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二氧化碳培养箱的正确使用 二氧化碳培养箱操作规程

时间:2020-05-16    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
  
  二氧化碳培养箱的使用方法
  
  1. 将随机提供的减压阀装在二氧化碳钢瓶上,接头处不得有漏气现象,暂不打开钢瓶。将减压阀输出接头用胶管(可用血压计上用的外径φ8,内径φ4的橡胶管代用)与CO2 箱背后上方的CO2 进气管接头接通相连,用压紧圈压紧,以防漏气。
  
  2. 用酒精将CO2 箱工作室内擦净,在箱体后背打开紫外线灯电源开关,消毒1-2小时。
  
  3. 用加水管连接水龙头和箱体左上侧加水口。水套式CO2 箱依此操作!
  
  4. 接通电源,电源开关置“1”,绿色指示灯亮。
  
  a. 水套式CO2 箱必须先进行加水操作,步骤如下所述:
  
  打开水龙头,缓慢给水箱加水,随水位逐渐升高,当低水位指示灯灭后,此时再等待3-5秒后停止加水,此时水位在低、高水位之间,水位灯均应不亮,设备可投入运行。在未加水至高于低水位时,低水位指示灯亮并有蜂鸣报警声。如进水过多,高水位指示灯亮后,水将从箱体背后溢水口溢出,故当高水位指示灯亮时,把左下侧的放水口橡皮管拉出后拔出放水塞放水(注意:放水橡皮管应向外拉直约300mm左右)。直至高水位指示灯灭后2-3秒,再把放水塞头塞紧。低水位报警时,应及时加水,否则温度控制器停止加热。
  
  b. 将温度设定值调到需要的温度(例如37℃),加热指示灯(绿)应亮,表示正在加热。(注:环境温度超出25℃,可用空调降低环境温度。)
  
  c. 将二氧化碳控制开关置于“0”。(关闭电磁阀,因为在未通二氧化碳培养时电磁阀长时间通电会发热,影响电磁阀寿命。)
  
  d. 待温度达到设定值后。将二氧化碳钢瓶开启,(开启前,减压阀应尽量拧松,防止减压阀输出压力过高导致输气橡皮管暴裂!)减压阀上进气压力表指示钢瓶内二氧化碳压力,缓慢地顺时针拧减压阀旋扭。使减压阀输出压力指示为0.05Mpa,指针处于刻度线中间。此时用拨盘设定二氧化碳浓度(出厂时调整为5%),开启二氧化碳控制开关前要关闭空气流量计和二氧化碳流量计,二氧化碳控制器显示“1”,此时即有二氧化碳进入内室。随着浓度升高,二氧化碳控制器显示出二氧化碳浓度值,到设定值时,设备自动切换到空气及二氧化碳补气状态。此时需调整空气流量计浮子应指示在760 ml/min(出厂时已调好),二氧化碳流量计浮子应指示在40 ml/min(出厂时已调好);若浮子偏离上述数值时,可调节流量计旋钮到760 ml/min(空气)及40 ml/min(二氧化碳)准确为止。(在开、关箱门后,短时间内空气流量计无流量,CO2 流量计流量也小于40ml/min这是正常现象)
  
  e. 出厂时一般调整为5%±0.3%二氧化碳浓度,已能满足广大用户的要求。
  
  f. 当温度达到设定值,波动±0.5℃以内,二氧化碳浓度也达到要求后,即可进行细胞培养。放入水盘,使湿度符合要求。
  
  g. 在使用本机或长期不用后使用本机,均应按上述要求操作,并且在正式培养前应作箱内污染检查。
  
  5. 关机
  
  培养结束后,开箱门取出培养皿,将未培养皿重新放入(注意观察水盘中的蒸馏水是否需补充)。若停止培养,则应先将CO2 钢瓶关闭,再将空气流量计和二氧化碳流量计关闭,CO2 进气开关置“0”位置,zui后关闭总电源。若长期不使用,则应取出水盘,擦干工作室,在CO2 进气开关关闭状态下,使CO2 箱在37℃条件下开机2小时,烘干工作室,再切断总电源。
  
