日常中经常会遇到液相色谱仪使用过程中冒出气泡,一般是由于温度上升,压力下降造成的。
温度上升或柱温上升,当接近试剂沸点时,试剂汽化产生气泡,试剂中已含微小气泡,因加热变大而产生气泡。压力下降产生气泡,流动相中一直包含微小气泡,无论超声过滤,均不能池底去掉它,那么当压力下降时,微小气泡将长大,且多个小气泡易聚集成大气泡,而影响正常实验。
气泡产生原因分析处理:
1、泵头:泵头是压力变化最剧烈的地方,也是最易产生气泡的地方,泵头靠负压而吸液,而负压必然使流动相中的小气泡长大,当泵腔变正压时,已长大的气泡未必能全部变小流入后续液路,则泵腔内将积存气泡,从而影响吸液精度,鉴于此,泵头上专门设计了排气阀,便于泵头排气,观察柱压稳定了说明泵头排气成功。
2、吸液白管长气泡。
a、吸液白管接触空气部位漏气,产生可见气泡,吸液白管是常压和负压交臂变化部位,其漏表现为大气进入白管内,而不易见到管内液体漏出。
处理方法:更换白管。
b、滤头堵:滤头堵使得液体流入滤头的速度下降,泵强制吸液而产生真空气泡。
判断:拔掉滤头不再长气泡则是滤头堵。
处理:A、30%硝酸水液超洗滤头,20分钟左右。
B、水超洗滤头,注意换水多超几次。
c、流动相汽化产生气泡。
尤其是夏天室温高,沸点低的试剂易汽化,比如:乙酸,乙mi,氨水,石油醚等易于汽化。
处理:超声,降室温。
一、样品预处理的重要性:
1、样品预处理所用时间远大于色谱分离时间。
2、消耗大量的溶剂和其它化学品,占分析消耗总成本最大。
3、样品预处理是实验的重复性和准确性最差的环节,是影响实验结果好坏的重要因素。
二、样品预处理的目的:
1、除去微粒,减少干扰杂质。
2、浓缩微量组分。
3、提高检测的选择性和灵敏度。
4、改善分离效果。
5、有利于色谱柱和仪器的保护。
6、使样品形式和所用溶剂符合HPLC的要求。
三、样品预处理达到的要求:
1、样品全部转化为低浓度溶液。
2、样品溶液洗脱强度低于流动相,与流动相相溶。
四、样品预处理的原则:
1、在样品预处理过程中,尽可能防止和避免与待测组分发生化学反应。
2、在样品预处理过程中,如果与待测组分进行化学反应,那么这一反应必须是已知的,而且可以定量的完成。
3、在样品预处理过程中,要防止和避免待待测组分被玷污,尽可能减少无关化合物引入制备过程。
4、样品的处理过程应尽可能简单易行,所采用的样品处理装置尺寸应与样品处理量相适应。
5、采样之后应尽可能快的进行样品的分析测定,或使用合适的方法消除可能的变化和干扰。
五、样品预处理方法:
1、过滤、离心:
常用的滤膜材质有纤维素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺应用广泛。
2、加速溶剂萃取:
加速溶剂萃取是在提高温度(50~200℃)和压力(10.3~20.6MPa)下,用溶剂萃取固体或半固体样品。
3、超临界流体萃取:
超临界流体萃取是利用超临界流体对物质的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。
4、固相萃取:
固相萃取是通过采用选择性吸附和选择性洗脱对样品进行富集、分离和净化,可以将其近似地看作一种简单的液固色谱过程。
5、固相微萃取:
固相微萃取是基于涂敷在纤维上的高分子涂层或吸附剂和样品之间的吸附-解吸平衡原理,集采样、萃取、浓缩和进样于一体的无溶剂的样品微萃取方法。
有直接固相微萃取、顶空固相微萃取、膜固相微萃取和毛细管固相微萃取等。
6、液相微萃取:
液相微萃取是基于样品和微升级甚至纳升级有机溶剂之间的分配平衡原理,集采样、萃取和浓缩于一体的环境友好的样品微萃取方法。
有直接液相微萃取、中空纤维液相微萃取和顶空液相微萃取等。
7、衍生化:
有紫外衍生化、荧光衍生化和电化学衍生化等。