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岛津LC-20A型液相色谱系统的日常使用和维护及技术交流

时间:2020-05-10    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

配置
系统组成:本系统由DGU-20A脱气机、2个LC-20AT溶剂输送泵分为A,B泵、SIL-20A
自动进样器(7725 手动进样器)、C18 填料色谱柱、CTO-20A 柱温箱、SPD-20A 紫外-
可见检测器、CBM-20A系统控制器、LCSolution(Ver.1.21)工作站等组成。
准备使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤(有机相和水相分别选用各自的专用滤膜),超声脱气20min以上待用。根据待检样品的需要选用合适的色谱柱(柱进出口方向应与流动相流向一致)和定量环。
配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm 的样品过滤器过滤后待用。
检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
注意:真空抽滤装置和超声波装置为液相色谱实验室必须的辅助设备。
开机和平衡系统接通电源,依次开启稳压电源、A 泵、B 泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器,待泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、主机,启动工作站软件。
先把吸滤头放入流动相瓶中,打开排液阀,按purge键排液2~3分钟,purge完毕后
关闭排液阀启动泵送液(流速开始不宜太高应为正常分析流速的50%~80%),如有柱温条件可同时开启柱温箱,平衡系统30 分钟左右,此时可以同时进行自动进样器的purge 操作(时间为15~25 分钟)自动进样器清洗液一般使用与流动相比例接近的不含缓冲盐的试剂也可以用甲醇:水=70:30 或甲醇:水=1:1 代替,观察检测器基线平稳后即可做样。
注意:1.如果使用前色谱柱中保存的流动相为纯甲醇或纯乙腈,而新流动相中含有缓冲盐时,应先用纯水冲洗色谱柱十分钟左右再使用流动相,以免盐析出损坏系统。
2.如系统为正相和反相交换使用,应先将所有管路用异丙醇清洗后再更换新流动
相使用。
清洗系统和关机
数据采集完毕后, 如使用的是手动进样器请参看下图清洗:
具体方法:
用注射器吸20ml超纯水后套上冲洗头,将清洗头轻轻顶在进样口上(不宜用力太大,否则容易损坏进样口),使进样阀保持在Inject位置,慢慢将水推入,水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈,由样品溢出管排出。
泵头手动清洗:如系统中有泵头自动清洗装置,则无需手动清洗,否则需手动清洗尤其使用完缓冲盐流动相时,清洗时使用下面工具,先用注射器吸入20毫升蒸馏水,套上针头,插入泵头清洗管任意一端,推入蒸馏水,另一端流入废液杯,重复2~3次即可!
色谱柱清洗:
继续以分析中使用流动相冲洗10分钟以上,待基线平稳后关闭检测器,冲洗色谱柱
如流动相不含缓冲盐,可以用甲醇:水=70:30(或用纯甲醇)直接冲洗30分钟以上后把流速设为零,然后关闭所有仪器设备,顺序为:先退出工作站软件,再依次关闭系统控制器、检测器、自动进样器、柱温箱、泵;如流动相含缓冲盐可先用纯水冲洗20~30分钟后再用甲醇:水=70:30(或用纯甲醇)冲洗30分钟以上,流速设零后再关闭仪器各部分电源,然后关闭总电源离开实验室。

对液相色谱仪色谱工作站硬件的要求

  气相色谱是对气体物质或可以在一定温度下转化为气体的物质进行检测分析。由于物质的物性不同,其试样中各组分在气相和固定液液相间的分配系数不同,当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时,组分就在其中的两相间进行反复多次分配,由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同,虽然载气流速相同,各组分在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定时间的流动后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的讯号经放大后,在记录器上描绘出各组份的色谱峰。根据出峰位置,确定组分的名称,根据峰面积确定浓度大小。这就是气象色谱仪的工作原理。

  对液相色谱仪色谱工作站硬件的要求主要有以下五点:

  1. 对工作站可靠性的要求。目前很多国产色谱工作站硬件在电路设计和元器件选用上存在缺陷,造成硬件的稳定性差。有部分硬件在保修期内反复出问题,极大的损坏了品牌形象。

  2. 对量程范围的要求。在制备色谱仪和离子色谱仪等领域,量程范围通常会超过1V,达到5V或者更高。这就要求硬件具有拓展性,稍作更改既能满足上述要求。

  3. 对采样频率和最小分辨率的要求。毛细管电泳色谱,超高效液相色谱仪等快速分析设备的发展;痕量分析需求的增多。

  4. 对兼容性的要求。当前有些工作站硬件接上电脑后,出现系统死机,工作站死机,系统重启,鼠标乱跳等现象。这些现象需要从开发时,在源头上规避。

  5. 对通讯接口的要求。为了跟上计算机主机的变化,目前国内各厂家都把USB通讯作为一大亮点。然而USB通讯本身存在信号易中断的缺陷,目前还没有哪个厂家真正刻服了这个缺陷,所以建议在USB通讯之外,提供串行口的选择。当然,选用网口,顺应网络化数据采集和仪器控制的需求是当前可以的选择,这一趋势也会随着科学技术的不断发展得以快速进步。

标签: 液相色谱仪
液相色谱仪 对液相色谱仪色谱工作站硬件的要求_液相色谱仪

液相色谱仪原理与应用

    液相色谱仪的应用,可用于高沸点、热稳定性差以及具有生理活性物质的分析。一般来说,沸点在450℃以下,相对分子质量小于450的有机物可用液相色谱仪分析,但这些物质只占有机物的15%~20%,其余的80%~85%有机物原则上都可采用高效液相色谱仪分析。


    色谱柱的使用和维护,色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

 


    在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。调节流速太快,避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。


    反冲色谱柱,一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效,预柱和保护柱,选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。


    有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。


    避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。


    液相色谱仪的基本结构,由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。


    工作原理,利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。


    从液相色谱仪工作流程中看到,色谱柱是实现分离的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。


    色谱填料:经过制备处理后,用于填充色谱柱的物质颗粒,通常是5-10粒径的球形颗粒。


    色谱柱管:内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm,长250mm。


    色谱柱:也称固定相,是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的,色谱柱的填充,干法填充:在硬台面上铺上软垫,将空柱管上端打开垂直放在软垫上,用漏斗每次灌入50-100mg填料,然后垂直台面墩10-20次。


    湿法填充:又称淤浆填充法,使用专门的填充装置。

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液相色谱仪 液相色谱仪原理与应用_液相色谱仪

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