  门温调节方法
  
  本机在出厂时,以37℃为基准调好,如冬天箱内玻璃门上水雾大,无法看清箱内培养物品,可在CO2 箱内后背调节门温旋钮,向右旋动(即向温度升高的方向),直至能看清箱内物品;如夏天,箱内实际温度高于设置温度时,则将调节旋钮向左旋动(即向温度降低的方向)直至箱内温度达到37℃。
  
  风机调节方法
  
  使用中,风量的大小不但会影响箱内温度的均匀度,直至影响控制温度。若在使用中,风量的过大影响到培养物品,则可在CO2 箱后背调节风机转速旋钮,直至满足需求。
  
  新购买的二氧化碳培养箱要如何连接到二氧化碳钢瓶?部分新用户不是很了解,为了让大家能够更好地操作,我们今天做个详细介绍。
  
  二氧化碳培养箱如何连接二氧化碳钢瓶
  
  首先在钢瓶上面连接减压阀(用培养箱专用阀门),再用软管连接到二氧化碳培养箱的CO2气体IN进口,软管两端用专用卡子固定好,钢瓶阀门开之前,必须确保减压阀完全关闭。钢瓶阀门打开之后,再开减压阀的小阀门,调节好压力,具体的要控制压力要设置在合理的压力范围内。
  
  二氧化碳培养箱一般使用的压力都不会很高,培养箱都很娇贵的,所以一定要先调好减压阀出口的压力后再连接二氧化碳培养箱。二氧化碳减压阀装在钢瓶上面后就可以用减压阀调节出口压力了,减压阀出厂里面都配有调节手轮的,把手轮插入减压阀正面凸出凹洞出轻轻往里面调节就可以了,越往里面调节二氧化碳减压阀出口的压力就越大。先可以试试减压阀出口压力稳不稳定(一般情况下二氧化碳培养箱需要的压力在0.03mpa-0.06mpa范围内也有用到0.1mpa要看实际情况的,二氧化碳气体就算放出来点也是没有什么危险的,其他气体就要另当别论了),如果确定没有问题就把手轮给松下来,调节手轮松下来后即使钢瓶是开着的减压阀的出口也是没有压力的,因为减压阀你不调节出口是没有压力的,如没问题便可连接二氧化碳培养箱。
  
  安全使用减压阀
  
  1、气瓶放气或开启减压阀时动作必须缓慢。如阀门开启速度过快,减压阀工作部分的气体因受绝热压缩而温度大大提高,这样有可能使有机材料制成的零件如橡胶填料、橡胶薄膜纤维质衬垫着火烧坏,并可使减压阀完全烧坏。另外,由于放气过快产生的静电火花以及减压阀有油污等,也会引起着火燃烧烧坏减压阀零件。
  
  2、减压阀安装前及开启气瓶阀时的注意事项:安装减压阀之前,要略打开氧气瓶阀门,吹除污物,以防灰尘和水分带入减压阀。在开启气瓶阀时,瓶阀出气口不得对准操作者或他人,以防高压气体突然冲出伤人。减压阀出气口与气体橡胶管接头处必须用退过火的铁丝或卡箍拧紧;防止送气后脱开发生危险。

二氧化碳培养箱的选择方法

  全世界的用户对二氧化碳培养箱都有两条基础的要求,一是要求二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供精确稳定的控制,以便于其研究工作的进展;二是要求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范,并且能够定期消除污染,以保护研究成果,防止样品损失。所以,选购二氧化碳培养箱的老师最关心的当然就是其高可靠性、对污染的防范和控制及使用方便。

  一、温度控制

  1. 加热方式:

