与比重计相关仪器液相色谱仪是由检测器、输液泵、进样器、柱温箱、混合器、色谱柱等部分组成。判断液相色谱仪的指标有噪音,漂移,最小检测浓度,定性定量重复性等。
1、液相色谱仪噪音是指由液相色谱仪的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他液相色谱仪非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到液相色谱仪检测器的检测灵敏度,噪音越大,检测的灵敏度就越低。
2、液相色谱仪检测器最小检测度(也称检测限)是考核液相色谱仪检测器灵敏度的重要参数指标。CL=2×Nd×C/H(CL:液相色谱仪最小检测浓度Nd:噪音C:液相色谱仪样品浓度最小检测浓度H:样品峰高)。
3、液相色谱仪检测器漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离液相色谱仪基线原点的距离,通常用来衡量液相色谱仪稳定快慢。高品质的液相色谱仪能在较短的时间内达到稳定,从而在一定程度上提高了液相色谱仪分析效率。
4、液相色谱仪定性、定量重复性主要是研判液相色谱仪稳定性的指标,这对于分析液相色谱仪样品来说是非常重要的。好的液相色谱仪其稳定性应该是十分优秀的,这就要求多次液相色谱仪进样保留时间及含量的一致性,这样做出来的液相色谱仪检测结果才能准确使人信服。
5、液相色谱仪操作方便性无论是对新手还是成熟的用户都是很重要的。色谱仪自动化程度越高操作越简单,越有利于提高液相色谱仪分析效率,同时也为以后液相色谱仪分析方法的拓展提供有力。
高效液固色谱仪是利用样品各组分在固定相和流动相中吸附-解吸作用的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到吸附-解吸作用而达到相互分离。
主要类型:
液固吸附色谱
1.1分离原理液固色谱是基于各组分吸附能力的差异进行混合物分离的,其固定相是固体吸附剂。
1.2固定相;吸附色谱固定相可以分为极性和非极性两大类。
1.3流动相;流动相要求:
1.3.1选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性
1.3.2选用的溶剂应有高纯度,以防所含微量杂质在柱中积累,引起柱性能的改变。
1.3.3选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如果使用紫外吸收检测器,就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂;若使用示差折光检测器,就不能用梯度洗脱。
1.3.4选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力,以提高测定的灵敏度。
1.3.5选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。
1.3.6应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂,以保证工作人员的安全
1.4应用:液固色谱是以表面吸附性能力为依据的,所以它常用于分离极性不同低的化合物,也能分离那些具有相同极性基团,但数量不同的样品。
液液分配色谱
1.1分离原理;分配色谱法的原理与液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相;分配色谱固定相由两部分组成,一部分是惰性载体,另一部分是涂渍在惰性载体上的固定液。
1.3流动相;分内色谱中,要求流动相尽可能不与固定液互溶
1.4应用;既能分离极性化合物,又能分离非极性化合物。由于不同极性键合固定相的出现,分离的选择性可得到很好的控制。
键合相色谱
1.1分离原理
1.1.1正键合相色谱分离远离:使用的是极性键和固定性,溶质在此类固定相上的分离机理属于分配色谱。
1.1.2反键合相色谱分离原理:使用的是极性较小的键合固定相,其分离机理可用疏溶剂作用理论来解释。
1.2固定相;按极性大小可分为非极性、弱极性、极性化学键合固定相三种。
1.3流动相
1.3.1正键合相色谱中,采用和反相液液分配色谱相似的流动相,流动相的主体成分为己烷或庚烷。
1.3.2反相键合相色谱中,流动相采用和反相液液分配色谱相似的流动相,主题为水。
1.4应用
1.4.1正键合相色谱法的应用:多用于分离各类极性化合物如染料、炸药、多巴胺、氨基酸等;
1.4.2反键合相色谱法的应用:由于操作简单,稳定性和重复性好,该方法已成为一种通用型液相色谱分析方法。在生物化学、医药研究、食品分析和环境污染分析等多个领域有了很大的应用和发展。
凝胶色谱
凝胶色谱又称分子排阻色谱,它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。凝胶色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料,有一定的形状和稳定性。根据所用流动相的不同,凝胶色谱法可以分为两类:即用水溶剂做流动相的凝胶过滤色谱法(GFC)与用有机溶剂如四氢呋喃做流动相的凝胶渗透色谱法(GPC)。
液相色谱仪的原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相气体、液体、通过一固 定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
液相色谱仪的保养:
1、至少每天进行一次检漏。
2、泵正在带压工作时,不可拆卸其部件除非有经验的维修人员在进行故障处理、。
3、配制两种或两种以上洗脱液时,一定要先脱气再使用,保证流动相系统中不要形成气泡。
4、定期检查泵的润滑,只使用仪器说明书指定的润滑油。
5、定期检查检测器噪声、漂移,定期进行检测器校正。
6、除非实践证明其它纯度级别的溶剂可用,否则使用高效液相色谱流动相专用试剂。
7、更换溶剂时,一定要对系统进行冲洗。如果两种溶剂互不相溶,则应先用与这两种溶剂都能互溶的溶剂进行冲洗,再用新溶剂进行冲洗。
8、柱子不论何时都不能拆卸下接头,以免损失柱效,废掉柱子。