液相色谱仪的原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相气体、液体、通过一固 定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
液相色谱仪的保养：
1、至少每天进行一次检漏。
2、泵正在带压工作时，不可拆卸其部件除非有经验的维修人员在进行故障处理、。
3、配制两种或两种以上洗脱液时，一定要先脱气再使用，保证流动相系统中不要形成气泡。
4、定期检查泵的润滑，只使用仪器说明书指定的润滑油。
5、定期检查检测器噪声、漂移，定期进行检测器校正。
6、除非实践证明其它纯度级别的溶剂可用，否则使用高效液相色谱流动相专用试剂。
7、更换溶剂时，一定要对系统进行冲洗。如果两种溶剂互不相溶，则应先用与这两种溶剂都能互溶的溶剂进行冲洗，再用新溶剂进行冲洗。
8、柱子不论何时都不能拆卸下接头，以免损失柱效，废掉柱子。
与比重计相关仪器液相色谱仪是由检测器、输液泵、进样器、柱温箱、混合器、色谱柱等部分组成。判断液相色谱仪的指标有噪音，漂移，最小检测浓度，定性定量重复性等。
1、液相色谱仪噪音是指由液相色谱仪的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他液相色谱仪非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到液相色谱仪检测器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。
2、液相色谱仪检测器最小检测度(也称检测限)是考核液相色谱仪检测器灵敏度的重要参数指标。CL=2×Nd×C/H(CL：液相色谱仪最小检测浓度Nd:噪音C：液相色谱仪样品浓度最小检测浓度H：样品峰高)。
3、液相色谱仪检测器漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离液相色谱仪基线原点的距离，通常用来衡量液相色谱仪稳定快慢。高品质的液相色谱仪能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了液相色谱仪分析效率。
4、液相色谱仪定性、定量重复性主要是研判液相色谱仪稳定性的指标，这对于分析液相色谱仪样品来说是非常重要的。好的液相色谱仪其稳定性应该是十分优秀的，这就要求多次液相色谱仪进样保留时间及含量的一致性，这样做出来的液相色谱仪检测结果才能准确使人信服。
5、液相色谱仪操作方便性无论是对新手还是成熟的用户都是很重要的。色谱仪自动化程度越高操作越简单，越有利于提高液相色谱仪分析效率，同时也为以后液相色谱仪分析方法的拓展提供有力。
色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。这两个原因，大致又可以分为以下几方面：
1、流动相的前处理
杂质堵塞色谱柱进口滤片，导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤，或过
滤不彻底，使固体杂质滞留于滤板上所致。
2、样品的沉淀
当溶解样品的溶剂与流动相不一致时，样品进入色谱柱时，可能因溶解度降低而沉淀出来，
造成压力升高。
3、晶体的析出
使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中，它们会因在新流动
相中的溶解度降低而析出，造成流体阻力加大、压力升高。
4、细菌或霉菌孳生
霉菌在流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长堵塞滤板，导致压力升高。所以在使用磷
酸盐缓冲液时一般要现配现用。
5、溶质吸附
当溶质在柱子上有较强的吸附，且所用的流动相难以将它们洗脱时，累积的未洗脱溶质也会
造成阻力增大和压力升高。
6、流动相更换过度较快
当改变流动相体系时，不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力升高。
7、压力脉冲
运行过程中，有时会产生系统内压力的突然升降。如此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的
崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力升高。
处理对于缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内的情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;
对于样品污染沉积的情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
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