液相色谱仪流动相的性质要求
公司地址：江西省南昌市解放西路明珠广场C栋902室，福建省厦门市乐海北里35号403室
南昌捷岛科仪专业生产销售捷岛牌GC1690系列，GC1620系列气相色谱仪，并代理销售、培训、维修上海伍丰、沃特世/Waters、安捷伦、岛津、上海仪电上分厂、赛默飞世尔等国内外知名品牌气相色谱仪、液相色谱仪及其配件耗材，优惠价格、培训、维修请销售、培训和维修统一客服，：，欢迎经销商和终端用户在线或与订购，谢谢！
一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应考虑以下几个方面：
①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。
②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
③必须与检测器匹配。使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相，以提高灵敏度。
④粘度要低（应<2cp）。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压降增加，使分离时间延长。选择沸点在100℃以下的流动相。
⑤对样品的溶解度要适宜。如果溶解度欠佳，样品会在柱头沉淀，不但影响了纯化分离，且会使柱子恶化。
⑥样品易于回收。应选用挥发性溶剂。
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色谱分析是以假定给定组分的保留值在分离条件不变时保留值恒定为基础的。对标准的液相色谱程序而言，每个峰都对应于一个组分，以标准品与样品中组分的保留时间相对应进行鉴别。恒定的保留时间对分析设计排列的样品很重要。
在液相色谱仪分析中常涉及到组分的保留值。保留值发生改变可使已建立的方法不能继续进行下去，或引起分析周期太长，或者峰分不开。应该找出引起保留值变化的原因。
除上述条件之外，引起保留变化的原因主要包括下列3种：
1.柱-柱之间；
2.日-日或日内：保留时间可能随时间而变化，如温度、柱温、pH值等对柱性能有影响，通常是所有的峰提前或延迟。
3.样品-样品间：偶尔也有样品与标准品的保留时间不同，可能是样品介质的影响。
以下重点讨论造成日-日间和日内保留时间变化的影响因素，它们主要是：
a.分离条件控制差
除了色谱柱外，保留是温度、流动相组成和流速的综合体现，如果有一个条件变化，保留时间也会随之发生变化。
b.柱平衡慢
流动相组成或温度变化时，柱在新条件下再平衡需要一定的时间，在柱达到完全平衡钱不应进样。
c.柱钝化
长时间进样，柱会退化，强保留组分被柱不可逆的保留，导致所有组分保留减少。键合相层从填料微粒上剥落下来，会导致某些组分的保留增加，而另一组分的保留减少。
d.柱过载和样品介质相互作用
过大的样品量超出柱的线性范围，使保留减少。也可能是样品本身过载，从其它方面影响保留。
在液相色谱仪分析中，根据流动相和固定相相对极性的不同，可分为正相色谱和反相色谱。所谓正相色谱是指固定相极性大于流动相极性的情况，反之，固定相的极性小于流动相的极性，则称为反相色谱。
正相分析的场合：
假设使用的溶剂是15%二氯甲烷/己烷混合溶液，样品在二氯甲烷中更易溶解。如果样品可以在流动相中完全溶解自然没有问题。
如果样品不能溶解在溶剂中，选择100%二氯甲烷作为溶剂的情况下可能会产生故障。
在一般情况下，经常使用混合溶剂作为流动相。哪种组合最易于样品溶解可以从样品的洗脱时间上看出。在选择溶解样品的溶剂之前，把流动相的组成在5~10%变化范围内各种样品的洗脱时间作比较，选择样品最容易溶解的溶剂。因为，样品和溶剂、流动相互相溶解是分析的前提条件。
反相分析的场合：
假设使用的溶剂是50%的乙腈，使用的样品在乙腈中比在水中更易溶解。当然，可以的方法是使样品完全溶解于流动相中。
然而，如果样品不能溶解在流动相中，如何选择溶剂呢？100%的乙腈溶液？或者浓度50%以下的乙腈水溶液？这种情况下，第一个选择就是浓度50%以下的乙腈水溶液。第二个选择就是100%的水溶液，可以100~500微升注入。最差的选择是100%乙腈溶液。因为即使样品完全溶解在了100%的乙腈溶液中，随着流动相的加入，可能乙腈溶液被稀释导致样品析出。轻则造成上述a,b两种故障，重则向c,d发展。最严重则发生f的故障，那就只能更换色谱柱了。
然而，混合样品的情况下可能发生g的故障。判断样品会不会在色谱柱内部析出可以通过以下步骤。减少样品较易溶解的，溶剂量，然后试着增加注入量。也就是说，如果是要求注入在100%乙腈溶液中溶解的样品20ul，可以试着注入在20%乙腈中溶解的样品125ul。如果上述的故障消失了，则说明使用100%乙腈作为溶剂是不合适的，样品会在色谱柱内析出。
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