双光束紫外-可见分光光度计(以下简称仪器),系指从单色器发出的单色光经光束开关(斩光器)分成为样品和参比两条光束结构的仪器。
它能消除光源不稳和放大器增益变化的影响,并能自动记录和扫描物质的吸收光谱图。
仪器在开机后通常会做一些自检,但仍应按本规程进行检定。仪器的波长范围包括195~800nm,狭缝为0.1~5nm可调。
工作原理
紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子能级的跃迁,它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律(Lambet-Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时,溶液的吸光度是吸光物质的浓度c及吸收介质厚度(吸收光程)的函数。
其常用表达式如下(式中ε为系数):
A=ε·c·l
紫外见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。根据光路设计的不同,紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
制定依据
本规程主要参照国家计量检定规程《JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计》、《JJF1641-2017紫外可见分光光度计型式评价大纲》及《中国药典》2015年版四部指导通则“0401紫外-可见分光光度法”拟定。
项目及技术要求
波长准确度≤±1.0nm(紫外光区),≤±2.0nm(500nm附近);
波长重复性≤0.5nm。
基线平直度≤0.01吸光度。
0%线噪声≤0.1%,100%线噪声≤0.5%.
吸光度准确度应符合规定。
杂散光<0.8%。
光谱带宽≤标示带宽±20%。
吸收池配对误差≤0.5%。
检测结果处理
自检结果全部符合技术要求者,即为合格,可以使用。若检测结果不符合规定,应重新调试仪器再进行自检,符合规定后方可使用。
原子吸收分光光度计在出厂前虽然仪器已经过严格检查;
但是由于运输过程中的颠簸或长期使用后,有可能发生漏气现象,为确保安全,在日常操作过程中;
请您注意如下事项:
1.长期在恶劣条件存放的仪器应该经常维护保养。
2.在运输过程中受到剧烈撞击的仪器,主机不能冒然通电!
3.一旦仪器的报警器发出声音,应立即关掉气源,并关机。
4.请您随时注意,一旦产生异味,请立即切断电源,关掉乙炔钢瓶总阀门。
请将空压机的空气管插入燃气管道中,并涂抹肥皂水以检查燃气管道各接头是否漏气;
特别应该检查雾化筒后部的防爆塞是否密封完好,决不能在发生漏气时点火操作,否则容易发生回火爆炸!
5.每次点火前检查废液管是否打好水封;确认水封无误时方可开机点火。
6.一定要使用优质正品的乙炔专用减压阀,并装有防回火装置。
7.乙炔钢瓶放置在临近仪器室的房间内,保持空气流通,并应有防火标识!
8.乙炔减压阀的出口压力为0.07MPa,不能大于0.1MPa,空气出口压力在0.25-0.3MPa(注意:不能用氧气代替空气进行点火实验)。
钢瓶压力显示低于0.3MPa时要更换新瓶。
9.乙炔气源附近严禁明火或过热高温物体存放!乙炔气源不应与氧化性气源同放!
10.排放的废液应及时倾倒处理或与当地环保部门联系!
11.在日常工作中应经常检查乙炔钢瓶与减压阀连接是否牢固无漏气!
12.定期检查各连接口有无漏气现象。
13.注意点火、关火顺序(先开空气再开乙炔点火,先关乙炔再关空气熄火)。
点火后操作人员不得离开!
在当天不用仪器操作时,请将乙炔管道里的剩余气体燃烧完,即直接关乙炔总开关再管空气!
14.严禁带电插拔数据线缆。
15.任何操作本仪器的人员均应经过上述安全培训。
16.带石墨炉的仪器一定要注意用电安全,由于会使用380V(3个火线,一个地线)动力电,加热时瞬间会产生很大的电流;
所以在石墨炉处于工作状态时,不要直接触碰炉体部分,以免造成危险。
在做实验时随时观察氩气(保护气体)的总压力和内气流量计的流量,以保证石墨管能够长期使用和实验的准确和一致性。
紫外分光光度法是根据物质的吸收光谱,来研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同;
因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
一般地,紫外可见分光光度计主要由光源系统、单色器系统、样品室、检测系统组成。
光源发出的复合光通过单色器被分解成单色光,当单色光通过样品室时,一部分被样品吸收,其余未被吸收的光到达检测器,被转变为电信号,经电子电路的放大和数据处理后,通过显示系统给出测量结果。
光源:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够的光强度,稳定。
可见光区:钨灯,碘钨灯(320~2500nm)紫外区:氢灯,氘灯(180~375nm);氙灯:紫外、可见光区均可用作光源。
单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。
棱镜:依据不同波长光通过棱镜时折射率不同。
光栅:在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm)。
利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。
吸收池:用于盛待测及参比溶液。
可见光区:光学玻璃池;紫外区:石英池。
检测器:利用光电效应,将光能转换成电流讯号。光电池,光电管,光电倍增管。
检流计(指示器):刻度显示或数字显示、自动扫描记录。
另外一种说法,紫外可见分光光度计还主要由电光系统、光学系统、光电系统、电子系统和数据处理、输出打印系统等几个部分组成。