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如何做好离子色谱柱的保养工作及选购指南

时间:2020-05-10    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  【中国仪器网 解决方案】目前,离子色谱柱已发展了百余年,作为一种独立的色谱分枝,它已在多个领域的到了广泛的应用。与此同时,离子色谱柱作为离子色谱仪的核心部件,不仅样品中各种离子的分离均在色谱柱中完成,而且一般比常规液相色谱柱价格要贵很多。因此,仪器操作人员还需注意离子色谱柱的维护保养工作。
 
  1、确保色谱柱不进入颗粒物。样品一定要经过预处理,颗粒物的存在会给泵和色谱柱带来负担的物质。另外,含有重金属的样品,应以阳离子较换树脂处理去除重金属后才能进样;含有有机物的样品,应过C18固相萃取柱后进样;硬度较高的样品,进样前还需去除样品中的钙镁离子。
 
  2、确保离子色谱柱不干燥。每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品,还要用适当的溶剂来清洗柱;若分析柱长期不使用,要参照色谱柱保存办法,在冲洗干净后,对阴离子柱要通入一定浓度的碱(对阳离子柱要通入一定浓度的酸),并将色谱柱取下两端密封保存。另外,离子色谱柱的保存温度应在4-10℃,使用温度应在20-60℃。
 
  3、接离子色谱柱前确保系统已清洗干净。色谱柱在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;很多单位的离子色谱仪是阴、阳离子混用的,因此,接色谱柱前,一定要保证整个离子色谱仪上的所有阀件或管路已清洗干净,避免造成色谱柱堵塞。
 
  4、确保色谱柱在一定压力、流速条件下运行。仪器使用时一定要先检查整个流动管路中是否有气泡,如果有,需要先将气泡排除后再将色谱柱接上,防止将气泡带到色谱柱中。因为色谱柱中装填的树脂颗粒很小,气泡进入后将影响树脂和样品中离子的交换,同时气泡也将影响基线的稳定性。
 
  5、如需拆取色谱柱,首先需要等待其温度降至室温。拆下后还学理科堵头密封。室温保存色谱柱是,每周需通淋洗液一次。

色谱柱的构造性能

    色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。


    构造


    色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。


    柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。


    为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。


    也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。


    色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm(5~10&μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。


    色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类,尺寸规格也不同:


    ①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm(常用4.6mm,国内有4mm和5mm),柱长10~30cm;


    ②窄径柱(narrow bore,又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn),内径1~2mm,柱长10~20cm;


    ③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;


    ④半制备柱,内径>5mm;


    ⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;


    ⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。


    性能评价


    色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。


    在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20μm时,湿法填充较为理想。


    填充方法一般有4种:


    ①高压匀浆法,多用于分析柱和小规模制备柱的填充;


    ②径向加压法;③轴向加压法,主要用于装填大直径柱;


    ④干法。柱填充的技术性很强,大多数实验室使用已填充好的商品柱。


    必须指出,高效液相色谱柱的获得,装填技术是重要环节,但根本问题还在于填料本身性能的优劣,以及配套的色谱仪系统的的结构是否合理。


    无论是自己装填的还是购买的色谱柱,使用前都要对其性能进行考察,使用期间或放置一段时间后也要重新检查。


    柱性能指标包括在一定实验条件下(样品、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性,或分离度。


    一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。


    进行柱效比较时,还要注意柱外效应是否有变化。


    一份合格的色谱柱评价报告应给出柱的基本参数,如柱长、内径、填料的种类、粒度、色谱柱的柱效、不对称度和柱压降等。

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色谱柱的使用和维护

  在日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操纵过程中,需要留意下列题目,以维护色谱柱。

  (1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。

  (2)假如仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。

  (3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的忽然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的忽然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。

  (4)应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。

  (5)如使用柱温控制装置时,应留意在通人活动相后才能升温。

  (6)一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除往留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

  (7)选择使用适宜的活动相,以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使活动相在进进分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

  (8)避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

  (9)经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保存在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中活动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种活动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50-75mL。

  (10)保存色谱柱时应将柱内布满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。尽对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

  (11)色谱柱使用过程中,假如压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进人柱内,使柱头被污染;假如柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。

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色谱柱 色谱柱的使用和维护_色谱柱

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