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简述薄层色谱法的操作方法 薄层色谱操作规程

时间:2020-05-16    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
  【仪器网 使用手册】薄层色谱法是指根据各成分对同一吸附剂的吸附能力不同,在流动相流动固定相的过程中,连续发生吸附、解吸、再吸附、再解吸,实现各成分的相互分离的吸附薄层色谱法分离法。 以下,根据网上的资料,整理在薄层色谱法的使用中可以做的步骤
 
  1.制定薄层板,将固定相和水用研钵向一个方向研磨混合,除去表面气泡后,放入涂布器,将涂布器顺畅地移动到玻璃板上进行涂布,取下涂布在薄层上的玻璃板,放置在水平台上在室温下干燥后,在规定的温度下干燥,放入干燥剂进行干燥 使用前检查均匀度。
 
  2.点样除另有规定外,点基线距底边规定距离,点直径和点间距与纸色谱法相同,点间距看点扩散情况,不影响检测 做样品的时候,注意不要损伤薄层表面。
 
  3.展开油缸时,事先用展开剂使之饱和。 在汽缸中加入足够量的展开剂,将与汽缸相同高度、宽度的滤纸贴在墙壁上,一端浸在展开剂中,密封汽缸顶部的盖子,使系统平衡,或按照本文的规定操作。将样品薄片放入展开缸的展开剂中,浸渍在展开剂中的深度从薄片的底边开始 (请勿将样品点浸入展开剂),密封盖板,展开至规定距离取出薄板晾干,按照各品种以下的规定进行检查。
 
  4.用薄层扫描仪扫描检测色谱斑点,或直接扫描色谱斑点到薄层上定量上可以利用薄层扫描法。薄层扫描的方法除另有规定外,还依据各种薄层扫描仪的结构特征和使用说明根据具体情况,选择吸收法或荧光法,以二波长或一波长进行扫描。 对薄层扫描的结果产生影响原因很多,在保证供试品的斑点在一定浓度范围内形成线形的基础上,与供试品对照品在同一薄层展开扫描,比较定量,减少误差。 有各种各样的供试品只有得到分离度和再现性好的薄层色谱,才能得到满意的结果。
 
  由于资料有限,因而上述内容并不全面,欢迎补充。

薄层色谱仪的适用

    薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱;

    它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大;

    因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。

    此外,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。

    薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上;

    凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时;

    将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

    薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。

    是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。

    一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离;

    另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。

    因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。

    此外,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。

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薄层色谱仪的应用如何?

    薄层色谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。

    待点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。

    薄层扫描仪是可以对斑点进行扫描的专用分光光度计,用可见光或紫外光作光源,线性扫描或锯齿扫描薄层板展开后的斑点;

    该斑点就吸收该组分特征波长的单色光,剩余的单色光经透射或反射或发射荧光,由检测器积分起来,获得这块斑点面积的待测物质含量。

    薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。

    一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离;另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。

    因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。

    此外,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。

    薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂;

    带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上;

    凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。

    待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

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