紫外分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。
紫外可见分光光度计详细操作流程及校准方法: 一、紫外可见分光光度计光度测量 在模式选择屏幕中选择<1.Photometric光度>选项,将显示参数配置屏幕; 用GOTOWL键设定测量波长; 按F2键设定进样控制; 按START/STOP键时,测量开始,显示测量屏幕; 如需做空白校正,应在测量前先设置空白样品,然后,按AUTO-ZERO键,将测量值置为OABS(100%); 二、紫外可见分光光度计校正 开机预热10分钟足矣; 放入黑块和标样(没有的自己配),关闭盖子; 校0; 把灯光对着黑块,把透光度调0; 把灯光对标样,将吸光度调到100%; 三、参比溶液介绍 参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时,基体中,虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。 四、紫外可见分光光度计使用注意事项 1.开机前应先预热15分钟,然后开机自检; 2.湿度要控制在75%左右,温度在5~30度之间; 3.仪器要稳压电源,接地要好。并且避免阳光直接照射; 5.常见故障及处理方法: 光门不能完全关闭:修复光门部件,使其完全关闭; 透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮; 仪器严重受潮:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥,并更换干燥剂;以上为紫外可见分光光度计的具体操作方法及使用注意事项,希望能给予您帮助。
紫外分光光度计主要应用于对有机物、无机物、蛋白、细菌生长浓度进行定量,被广泛的应用于科研、化工、制药、环保、卫生、防疫等多个行业当中。我们在选择紫外分光光度计的时候对于它的选购方法是必须要掌握的,今天小编就来为大家具体介绍一下紫外分光光度计的选择方法吧。 1、仪器的光度准确度 光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的关键要求,需要优先考虑。 2、仪器的杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源,一般这个值越小越好。 3、仪器的光谱带宽 是指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。体现仪器的光谱分辨率。按照比耳定律,一般情况下光谱带宽应该是越小越好,但如果仪器的光源能量弱,光学传感器的灵敏度低时,光谱带宽小了,也得不到理想的测量结果的。所以,选择和使用仪器时一定注意多方面考虑。 4、仪器的稳定性 稳定性是用户较为关注的核心指标了,性能稳定可靠是基本的要求。 5、仪器的噪声 噪声也是仪器的重要参数指标,它体现了仪器的做稀溶液的能力。噪音指标无疑越小越好。 6、仪器波长的准确度及重复性 仪器的每个值都是在一定的波长下测得的,如果所示的波长和实际波长偏差过大,那么测出的值和真值的同样相差很大,就谈不上准确了,所以说准确度这个指标非常重要。