日常维护和保养 贮液器:清洁是保持流动相贮液器正常使用的关键,要尽可能使用HPLC级的溶剂和试剂含有缓冲盐和非HPLC级的流动相一定要通过0.5μm的过滤器以除去其中的微粒物质。改变流动相时应防止交叉污染,陈旧的流动相和用久了的试剂瓶应定期废弃,防止生长微生物和组分改变。贮器内壁定期清洗,里面的附件要经常更换。
泵:泵的密封圈是最易磨损的部件,密封垫圈的损坏可引起系统的许多故障。有人建议3个月换一次垫圈。但也不能一概而论,要看垫圈的材料质量,使用压力大小、保养以及缓冲液的情况而定。采取下列措施可以延长垫圈的寿命:
1 每天要把泵中的缓冲液体洗干净,防止盐沉积,泵要浸在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;
2 用HPLC级试剂;
3 用烧结不锈钢沉子。要注意防止因泵阻塞造成压力过高而损坏柱塞杆或烧坏电机。
进样器:停机后要用溶剂冲洗干净进样器内残留的样品和缓冲盐,防止无机盐沉积和样品微粒造成阀转子面磨损或阻塞,严禁用气相色谱那样的尖针头进样。
色谱柱:防止柱性能下降有以下几方面的措施:
1 溶剂的化学腐蚀不能太强;
2 避免微粒在柱头沉降;
3 泵上要装压力限制器,防止压力过高冲击大;
4 流动相PH>7时用大粒度同种填料作预柱;
5 柱头加烧结片不锈钢滤片,需要时加保护柱;
检测器:要保持检测器清洁,每天用后连同色谱柱柱一起冲洗。提倡不定期用强溶剂反向冲洗检测池(拆开柱)。用脱过气的流动相,防止空气泡卡在池内。检测器灯有一定的寿命,不用时不要打开灯。
操作极限:每台泵都有压力上限,系统达到预定值时会自动停泵,这样能保护柱和其他硬件。上限压力设在20MPa以下,泵垫圈和进样阀耐用,但压力上限设定过低会延长分析时间。根据检验设定压力上限在15~20MPa为宜。新柱的压力比较低,随着使用时间加长而压力上升,所以设定的压力上限也应变化。在梯度洗脱中应考虑因流动相的变化而引起的压力变化,避免上限压力过低造成中途停泵。带有微机的系统还需设定压力下限,一般在0.5~1MPa,在贮器中流动相被抽干或严重渗漏时会自动停泵。有时下限压力设在0也会自动停泵。
一.主要技术指标优异: 首先是如何看指标。液相色谱仪的指标很多,有泵的、的、等等。我们认为要看主要技术指标,根据国家标准,仪器的主要指标有噪音,漂移,最小检测浓度,定性定量重复性等。这些指标都要放在系统,回路里去看,去比较。就是需要把各单元装置都要联接好,如接好色谱柱,进样阀,并且要通上流动相。因为您在分析中也都是联接好以后才可以进行分析的,而不是单单用个检测器或是泵的。 然后在这个基础上,我们再去比较这些主要指标。 1.噪音 噪音是指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度,噪音越大,检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好,否则噪音过大将会导致基线不稳,甚至影响分析结果。 2.最小检测浓度(最小检测限) 最小检测浓度是反映仪器灵敏度的重要参数。CL=2×Nd×C/H(CL :最小检测浓度 Nd:噪音C:样品浓度最小检测浓度H:样品峰高)由上式可见,最小检测浓度是和噪音成正比的,噪音越大,最小检测浓度就越大,灵敏度就越低。某些厂家回避了这个指标,说明他们不愿在最小检测浓度的基础上去比较噪音。 3.漂移 漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离**的距离,通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定,从而在一定程度上提高了分析效率。 4.定性定量重复性 定性定量重复性主要是考核仪器稳定性的指标,这对于分析样品来说是非常重要的。好的仪器其稳定性应该是十分优秀的,这就要求多次进样保留时间及含量的一致性,这样做出来的结果才能使人信服。 有的朋友会认为这些指标好像都是检测器的。对的,但是就前面所说条件是要放在整个回路和系统里去看去比较。例如:泵的脉动会直接影响噪音指标,泵的流量准确度、精确度指标,以及密封性不好也会影响相关指标。所以要系统地看指标。例如:某些公司在公布的指标中,噪音和漂移指标写的条件是空池或有的干脆不写。这个指标只考核了UV检测器光学和电气的特性,与实际情况相差甚远,并没有考验泵的压力脉动,液流回路的阻尼和UV检测器流通池的性能。所以我们认为从以上的主要指标中可以反应出仪器的一些真实水平。 二.操作方便: 操作方便性无论是对新手还是成熟的用户都是很重要的。操作越简单,有利于提高分析效率,也为以后分析方法的拓展提供有力的帮助。 三.系统的,整体开发: 这里指的是仪器的整体开发,是一个完整的系统。目前市场上有这个现象,说我的泵是进口的,或者是检测器怎么好,用了什么很多的进口件组装等等。其实这是个误区。液相色谱仪是个复杂的系统,不是整体开发的,各项指标之间、软件和硬件、硬件和硬件等都不匹配,整体水平不会高到哪里去,而且在售后服务方面对用户也是不负责任的。 整体开发的主要优点有:各项技术指标统一、仪器各单元的通信协调、能够建立一个整体的数字化评价系统、体现了企业的科技及开发实力。 国外知名的仪器生产厂家的产品也是整体开发的,所以能够保证仪器的整体水平。 四.稳定可靠,故障率低。 液相色谱柱是一种用于液体色谱分析仪器。 液相色谱柱的日常维护: 1、每次开机时,流速和柱压要逐渐增加,突然迅速增加,会使柱床受到冲击,引起紊乱,产生空隙 2、在进样前使色谱系统充分平衡,是否平衡可由基线加以判断 3、在进样前,检查色谱系统的各个接头,通常由此能发现是否有漏液现象。如有漏液,空气会从漏缝进入系统引起基线漂移,影响峰高和峰面积的重复性 4、不要把柱接头上得太紧,否则易损坏接头螺纹,引起渗漏 5、不要把柱子放在有气流的地方或直接放到阳光下,气流和阳光都会使柱子产生温度梯度造成基线漂移;如果怀疑基线漂移是由温度梯度引起的,可以设法使柱子恒温 6、若仪器用做常规分析,样品种类有限,但分析次数很多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱寿命 7、如果怀疑样品会污染色谱柱,可以用合适的溶剂几百毫升、慢慢冲洗柱子过夜,第二天早晨再用流动相重新平衡柱子约3min、 8、在因装卸、更换、贮存等而挪动柱子时,动作要轻,不要使其受到碰撞,以免柱床因震动产生空隙或通道 9、柱要加标签,新旧分开,不要放在温度变化很大的地方 10、液相色谱柱柱子不用或贮藏时,应封闭并贮存在惰性溶剂中 如何选择一台品质优良的液相色谱仪