超微量分光光度计如何使用,有哪些注意事项?
一:超微量分光光度计是精密光学仪器,出厂前经过精细的装配和调试,如果能对仪器进行恰当的维护和保养,不仅能保证仪器的可靠性和稳定性,也可以延长仪器使用寿命。
二:超微量分光光度计常用于定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。
三:超微量分光光度计的工作原理是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域 ,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门 ,紫外可见分光光度计督有广泛而重要的应用。
四:超微量分光光度计是精密光学仪器,正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。下面分享一些超微量分光光度计不可不知的保养常识。
(1)仪器工作环境的要求
分光光度计对工作环境的要求如下。
①仪器应安放在干燥的房间内,使用温度为5~35℃.相对湿度不超过85%。
②仪器应放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的振动或持续的振动。
③室内照明不宜太强,且应避免直射日光的照射。
④电扇不宜直接向仪器吹风,以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用。
⑤尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。
⑥供给仪器的电源电压为AC 220V±22V,频率为50Hz±1Hz,并必须装有良好的接地线。推荐使用功率为1000w以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器,以加强仪器的抗干扰性能。
⑦避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用。
(2)仪器的日常维护和保养
①光源。光源的寿命有限,为了延长光源使用寿命,在不使用仪器时不要开光源灯,应尽量减少开关次数。在短时问的工作间隔内可以不关灯。刚关闭的光源灯不能立即重新开启。仪器连续使用时间不应超过3h。若需长时间使用,好间歇30min。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置,不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附。若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。
②单色器。单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内,不能拆开。选择波长应平衡地转动,不可用力过猛。为防止色散元件受潮生霉,必须定期更换单色器盒干燥剂(硅胶)。若发现干燥剂变色,应立即更换。
③吸收池。必须正确使用吸收池,应特别注意保护吸收池的两个光学面。
④检测器。光电转换元件不能长时间曝光,且应避免强光照射或受潮积尘。
⑤当仪器停止工作时,必须切断电源。
⑥为了避免仪器积灰和沾污,在停止工作时,应盖上防尘罩。
⑦仪器若暂时不用要定期通电,每次不少于20~30min,以保持整机呈干燥状态,并且维持电子元器件的性能。
分光光度计本仪器专供于工厂、医院、环保、学校及科研部门的化验室,在可见光谱区域对物质的含量进行定量定性分析。
分光光度计图片
分光光度计结构组成:
1.低杂散光的光栅单色器;
2.电表指示透射比和吸收比;
3.波长显示器为三位机械计数器,准确直观;
4.体积:458mm*345mm*210mm;
5.重量:(Net.WT)12Kg。
分光光度计参数:
1.波长范围:330-900nm
2.波长准确度: 2nm
3.透射比准确度: 1.5% (T)
4.透射比重复性:0.3% ( T )
5.杂散光 :< 1.0% ( T ) at360nm
可见分光光度计参数
1.波长范围: 200-1000nm 波长重复性:0.5nm
2.波长精度:±1.0nm 光度精度:±0.5%T
3.光谱带宽:2nm 波长显示:LCD2×20bit;精确至0.1nm
4.杂散光:≤0.2%T 220nm340nm处
分光光度计性能指标
重复性是指不同测试结果的一致性
准确性是指测试结果和真实值比较的差异大小
重复性好,意味着可以通过定标的办法提高准确性
选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的最关键的指标有三点:一是波长范围,二是波长准确度,三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定,波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低,表示性能越好。
紫外可见分光光度计是化验室常用的定量分析仪器之一,型号品种繁多;
如何选择一台适用于您的分光光度计,请参考以下的选型方案:
1 从波长范围选择
既定出需要的波长范围,是属于紫外区(190nm-340nm),还是可见区(340nm-1100nm),或者是紫外可见全区域。
2 从波长带宽选择
不同的行业对于分光光度计的波长带宽有着不同的要求,单款越窄仪器的性能越优良但是相对价格也越昂贵。
不是每个行业都需要有比较窄的带宽,而是根据用户的需求去进行选择,只要适用就是好的。
提到带宽,就必须提到杂散光,带宽较窄的情况下,一般杂散光也越小,杂散光确实也是衡量一台分光光度计的主要技术指标。
3 从附加功能选择
分光光度计的常见附加功能不外乎,全波长扫描及动力学扫描(时间扫描)。
全波长扫描指的是从波长的最低点到最高点或者设定的波长范围;
仪器可以自动的把每个设定波长点的析光度或者透过率,全面的反映在扫描图谱上,得出样品在不同波长点的吸收特性。
动力学扫描也称为时间扫描,主要是应用于随时间变化样品的性质也发生变化的实验,我们用动力学扫描就可以比较清晰的看见某些样品随时间变化而变化的特性。
还有一些,双波长或者多波长的功能,主要是应用于一些需要测定几点不同波长的的样品。
4 随机软件及工作站
随着电脑的普及,越来越多的分光光度计可以携带随机软件与电脑联机进行数据分析计算甚至于反控;
在选择分光光度计的时候,也可以按实际需求去选择是否需要随机软件配置电脑,更方便的开展实验工作。