X
你好,欢迎来到仪多多。请登录 免费注册
仪器交易网
0我的购物车 >
购物车中还没有商品,赶紧选购吧!

提高液相色谱的效率的几个方面 液相色谱解决方案

时间:2020-06-03    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

    色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标,混合物能否在色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下,色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。

    (1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。

    (2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。

    (3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。

    (4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。

    (5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。

    (6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。

    从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相联系和制约的。只有通过对柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到较佳的工作条件。

 高效液相色谱仪的原理:

  分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数,离子交换色谱法为选择性系数(或称交换系数),凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。
  在条件(流动相、固定相、温度和压力等)一定,样品浓度很低时(Cs、Cm很小)时,K只取决于组分的性质,而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件,在这种条件下,得到的色谱峰为正常峰;在许多情况下,随着浓度的增大,K减小,这时色谱峰为拖尾峰;而有时随着溶质浓度增大,K也增大,这时色谱峰为前延峰。因此,只有尽可能减少进样量,使组分在柱内浓度降低,K恒定时,才能获得正常峰。
 
  仪器使用:
  高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
  与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
  HPLC成为解决生化分析问题Z有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
  液相色谱-质谱联用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等;液相色谱-红外光谱联用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到新的发展。
 
  该仪器应用非常广泛,几乎遍及定量定性分析的各个领域。
  1、分离混合物:高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
  通过与试样预处理技术相配合,高效液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度,可分离并同时测定性质上十分相近的物质,能够分离复杂混合物中的微量成分。并且随着固定相的发展,还可在充分保持生化物质活性的条件下完成对其的分离。
  2、生化分析:由于高效液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域,并已成为解决生化分析问题Z有前途的方法。
  3、仪器联用:高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。高效液相色谱一质谱联用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等:高效液相色谱一红外光谱联用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类等.使环境污染分析得到新的发展。

    造成液相色谱仪流动相供给不畅的原因可能是:流动相已经接近用完了,管路中吸入气体引起泵压力不稳定。    应经常观察贮液器中流动相的量,加足流动相保证所有样品分析完毕。输液管路上安装沉子至瓶底,贮液器盖上留一小孔正好夹住进液器,使其不能上下移动。    过滤器阻塞会引起管道和泵腔真空变化,使压力不稳。当过滤器被微粒所阻塞或长霉时,去掉过滤器后系统会运转正常,换上新的过滤器即可,有时候换上新过滤器任然不畅,那么就需要检查流动相的制备过程,或者换上大孔径的过滤器。不管如何,流动相都要重新过滤。    流速过高、阻力大,造成真空化现象,这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂粘度等引起的。如果流速大于10mL/min,常会出现这种现象,试着用下列方法解决。    1、试用低流速,若问题解决了则再进行下一步;    2、换大孔径的过滤器;    3、增加进液管内径;    4、抬高或加压贮液器;    5、改低流速;    6、不用入口过滤器(但流动相一定要先过滤)。    当贮液器盖子太紧,在贮液器内形成真空,打出的流动相不连续。应松开盖子或留有1mm缝隙。    进液管路阻塞或弯曲折叠会使泵抽不到液,注意调整进液路道或更新。



上一篇:音叉密度计的优点及安装介绍 密...

下一篇:2021全站仪快速架设技巧,详...

  • 手机多多
  • 官方微信订阅号
商品已成功加入购物车!