的一种光谱仪器了,由于灵敏度高、选择性好、准确度高、适用浓度范围广,重要是分析成本低、操作简便、快速得到广泛的应用,长期在分析领域扮演很重要的角色。但是常常会听某些同学为啥时候更换光源而烦恼,每次数据有差别,都觉得是光源惹得祸。
紫外分光光度计信号部分:
(1)紫外分光光度计样品信号重现性不良;
原因:排除仪器本身的原因外,最大的可能是样品溶液不均匀所致;在简易的单光束仪器中,样品池架一般为推拉式的,有时重复推拉不在同一个位置上;
检查:更换一种稳定的试样判定;
解决办法:采取正确的试样配置手段;修理推拉式样品架的定位碰珠;
(2)紫外分光光度计做基线扫描或样品扫描时,基线或信号有一个大的负脉冲;
原因:扫描速度设置得过快,信号在读取时,误将滤光片或光源镜的切换当做信号读取了;
检查:改变扫描速度;
(3)紫外分光光度计做基线扫描或样品扫描时,基线或信号有一个长时间段的负值或满屏大噪声;
原因:滤光片饲服电机“失步”,造成档位错位,国产电机尤甚;
检查:重新开机有可能回复,或打开单色器对照波长与滤光片的相对位置来检查(注意:打开单色器时要保护检测器不被强光刺激);
解决办法:更换饲服电机;
(4)紫外分光光度计样品出峰位置不对;
原因:波长传动机构产生位移;
检查:通过氘灯的656.1nm的特征谱线来判断波长是否准确;
解决办法:对于高档仪器而言处理手段相对简单,使用仪器固有的自动校正功能即可;而对于相对简单的仪器,这种调整则需要专业人员来进行了;
(5)紫外分光光度计信号的分辨率不够,具体表现是:本应叠加在某一大峰上的小峰无法观察到;
原因:狭缝设置过窄而扫描速度过快,造成检测器响应速度跟不上,从而失去应测到的信号;按常理,一定的狭缝宽度要对应一定范围的扫描速度;或者狭缝设置得过宽,使仪器的分辨率下降,将小峰融合在大峰里了。
检查:放慢扫描速度看一看或将狭缝设窄;
解决办法:将扫描速度、狭缝宽窄、时间常数三者拟合成一个优化的条件;
(6)当紫外分光光度计波长固定在某个波长下时,吸光值信号上下摆动,特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器;
原因:开关触点因长期氧化所致造成接触不良;
检查:用手加重力量按琴键时,吸光值随之变化;
解决办法:用金属活化剂清洗按键触点即可;
紫外分光光度计在正常运转的时候,严禁把液体溶剂放置于仪器的表层上,如果出现液体外泄的情况,一定要保证进行及时的清洁处理。当检测完毕之后,需要及时将比色皿内的液体处理掉,使用蒸馏水将其清理干净,同时倒置进行晾干处理。最后需要将仪器的电源关闭,把防潮剂放入到样品室内,做好防尘处理,等到管理人员同意方可离去。
紫外分光光度计的操作要点:启动仪器之前,一定要把样品室内存放的防潮剂拿出,仪器进行正常运转检查的时候,千万不能开启样品室盖;要求比色皿当中的液体占总体积的66%-80%较佳,千万不能让液体太多,以致于液体外泄腐蚀仪器;正常检测的时候,需要保证比色皿干净,内壁上液滴需要使用专业的纸进行擦拭,千万不能使用手进行直接的擦拭,容易对使用人员的手造成伤害,相信没有人希望这样的事情发生。
紫外分光光度计的主要技术指标的简易测试方法,自己经常对紫外分光光度计进行维护和测试,以保证仪器的较佳工作状态。
一、温度和湿度是影响光度计性能的重要因素,可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,导致仪器机械部分的误差或性能下降。造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。南方地区的实验室应具备四季恒湿的仪器室,配置恒温设备。
二、环境中的尘埃及腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性,这些也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一,因此必须定期清洁,保障环境和仪器室内卫生条件,防尘等。
三、紫外分光光度计使用一定时间后,内部会积累一定量的尘埃,可以由专业维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘清理工作,同时将各发热元件的散热器重新紧固,对光学盒的密封窗口进行清洁,必要时对光路进行校准,对紫外分光光度计部分进行清洁和必要的润滑,最后,恢复原状,最后再进行一些必要的检测、调校与记录等工作。
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