紫外分光光度计主要应用于对有机物、无机物、蛋白、细菌生长浓度进行定量,被广泛的应用于科研、化工、制药、环保、卫生、防疫等多个行业当中。我们在选择紫外分光光度计的时候对于它的选购方法是必须要掌握的,今天小编就来为大家具体介绍一下紫外分光光度计的选择方法吧。
1、仪器的光度准确度
光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的关键要求,需要优先考虑。
2、仪器的杂散光
它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源,一般这个值越小越好。
3、仪器的光谱带宽
是指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。体现仪器的光谱分辨率。按照比耳定律,一般情况下光谱带宽应该是越小越好,但如果仪器的光源能量弱,光学传感器的灵敏度低时,光谱带宽小了,也得不到理想的测量结果的。所以,选择和使用仪器时一定注意多方面考虑。
4、仪器的稳定性
稳定性是用户较为关注的核心指标了,性能稳定可靠是基本的要求。
5、仪器的噪声
噪声也是仪器的重要参数指标,它体现了仪器的做稀溶液的能力。噪音指标无疑越小越好。
6、仪器波长的准确度及重复性
仪器的每个值都是在一定的波长下测得的,如果所示的波长和实际波长偏差过大,那么测出的值和真值的同样相差很大,就谈不上准确了,所以说准确度这个指标非常重要。
紫外分光光度计一般都随机附有一只塑料布罩,不使用时用其罩住整个仪器,这是很好的防尘手段。但发现很多实验室里不用附来塑料布罩,而是自己用一块普通布或做成布罩来覆盖仪器,防尘效果不如塑料布罩理想。另外,在塑料布罩只放入数袋防潮硅胶,也能更好起到延长防潮的功效。在防潮时,如果紫外分光光度计设有防潮干燥筒的,应经常检查,发现变色立即更换新的或加以烘干再用。
长期停用的紫外分光光度计,要定期开机除潮,如每隔一个月通电预热半小时,以保持整机呈干燥状态,并且维持电子元件的性能。
紫外分光光度计对溶液进行测定时,首先需要选择合适的测量波长。选择的依据是该被测溶液的吸收曲线。在一般情况下,我们总是选择最大吸收波长作为测量波长,这样可以提高灵敏度。而在有些情况下最大吸收峰很尖锐、吸收过大或附近有干扰存在,就不能选最大吸收波长,而必须在保证有一定灵敏度的情况下,选择吸收曲线中的其它波长进行测定(曲线较平坦处对应的波长),以消除干扰。绘制吸收曲线是正确选择波长的有效手段和方法。
吸光度范围:
试样在不同吸光度时,浓度的相对误差不同,一般选择0.2一0.8之间,浓度相对误差较小,可以通过改变吸收池厚度、检测波长或待测溶液浓度,使吸光度读数在适宜范围内。
狭缝宽度:
狭缝宽度不仅影响光谱的纯度,也影响吸光度值,在定量分析时,为了得到足够的测量信号,应采用较大狭缝。在定性分析时,为了提高分辨率,应采用较小狭缝,以获得精细的光谱结构。
紫外可见光谱仪涉及的波长范围在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查,有机分子结构的研究。
在定量方面,可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量,也可以测定物质的离解常数,络合物的稳定常数,物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。
基本工作原理:
紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。
一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因此测量光谱可以进行定性分析,而且根据吸收与已知浓度的标样的比较,还能进行定量分析。
分光光度计的使用方法:
(1)接通电源;(2)使用前预热15min;(3)选择波长;(4)选择检测器;(5)如果可能的话,选择正确的缝宽;
(6)插入适当的空白对照;(7)调解到0%的透过率;(8)将吸光值调到零;(9)分析样品;(10)每测量10个样品后,用空白对照校验零刻度;(11)检测仪器的可重复性。