我们该如何使用紫外可见光光度计进行杂光散光测试呢?下面跟我一起来了解一下吧。
据了解，有的紫外可见光光度计只测试220nm处的杂散光，不测试340nm处的杂散光，这样是不正确的，需测试220nm处杂散光是因为：
①根据仪器学理论中的电光源理论，氘灯在220nm处能量很小，即信号很小，容易显现杂散光;
②根据仪器学理论中的光电发射理论，光电倍增管在220nm处的光谱响应(灵敏度)低，容易显现杂散光。
③根据量子光学理论，波长是能量的倒数，波长短能量大，容易产生杂散光，而220nm处属于短波部分;
而测试340nm处杂散光的原因是完全不同的，因为340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方，此时容易产生杂散光。所以，对于紫外可见光光度计来讲，应该测试220nm和340nm两处的杂散光。
紫外可见光光度计杂散光测试步骤：
1、首先将参比液注入配对石英石吸收池，分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。
2、将减光片插入试样光路的滤光片槽内，其读数即为减光片的衰减值K，然后将减光片插入参比光路的滤光片座内，
3、将石英吸收池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液，插入试样试样池座中，在相应的波段内扫描、打印;在记录纸的作标上量取测定波长处的透光度，乘以衰减值K，即得各测定波长处的杂散光值。
我们如何来评价一台紫外可见分光光度计的优劣呢？首先，我们要来考察它的外观。然后，我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标：
1、杂散光它指不应该有光的地方有了光。
它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。
2、光度准确度光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。
它是用户对仪器的直接要求，每个用户都必须重视。
3、噪声噪声也是仪器的重要指标之一。
它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。
4、光谱带宽指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。
表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律，光谱带宽应该是越小越好的，但是如果仪器的光源能量弱，光学传感器的灵敏度低时，光谱带宽小了，也得不到理想的测量结果的。所以，选择和使用仪器时一定注意。
5、稳定性稳定性是使用者较为关注的指标之一。
仪器的宗旨就是稳定可靠，不稳定更谈不上可靠了。
6、噪声噪声也是仪器的重要指标之一。
它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。
7、波长的准确度和重复性仪器的每个值都是在一定的波长下测得的，如果所示的波长和实际波长偏差万里，那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢？可见这个指标的重要性。
总之，这几个指标都是相互独立又相互关联的，每个指标对仪器的使用都有很大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时，多做比较，多做判断，切实找到一个稳定可靠的好帮手。
我们选择时需要根据自己实验室的需要，主要考虑光学构造和光源、检测方法、样品类型和数据处理等因素。
1.光学构造
一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。
双光束型则是通过一个斩光轮（mirroredchopperwheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移（lampdrift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
2.样品类型
在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。
用小试管装样品容量一般从1μl-5ml，并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。
3.光源和检测方法
分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。
紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。
有的仪器可以选择多种光源：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。
分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。
4.样品类型
在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。
用小试管装样品容量一般从1μl-5ml，并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。
5.数据管理
大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器，通常与PC机一起联用，需要从制造商提供额外的软件。
由此可见紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中，在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。
752紫外可见分光光度计由光源室，单色器，试样室，光电管，微电流放大器，对数放大器，数字显示器及稳压电源部分组成（下图为工作原理图）。
操作流程及注意事项： （1）将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小），打开样品室盖子。 （2）按电源开关（开关内2只指示灯亮），钨灯点亮；按氢灯开关（开关内左侧指示灯亮），氢灯电源接通；再按氢灯触发按钮（开关内右侧指示灯亮），氢灯点亮。仅器预热30min。 （3）选择开关置于“T”。 （4）打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0% ”透光率旋钮，使数字显示为“000.0（T）” (5)将波长置于所需要测的波长。 (6)将装有溶液的比色皿放置于比色皿架中。 (7)盖上样品室盖，将参比溶液比色皿置于光路，调节透光率100%旋钮，使数字显示为“100.0”[若显示不到100.0(T)，则可适当增加灵敏度的档数，同时应重复（4)，调整仅器的“OOO.O(T)”]。 （8）将被测溶液置于光路中，数字显示器上直接读出被测溶液的透光率（T)值。 （9）吸光度4的測量：参照（4)和（7)，调整仅器的“000.0”和“100.0”，将选择开关置于“A”，旋动吸光度调整旋钮，使得数字显示为“000.0”，然后移入被测溶液，显示其吸光度A。 (10)浓度C的测量：选择开关由“ A”旋至“C”，将已标定浓度的溶液移入光路，调节 “浓度”旋钮使得数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，即可读出相应的浓度值。 (11)如果大幅度改变测试波长时，需要数分钟后，才能正常工作（因波长由长波向短波或由短波向长波移动时，光能量变化急剧，使光电管受光后响应缓慢，需有光移响应平 衡时间）。 （12）仅器在使用时，应常参照本操作方法中（4)和（7)进行调“000.0”和“ 100.0”的工作。 （13）每台仅器所配套的比色狐不能与其他仅器上的比色狐单个调换。 （14）仅器数字显示后背面带有外接插座，可输出模拟信号，插脚1为正，插脚2为负，接地线。 （15）仪器使用完毕后，应关机，罩上防尘罩，并及时更换干燥剂。比色皿用完后应清洗干净，擦干放于比色皿盒内。
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