  气套式加热和水套式加热,两种加热系统都是精确和可靠的,同时它们都有着各自的优点和缺点。

  水套式加热是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的,其优点:水是一种很好的绝热物质,当遇到断电的时候,水套式系统就可以比较长时间的保持培养箱内的温度准确性和稳定性(维持温度恒定的时间是气套式系统的3~4倍),有利于实验环境不太稳定(如有用电限制,或者经常停电)并需要保持长时间稳定的培养条件的用户选用。

  气套式加热是通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的,又叫六面直接加热。气套式与水套式相比,具有加热快,温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点,特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外,对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化(水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗,并要经常监控水箱运作的情况)。

  2. 温控系统:

  保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素,因此精确可靠的温控系统是培养箱不可或缺的重要部分。为了使培养箱更加稳定的工作,我们推荐用户选用具备相互独立三重温度控制功能的二氧化碳培养箱,即箱内温度控制、超温报警控制和环境温度监控。

  我们知道培养箱的最低工作温度一般是高于室温5℃,如果没有缓慢加热模式就非常容易在夏天高温天气(如室温30℃左右时)产生箱内温度过高;HF90的独立超温报警功能能够快速准确的在培养箱内温度高于培养温度1℃时,切断培养箱的主加热系统,同时声光报警;HF90的环境温度监控可以根据环境温度的变化自 动调节培养箱外门辅助加热系统的功率,达到精确控制箱体内温度的目的。

  3. 温度均一性:

  二氧化碳培养箱箱体内的温度均一性也是用户需要考虑的主要因素,一般在箱体内配备了风扇以及风道的培养箱的均一度要好很多,同时此装置还有助于箱内温度、CO2浓度和相对湿度的迅速恢复。

  当然,风扇/风道的优化也是同等重要的,HF90二氧化碳培养箱独特设计的大直径风扇和循环风道能够保证箱体内温度和二氧化碳浓度的均一性。大直径风扇相比其他品牌培养箱的风扇,能够在低转速(低风速)时产生大的空气循环流量,在达到均一性目的的同时,降低风速、减少箱内震动。降低风速、减少震动同时也就大大提高了箱内细胞培养的成功率。

  二、二氧化碳浓度控制

  1. 两种控制系统:

  红外传感器(IR)或热导传感器(TCD)进行测量。两种传感器都是准确的,但都各有优缺点。热导传感器监控CO2浓度的工作原理是基于对内腔空气热导率的连续测量,输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化,这样就会产生一个与CO2浓度直接成正比的电信号。红外传感器(IR)它是通过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR系统包括一个红外发射器和一个传感器,当箱体内的CO2吸收了发射器发射的部分红外线之后,传感器就可以检测出红外线的减少量,而被吸收红外线的量正好对应于箱体内CO2的水平,从而可以得出箱体内CO2的浓度。由于IR系统是通过红外线减少来确定箱内CO2浓度,而箱体内颗粒物能够反射或部分吸收红外线,使得IR系统对箱体内颗粒物的多少比较敏感,因此IR传感器应用在含HEPA高效空气过滤器的培养箱内比较合适。

  2. CO2测量系统自动校准功能:

  无论哪种CO2测量系统在使用一段时间后都会产生漂移,而产生漂移后直接会导致箱体内二氧化碳浓度不能稳定在我们的设定值,致使培养失败,所以我们在这里强烈建议用户在选购培养箱时必须要选择带有CO2测量系统自动校准功能的培养箱。

  3. CO2浓度均一性:此点与温度均一性的要求类似,在此就不做赘述。

  三、相对湿度

  箱内湿度对于培养工作来说是一项非常重要然而又经常被忽略的因素。维持足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度(如在开关门后)才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。目前大多数的二氧化碳培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的(其产生的相对湿度水平可达95%左右,但开门后湿度恢复速度很慢)。我们在此建议用户在选购二氧化碳培养箱的时候尽量选择湿度蒸发面积大的培养箱,因为我们知道湿度蒸发面积越大,越容易达到最大相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。

  四、防污染设计和消毒灭菌系统

  污染是导致细胞培养失败的一个主要因素,因而,二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生,其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面,并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如,鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长,为确保培养箱免受污染并且保证仪器箱体内的生物清洁性,相继问世了多种消毒灭菌方式,如带有紫外消毒功能的CO2培养箱;还有的设计生产了HEPA过滤器能过滤培养箱内空气,可过滤除去99.97%的0.3微米以上的颗粒;此外,还开发设计了能使箱内达到高温湿热的环境从而杀死污染微生物,达到消毒灭菌目的的培养箱。这些装置对于细胞培养来说是必不可少,但选择何种清洁装置呢?首先,我们考虑的当然是各种方式的灭菌能力,紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比,距离越远,消毒能力越差,所以紫外消毒方式有其局限性,难以达到彻底灭菌的要求;

  HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响,无法去除病毒和一些微小细菌,也有其局限性;相比较而言,高温消毒是目前比较有效消毒灭菌的方法,高温消毒又分为两类,一是传统的高温干热消毒,另一种是先进的高温湿热灭菌。

  接下来我们重点说一下高温干热和高温湿热两种方法的优劣。高温湿热由于蒸汽潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固,因此该法的灭菌效率比干热灭菌法高。其原因有三:

  ①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关,含水量愈大,发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分,所以较同一温度的干热空气中易于凝固。

  ②湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热,加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所需温度低,如在同一温度下,则湿热灭菌所需时间比干热短。

  ③湿热的穿透力比干热大,使其深部也能达到灭菌温度,故湿热比干热收效好一些。

  所以高温消毒并不是简单的看消毒温度,主要是看是否湿热消毒。另外,从使用角度看,湿热消毒一般控制在90℃就能达到很彻底的消毒效果,整个消毒过程中培养 箱内的所有附件都不用取出,可以全部进行消毒;而干热消毒为了达到较好的效果,温度一般都在100℃以上,在这种温度下消毒培养箱内的传感器、HEPA过 滤器等都要在消毒过程中取出,等消毒结束再装上,这样即麻烦,附件又不能同时消毒,而且增加二次污染的几率,再者要达到100℃以上的高温,培养箱的加热 系统的电热丝必然要加粗,这会导致培养箱的温度控制难度增加,均一性变差。所以我们建议用户在选购二氧化碳培养箱时选择含高温湿热灭菌方式的培养箱。

  五、其它因素

  二氧化碳培养箱的容积也是一个不可忽略的因素,买小了不够用,大了又浪费又占地方。二氧化碳培养箱的可选容积非常广,而且每种类型又有不同的容积可选。此时,就需要您在选购前对所需培养箱容积的范围有一个比较准确的了解,并在此基础上多预留一点空间,以保证不时之需。

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二氧化碳培养箱标签: 二氧化碳培养箱的选择方法_二氧化碳培养箱组合标题:

二氧化碳培养箱性能特点

  二氧化碳培养箱是细胞、组织、细菌培养的一种先进仪器。是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程必备的关键设备,广泛应用于微生物、农业科学、药物学的研究和生产。

  二氧化碳培养箱性能特点:

  采用国内首创流线圆弧型设计,外壳采用冷轧钢板制造,表面静电喷塑;

  本机温控系统采用微电脑单片机技术,控温,定时,超温报警,二氧化碳控制方式为配气式;

  显示为双屏高亮度数码管显示,示值准确直观,性能优越,触摸式按键设定调节参数;

  采用自动抑制系统,防止打开箱门造成内腔温度的波动度大;

  温控传感器采用的是电容式原装进口部件;加热方式有气套加热和水套加热两种供选择;

  内胆均为镜面不锈钢材料制成;半圆形四角易清洁;

  采用门温控制,可有效防止箱内玻璃门结露现象;

  工作室内搁架可随用户要求任意调节高度及搁架多少;

  具备两套控制系统,当主控系统失效时,副控系统起监控作用

标签: 二氧化碳培养箱
二氧化碳培养箱 二氧化碳培养箱性能特点_二氧化碳培养箱

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